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TOXOPLASMOSE
Detecção de DNA do Toxoplasma gondii
1. INTRODUÇ‹O
Toxoplasma gondii é um protozoário parasita
intracelular obrigatório de humanos e animais de
sangue quente. Usualmente assintomática, a
infecção é importante em imunocomprometidos,
gestantes e naqueles com acometimento ocular. A
transmissão pela via oral se dá pela ingestão de
carne crua ou pouco cozida contendo cistos, ou
pela ingestão acidental de água ou alimentos
contendo oocistos. Outras vias de transmissão:
transplacentária, hemotransfusão, e transplante de
órgãos sólidos (1).
A infecção adquirida em imunocompetentes é
sintomática em apenas 10% dos pacientes, a
maioria com linfonodopatia auto-limitada. Podem
apresentar febre, urticária, hepatoesplenomegalia,
rash máculo-papular e corioretinite (2,3).
2. IMPORT˜NCIA CL¸NICA
Imunocompetentes com toxoplasmose ocular: é causa
de 85% das uveítes posteriores no Brasil. Pode
resultar de infecção congênita, sendo bilateral, ou
decorrente de infecção recente, neste caso,
unilateral (3).
Imunodeprimidos: em geral é resultado da
reativação, sendo fatal se não tratada. Acomete
pacientes com SIDA, malignidades, em uso de
corticóides, em quimioterapia, transplantados e
aqueles com doenças do colágeno. A
toxoplasmose encefálica é a principal
manifestação na SIDA (1).
Gestantes e Toxoplasmose congênita (TC):
transmissão transplacentária ocorre na infecção
materna recente. Em mães com infecção aguda
não-tratada, infecção congênita ocorre na seguinte
probabilidade: 10 trimestre 10-25%; 20 trimestre
30-54%; 30 trimestre: 60-65% (9). A infecção
transplacentária no início da gestação é mais
grave. Na TC, 85% das crianças infectadas são
aparentemente normais, entretanto, se não
tratadas, podem desenvolver seqüelas oculares e
no sistema nervoso central (SNC) (4).
3. INDICAǛES DA PCR
A PCR (reação em cadeia da polimerase) é
uma técnica baseada na amplificação do DNA do
toxoplasma em fluidos e tecidos corporais.
Paciente Imunodeprimido: estudo inicial deve incluir
IgG. Caso negativo, deve ser repetido anualmente
nestes pacientes, orientando-os quanto a
prevenção. Pacientes com SIDA tendem a títulos
baixos de IgG. O diagnóstico é definido pela
detecção do parasita por PCR, no sangue total ou
material de biópsia (6).
Paciente com acometimento do SNC: pode ser
realizada a PCR no líquor em casos de encefalite,
caracterizada pela presença de múltiplas lesões no
cérebro. Nestes casos, a sensibilidade é de 80% e
a especificidade de 100% (1,6,10).
Paciente com acometimento ocular: a conduta se
baseia, na maioria das vezes, no exame
oftalmológico. Em casos de fundoscopia atípica
ou quando o tratamento não é eficaz, a PCR pode
detectar T. gondii no humor aquoso e vítreo (3,7).
Toxoplasmose congênita - diagnóstico pré-natal:
atualmente, o diagnóstico de infecção fetal é
realizado pela pesquisa do Toxoplasma no líquido
amniótico pela técnica de PCR. A dosagem de
IgM em amostras coletadas por punção do cordão
umbilical, além de ser realizada somente a partir
da 22ª semana de gestação, é pouco sensível, não
detectando baixos níveis de IgM pelos métodos
disponíveis. A PCR no líquido amniótico na 18ª
semana de gestação tem valor preditivo positivo
de 100% e valor preditivo negativo de 99,7%
(5,8,9).
Toxoplasmose congênita - diagnóstico pós-natal: o
diagnóstico da infecção congênita em recém-
nascidos é dificultado pela positividade da IgG,
indicando transferência transplacentária de
anticorpos maternos que permanecem positivos
por cerca de 6 a 18 meses. A presença de IgM,
que não tem passagem transplacentária, pode
indicar infecção fetal, porém não é suficiente para
 
 
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se estabelecer o diagnóstico, visto que o feto pode
produzir anticorpos IgM tardiamente e resultados
falso-positivos podem ocorrer devido à
transmissão passiva de IgM na rotura da placenta.
Atualmente, o método de escolha para o
diagnóstico de toxoplasmose congênita é a
pesquisa de toxoplasma no sangue periférico do
recém-nato ou do cordão umbilical pela técnica
de PCR. A detecção de DNA do toxoplasma pela
PCR pode ser realizada também no líquor e outros
fluidos corporais (5,9).
O quadro abaixo aborda as vantagens e
limitações da PCR para Toxoplasma gondii:
Vantagens da PCR
Detecção rápida e direta do parasita nas
amostras biológicas.
Alta sensibilidade.
Alta especificidade.
Limitações da PCR:
Reações falso-negativas podem ocorrer
quando a quantidade de DNA está
abaixo da sensibilidade de detecção do
teste ou na presença de inibidores da
PCR na amostra.
O Instituto Hermes Pardini disponibiliza a Reação
em Cadeia da Polimerase (PCR) para o
Toxoplasma gondii:
Método:
Nested PCR do gene B1 do Toxoplasma
gondii. São realizadas duas PCRs, sendo
que a segunda reação se dá em uma
região interna à primeira, aumentando a
sensibilidade desse procedimento.
Amostra:
Líquor: 0,5ml.
Material de biópsia: 250mg de tecido
(congelar imediatamente após a coleta).
Líquido amniótico: 2 a 10 ml.
Sangue total colhido em EDTA:
Crianças: 2 ml; Adultos: 5 ml.
Condições de envio:
Colher em tubo ou frasco estéreis.
Líquor e líquido amniótico – refrigerar
overnight.
Tecidos – enviar em gelo seco.
Sangue total – em temperatura ambiente.
4. BIBLIOGRAFIA
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