Relatórios de Aulas Práticas em Laboratório de Nutrição

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CENTRO UNIVERSITÁRIO FACEX
BACHARELADO EM NUTRIÇÃO 
 
 
RELATÓRIOS DE AULAS PRÁTICAS EM LABORATÓRIO
 
 
 
NATAL
2014
 
CENTRO UNIVERSITÁRIO FACEX
BACHARELADO EM NUTRIÇÃO
MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA
DOCENTE:
 Msc. Marcella do Amaral
DISCENTES:
Anna Elisa Paiva Coutinho
Camilla Bacalhau Marinho Ribeiro
Muriel Puppy Naftali Ferreira
Priscila Aline Dantas de Lima
Valleska Sherilyn França Soares
Yasmin Licya Pedrosa de Araújo
RELATÓRIOS DE AULAS PRÁTICAS EM LABORATÓRIO
NATAL
2014
RELATÓRIO DE PRÁTICAS
PRÁTICA 01.
Objetivo:
	Observar e demonstrar a presença de microrganismos nos mais variados elementos do local onde nos encontramos.
Materiais:
- 02 Placas de Petri com meio de cultura (ágar nutriente)
- 02 cotonetes
- Etiquetas de identificação
- Caneta retroprojetor
Metodologia:
	A 1ª placa de Petri, contendo o meio de cultura ágar nutriente, foi dividida em quatro zonas, com o auxílio da caneta retroprojetor, a seguir, foi exposta cada quadrante da placa ao contato de diferentes materiais, colhidos com o auxílio dos cotonetes, sendo eles: Celular, bancada, dinheiro e sola do sapato.
	A segunda placa de Petri, contendo o meio de cultura ágar nutriente ficou aberta durante 15 minutos, contado o tempo, a placa foi fechadas, e ambas as placas, 1 e 2, após devidas anotações de identificação na etiqueta, foram incubadas na posição invertida à temperatura de 30ºC durante sete dias, para posterior avaliação.
Resultados: 
	Advindos cinco dias, as placas foram retiradas para análise, e notou-se a presença de diversas colônias de fungos, bactérias e protozoários.
Na 1ª a sola do sapato continha a maior concentração dessas colônias, entretanto, mesmo assim os outros locais escolhidos também continham bastante desses microrganismos. 
Na 2ª, as bactérias estão em suspensão no ar, em partículas de poeira que ao sedimentarem sobre a superfície do meio de cultura agem como veículo destes microrganismos. Estes, ao serem incubados em condições favoráveis, multiplicam-se formando colônias características. Deve-se ter em mente que todo o material esterilizado exposto ao ar facilmente se contamina. 
PRÁTICA 02.
Objetivo:
	Demonstrar a presença de microrganismos na mão de um componente de grupo e suas possíveis alterações após praticas de desinfecção.
Materiais:
- 01 Placa de Petri com ágar nutriente
- Detergente
- Álcool 70% 
- Etiquetas de identificação
- Caneta retroprojetor
Metodologia:
	A placa foi divida em quatro zonas, com o auxílio da caneta retroprojetor, na parte externa inferior, a mesma foi identificada com os títulos: Mão Suja (MS), Detergente (Det.), Controle (C), e álcool 70% (A). Foi escolhido um dedo da mão de um componente, e sem lavá-lo, posto levemente em contato com a superfície do meio de cultura identificado com (MS), por 30 segundos. Para a próxima zona, o componente lavou as mãos com detergente, secou com papel toalha e em seguida colocou o mesmo dedo em contato com a superfície identificada com (Det.) por 30 segundos. Por último, o mesmo componente, lavou a mãos com álcool 70%, secou ao ar e colocou em contato com a zona identificada por (A), por mais 30 segundos. A placa foi submetida depois de devidas anotações de identificação na etiqueta, foi incubada na posição invertida à temperatura de 30ºC durante sete dias, para posterior avaliação.
Resultados:
	As mãos frequentemente se apresentam contaminadas por uma quantidade variável de microrganismos, nessa placa, percebeu-se uma quantidade enorme de colônias diversas de fungos e bactérias, onde tinha a identificação (MS), na zona de identificação (Det.) notou-se ainda a presença de muitas colônias mesmo após a lavagem, podendo concluir que o detergente é fraco como antisséptico e tem mais ação na remoção mecânica de microrganismos pela diminuição da tensão superficial e lavagem. Na zona (A), observou-se, pouca ou nenhuma colonização de microrganismos, visto que o álcool é bem mais eficaz contra as células bacterianas. O (C), apenas observou o vazamento de uma zona vizinha, não sendo usado para observação, visto que este foi inoculado.
PRÁTICA 03
Objetivo:
	O objetivo desta prática é preparar e fixar esfregaços de culturas de bactérias, usando a coloração Gram e caracterizar as diferentes espécies de bactérias.
Materiais:
- Placas de Petri com culturas de bactérias (Práticas 1 e 2)
- Alça bacteriológica
- Lamparina
- Pinça de madeira
- Lâminas
- Lamínulas
- Água destilada
- Corante cristal violeta
- Lugol
- Álcool
- Corante safranina ou fucsina
- Pipeta Pasteur
Metodologia:
	Essa prática divide-se em duas etapas:
1ª Etapa- Fixação do material
Essa prática foi feita com cultura em meio sólido, colocado uma gotícula de água esterilizada na lâmina, em seguida, foi escolhida uma das zonas do quadrante da placa Petri para retirada de uma pequena quantidade de cultura e misturada com água. Com o auxílio da alça bacteriológica esterilizada na chama, espalhar o material no centro da lâmina com cuidado para não atingir as bordas. Secar o esfregaço no ar, fixando-o em seguida, passando essa lâmina, com o lado do esfregaço virado pra cima, sobre a chama até secar totalmente. Aguardar resfriamento, para proceder com a coloração.
2ª Etapa- Coloração Gram 
Foi gotejada a solução de cristal violeta de maneira a cobrir todo o esfregaço, e deixou agir durante 1 minuto, posteriormente, escorreu o corante e lavou com água corrente, posicionando a lâmina à 45º, para retirar o excesso, dando assim a coloração primeira. Cobriu o esfregaço com lugol (iodo) e deixou durante 1 minuto, escorreu o lugol e repetiu o processo de lavagem em água corrente, esse é o processo de fixação. Lavou-se a lâmina com álcool, para remoção de todo o corante violeta, duração de 10-30 segundos. Procedeu com lavagem normal em água corrente, mantendo a lâmina sempre em inclinação de 45º. Cobriu o esfregaço com Fucsina (safranina), e deixou agir por 30 segundos, após esse tempo, escorrer o corante e lavar mais uma vez com água corrente, para retirar o excesso. Cobriu com uma lamínula e secou-se a parte inferior da lâmina antes de colocar em observação microscópica, 
Sendo solicitado auxílio para colocar o óleo de imersão na objetiva.
Resultados:
	Ao levar a lâmina para análise microscópica, notamos a presença de bactérias de formato, cocos, gram +, pois estas adquiriram coloração roxa. Seguimos à risca, todos os processos de fixação e coloração Gram, mesmo assim, não foi possível a visualização de bactéria gram -, visto que só notaram-se bactérias com coloração roxa.