Seminário Líquido Ascítico

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Análise Citológica do 
Líquido Peritoneal
Autores: Comar SR, Schulz T, Machado NA, França FS, Haas P.
Revista: Estud Biol. 2010/2011 jan/dez;32/33(76-81):73-9
Pontifícia Universidade Católica de Goiás
Escola de Ciências Médicas, Farmacêuticas e Biomédicas
Módulo de Líquidos Corporais – 1° turma 2017/2
Goiânia – Agosto de 2017
Discente: Thais Regina dos Santos
Profª. Renata Jarach
Peritônio
• É uma membrana serosa, lisa e delicada, constituída de
fibroblastos, matriz extracelular, vasos sanguíneos e células
mesoteliais, que reveste a parede e vísceras do abdômen e
pélvis.
http://www.anatomiadocorpo.com/sistema-digestorio-aparelho-digestivo/estomago/peritonio/
Cavidade Peritoneal
• Apresenta dois folhetos, que são o parietal, que reveste a
cavidade abdominal e o visceral, que reveste os órgãos;
https://www.healthresource4u.com/ascites-causes-picture-symptoms-treatment.html
• Entre esses folhetos, existe uma
cavidade virtual denominada
cavidade peritoneal, por onde
circula o líquido peritoneal ou
ascítico.
Cavidade Peritoneal Normal
• Contém aproximadamente 50mL de fluido;
• Líquido transparente, amarelo claro, estéril e viscoso;
• Produzido pelas células da membrana como um ultrafiltrado
do plasma;
• Tanto a sua produção quanto sua reabsorção é dependente
de vários fatores
• Permeabilidade dos capilares peritoneais, forças hidrostáticas no
sistema circulatório, pressão oncótica do plasma e reabsorção
linfática.
Função do Líquido Ascítico
• Proteção da cavidade abdominal, banhando-a e lubrificando-
a, reduzindo, assim, o atrito entre os órgãos e permitindo sua
movimentação durante o processo da digestão;
• Possui importantes papéis no transporte de fluidos e células,
no processo inflamatório, no reparo tecidual, na lise de
depósitos de fibrina, na proteção contra microrganismos
invasores e possivelmente na disseminação tumoral.
Ascite 
• O acúmulo de fluido dentro da cavidade peritoneal constitui
uma efusão peritoneal, chamada ascite;
https://www.mdsaude.com/2009/11/ascite.html
• Classificada de acordo com o grau de severidade e resposta
terapêutica em:
• Ascite descomplicada
• Ascite complicada
• Ascite refratária
Paracentese
• Consiste na remoção de líquido ascítico da cavidade
peritoneal.
• Com a diferenciação do fluido ascítico em transudato ou
exsudato, a determinação da diferença entre a concentração
de albumina no soro e no líquido ascítico é fundamental para
fornecer informações para uma posterior abordagem clínica
e laboratorial.
Líquidos de Edema
• Transudato – normalmente tem origem de fatores
mecânicos traumáticos, que influenciam a formação e
absorção
• Exsudato – é um derrame causado por lesão dos
revestimentos mesoteliais, de causa inflamatória, infecciosa
ou neoplásica.
Parâmetros
• Relação entre albumina do soro e albumina 
do líquido ascítico ≥ 1 g/dL associados a 
níveis de proteína menores que 3,0 g/dL
Cirrose
• Relação entre albumina do soro e albumina 
do líquido ascítico ≤ 1,1 g/dL associados a 
níveis de proteína elevados
Doença 
Peritoneal
• Ambos os parâmetros acima dos níveis 
críticos propostos 
Hipertensão 
Portal Pós-
sinusoidal
Diagnóstico
• O diagnóstico precoce da ascite é extremamente
importante, considerando que algumas formas são benignas
e possuem bons prognósticos.
• No entanto, outras podem se expressar como forma de
patologias muito agressivas, potencialmente letais, que, se
não descobertas a tempo, podem apresentar poucas
chances de cura
Análise Laboratorial do Líquido Ascítico 
Coleta da amostra
Transporte e armazenamento
Preparo de amostra
Exame físico
Contagem global de células
Análise Laboratorial do Líquido Ascítico 
Contagem diferencial de 
leucócitos
Análise morfológica das 
células
Controle de qualidade das 
contagens
Detecção de células malignas
Biossegurança
1. Coleta da amostra
• Ultrassonografia para confirmar a presença do líquido e
determinar o melhor local para a coleta.
• Para grandes volumes: o paciente é colocado em uma
posição supina, com uma inclinação de 30° a 45°;
• Para pequenos volumes: em decúbito lateral;
• A agulha (calibre 22) é inserida na parede abdominal, após
anestesia local, e é anexada a uma seringa que varia de 20 a
50 mL.
http://www.medicinageriatrica.com.br/2009/03/12/cirrose-hepatica-ascite/
1. Coleta da amostra
• São necessários ao menos 30 mL para a avaliação completa
do líquido ascítico. Se possível, 100 mL devem ser fornecidos
para o exame citológico.
• As amostras devem ser coletadas em três tubos
identificados:
• 1° - com EDTA ou heparina para contagem global e diferencial;
• 2° - sem anticoagulante, para as análises bioquímicas;
• 3° - estéril para a microbiologia.
1. Coleta da amostra
• Critérios para uma paracentese bem sucedida:
• quantidade suficiente de fluido na primeira coleta;
• ausência de complicações;
• mínimo de desconforto ao paciente durante o procedimento
• Complicações:
• perfuração de órgãos abdominais;
• desvio da agulha do local indicado;
• deposição de fragmentos do cateter no local da incisão;
• sangramentos.
2. Armazenamento
• A análise deve ser realizada o mais rápido possível!
• Caso o exame citológico não possa ser realizado
imediatamente, a amostra deve ser refrigerada entre 2° e
8°C para que suas características morfológicas sejam
mantidas por até 48h.
3. Preparo da amostra
• Contagem de células nucleadas em câmara: amostra fresca,
homogeneizada e não centrifugada.
• Lâmina: centrifugar em baixa rotação e ressuspender o
sedimento com solução salina, pois a sobreposição de
células deve ser mínima.
• Em concentrações ideais, forma-se uma única camada de
células, facilitando a visualização.
• Amostras coaguladas, não identificadas ou envelhecidas
devem ser rejeitadas.
4. Exame físico
• Aspecto visual (citrino, hemorrágico, purulento, etc.)
• critério inicial para agrupar diversas hipóteses diagnósticas e
direcionar para exames específicos de análise laboratorial.
• O aspecto e coloração devem ser anotados antes da
centrifugação;
• Fisiologicamente, o líquido ascítico é transparente, amarelo
claro, estéril e viscoso.
4. Exame físico
• Infecções bacterianasTurbidez
• Perfurações do TGI, Pancreatite e 
ColecistiteEsverdeado
• Efusão quilosa ou pseudoquilosaLeitoso
Vermelho vivo • Hemorragia - 100.000 hem/µL
Obs: em casos de punção traumática, o clareamento do líquido é
observado no decorrer da paracentese.
5. Contagem global de células
• Importante na diferenciação de transudato e exsudato;
• Tipos celulares que podem ser encontrados: eritrócitos e as
células nucleadas, que incluem leucócitos e células
mesoteliais.
• Câmara de Neubauer:
• Células nucleadas contadas nos quatro quadrantes laterais;
• Eritrócitos contados no quadrante central, que varia de acordo
com a celularidade da amostra.
6. Contagem diferencial de leucócitos
• Diferentes procedimentos e equipamentos podem ser
utilizados para a confecção da lâmina onde se realiza a
contagem diferencial:
• A câmara de Suta concentra as células da amostra,
fornecendo um esfregaço de boa qualidade
• a coloração da lâmina é feita com May Grunwald-Giemsa ou
outros corantes de Romanowsky.
• A citocentrífuga concentra as células e um papel de filtro
absorve o sobrenadante
• o sedimento é ressuspenso com salina e após a secagem da
lâmina ela é corada.
6. Contagem diferencial de leucócitos
• Com a lâmina pronta:
• 1° observa-se agrupamento e distribuição celular, em objetiva
de 10x e 40x
• 2° observa-se em objetiva de 100x, com óleo de imersão.
• Após a centrifugação, as células podem sofrer alterações e
apresentar-se destorcidas com vacúolos,fendas, nucléolos
proeminentes e agrupamentos semelhantes à neoplasias.
• As contagens celulares variam de acordo com a formação e
resolução da ascite.
• a diurese que pode aumentar a contagem leucocitária de 300
células/µl até 1.000 células/µl.
7. Considerações sobre a análise morfológica 
das células
• Nas objetivas de 10x e 40x é dada uma visão geral da
qualidade da amostra
• Estima a celularidade, examina os agregados celulares,
identifica agentes infecciosos grandes, como leveduras e
elementos fungoides, e determina as melhores localizações da
lâmina, onde as células estão em uma monocamada.
• O aumento de 100x é utilizado para examinar as bactérias e
estruturas celulares pequenas, como as inclusões.
7. Considerações sobre a análise morfológica 
das células
• As características celulares importantes incluem a
celularidade da amostra, a distribuição celular, tamanho e
forma das células e a aparência citoplasmática;
• As características nucleares incluem o tamanho, a forma e a
posição do núcleo dentro da célula, o número de núcleos
atuais, o padrão da cromatina do núcleo, a aparência dos
nucléolos e a presença de figuras de mitose;
• As características do fundo da lâmina citológica também
devem ser observadas, não devem ser negligenciadas.
7. Considerações sobre a análise morfológica 
das células
• Acúmulo de produto secretado por 
células secretorasFundo pesado
• Nas lâminas de exsudato inflamatório 
sugere alto teor de proteínas
Finamente 
granulado
• Quantidades elevadas de 
mucopolissacarídeos como mucina
Grosseiro 
granulado
Obs: a presença de bactérias, cristais, gotas de lipídeos, materiais
nucleares das células rompidas e de materiais estranhos como, por
exemplo, pólen, talco ou cristais do amido, deve ser descrita no resultado.
8. Controle de qualidade das contagens
• Importante para evitar interferentes na contagem.
• O controle de qualidade das contagens em câmara pode ser
feito diluindo uma amostra de sangue total em EDTA e
comparando os resultados obtidos manualmente com os
obtidos em analisadores hematológicos automatizados
• Para o controle da contagem de células nucleadas, deve-se
escolher uma amostra com ± 10.000 leucócitos/μl na contagem
automatizada e fazer a contagem manual em câmara de
Neubauer, de preferência diluindo-se a amostra em líquido de
Turk para hemolisar os eritrócitos.
9. Detecção de células malignas no líquido 
ascítico
• As causas mais comuns de ascite são as doenças malignas
acompanhadas da cirrose;
• Células neoplásicas no líquido ascítico são significativas, pois
indicam a propagação de células de outros órgãos, ou seja,
está ocorrendo uma progressão tumoral;
• Células mesoteliais podem ser confundidas com células , já
que podem reagir a vários tipos de estímulos e ferimentos;
• Essas alterações podem ser ainda mais acentuadas após
radioterapia ou quimioterapia associadas à cirurgias e
tratamento dessas malignidades.
10. Biossegurança
• O líquido ascítico é uma amostra contaminante, portanto, é
necessário o uso de EPI’s.
• O ideal seria que todos os laboratórios possuíssem e
utilizassem câmaras de fluxo laminar vertical, para maior
segurança do operador.
Obrigada!