AULA 4 BACTERIOLOGIA II

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MICROBIOLOGIA
Aula 7: Bacteriologia II
Microbiologia
AULA 7: BACTERIOLOGIA II
Conteúdo desta aula
PAREDE CELULAR 
BACTERIANA
1
MÉTODO DE 
COLORAÇÃO DE GRAM
2
REPRODUÇÃO 
BACTERIANA
3
CURVA DE CRESCIMENTO 
BACTERIANO
4
MICOPLASMAS
E RIQUÉTSIAS
5
PRÓXIMOS 
PASSOS
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Parede celular bacteriana
• A parede celular é a estrutura presente externamente à membrana celular de bactérias do
Domínio Eubactéria.
• A parede celular bacteriana pode ser identificada pelo Método de coloração de Gram, criada
em 1884 pelo bacteriologista Hans Christian Gram.
• As que se coram de roxo (azulado) são denominadas Gram positivas, enquanto as que se coram
de vermelho (róseo) são denominadas de Gram negativas.
https://claraealinebioifes.files.wordpress.com/2011/04/gram-negativas-e-positivas.jpg
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Parede celular
GRAM POSITIVAS → Apresentam extensa camada de peptideoglicano, com ácidos teicoicos e
lipoteicoicos inseridos nessa.
GRAM NEGATIVAS → Apresentam espaço periplásmico, fina camada de peptideoglicano e outra
membrana celular externa.
http://www.microbiologybook.org/Portuguese/bact-mem-port.jpg
http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/bacterias/imagens/bacterias3g.jpg
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• Composição básica:
– peptideoglicano  polímero exclusivamente 
encontrado no domínio Bacteria:
• N-acetilglicosamina (NAG),
• ácido N-acetilmurâmico (NAM), 
• Tetrapeptídeo (L-alanina, ácido 
glutâmico, L-lisina e D-alanina )
• Organização:
– esqueleto de NAG e NAM ligações entre os 
tetrapeptídeos de cadeias adjacentes 
enorme rigidez. 
Parede Celular
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Parede celular - GRAM +
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• Apenas cerca de 10% da parede corresponde ao peptideoglicano:
– uma ou duas camadas;
– restante: membrana externa.
Parede celular - GRAM 
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• Membrana Externa:
– acima do peptideoglicano, 
– contém fosfolipídeos, 
lipoproteínas, proteínas e 
lipopolissacarídeos,
– corresponde a uma segunda 
bicamada lipídica  semelhante à 
membrana plasmática
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• Hans Christian Gram (1884)  desenvolveu método de 
coloração de bactérias que permitia sua separação em 
dois grupos distintos:
– Gram positivas (Gram +)  coloração roxa;
– Gram negativas (Gram ) coloração vermelha. 
Método de coloração de Gram
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Método de coloração de Gram
http://biomedicinaparatodos.blogspot.com.br/2015/06/coloracao-de-gram-sabe-o-que-e-entenda.html
TÉCNICA DE COLORAÇÃO DE GRAM
O Método de coloração de Gram é a técnica aplicada para a identificação da parede celular
bacteriana.
Reagentes utilizados:
• Violeta de genciana (Cristal 
de violeta) 
• Lugol (Iodo)
• Solução álcool-acetona
• Fucsina
Os micoplasmas e as
micobactérias não se coram
pelo Método de Gram.
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Método Ziehl Neelsen
As bactérias do gênero Mycobacterium (micobactérias) não se coram pelo Método de coloração de
Gram.
São bacilos-álcool-ácido-resistentes (BAAR) e possuem, externamente à parede celular, uma camada
composta por ácidos micólicos.
Os BAAR são corados pelo Método de Ziehl Neelsen.
http://image.slidesharecdn.com/micatip2008alessandram-141101183410-conversion-gate01/95/micobactrias-atpicas-de-crescimento-
rpido-no-tuberculosa-3-638.jpg?cb=1414866986http://www.scielo.br/img/revistas/abmvz/v60n5/09f1.jpg
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Reprodução bacteriana
• Crescimento microbiano é o aumento na quantidade de células.
• O crescimento ocorre por divisão binária (fissão binária).
• Bactérias formam colônias e estas podem ser vistas a olho nu.
• Cada bactéria possui taxa de crescimento e tempo de geração específicos. 
http://gerencia.ambientebrasil.com.br
/midia/imagens/81.gif
http://static.hsw.com.br/gif/bacteria-2.jpg
VARIAÇÃO NA FORMA, ELEVAÇÃO E MARGEM DAS COLÔNIAS
http://lh4.ggpht.com/-0lnFKtdgXYo/UgGjyVg1FzI/AAAAAAAAOa8/csgOUZ-zDK8/colonia%25255B2%25255D.png?imgmax=800
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Crescimento bacteriano
• Taxa de crescimento – variação na
quantidade de células por unidade de
tempo.
• Geração – intervalo em que uma célula
origina duas novas.
• Tempo de geração – tempo necessário
para a população bacteriana dobrar em
número.
• Crescimento exponencial – padrão em
que o número de células é duplicado a
cada período de tempo (2, 22, 24, 28,...)
http://www.ebah.com.br/content/ABAAA
eu6QAE/fisiologia-microbiana?part=2
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Curva de crescimento
Em meio de cultura (sistema fechado), o crescimento bacteriano ocorre em etapas, denominadas:
Fase lag, Fase log (ou exponencial), Fase estacionária e Fase de declínio (ou morte).
As fases da curva de crescimento em sistema fechado são: 
N
º 
d
e 
b
ac
té
ri
as
Tempo (h)
Lag Log Estacionária Declínio
Fase Lag → Período de repouso e adaptação ao meio.
Fase log ou exponencial → Período de divisão celular
intenso.
Fase estacionária → Período de equilíbrio, em que a
quantidade de células novas equivale a de células
mortas.
Fase de declínio ou morte → Período com progressão
de células mortas.
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Meios de cultura
• O cultivo bacteriano pode ser realizado, fornecendo as condições ótimas para cada espécie
bacteriana.
• Os meios de cultura são substâncias suplementadas de nutrientes e elementos químicos,
necessários ao metabolismo bacteriano.
• Existem meios de cultura sólidos, líquidos
ou semissólidos.
• Os meios sólidos, em geral, são produzidos
com a alga Agar agar e são específicos para
gêneros ou espécies bacterianas.
MEIO SÓLIDO MEIO LÍQUIDO
http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/file
s/2010/05/65bi.jpg
http://www.prolab.com.br/blog/wp-content/uploads/2014/12/1-Meiodecultura1.jpg
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Meios de cultura
Meios de cultura: http://www.biomedicinabrasil.com/2010/09/meios-
de-cultura.html#.Vk6QwnarTIU
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Meios de cultura
Os meios de cultura podem ser enriquecidos, seletivos, diferenciais e redutores.
Exemplos de meios de cultura:
• Ágar sangue de carneiro
• Ágar chocolate
• Ágar manitol salgado
• Ágar Mac Conkey
• Ágar Mueller-Hinton,
• Ágar salmonella-shigella
Meios de cultura
http://www.ufjf.br/microbiologia/files/2
012/11/Meios-de-cultura-usados-no-
laborat%C3%B3rio-e-
colora%C3%A7%C3%B5es.pdf
http://static1.squarespace.com/static/50e713f4e4b0888041877c38/t/524c4699e4b0ad97e93c2591/1432216489782/iStock_000019289346Large.jpg
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Meios de cultura
http://www.cenapro.com.br/images/noticias/beleza-eswcondida-escola-focus.jpg
Arte em meios de cultura: 
http://www.microbialart.com/galleries/
Crescimento bacteriano em diferentes meios de cultura
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Coleta de material
Para a identificação bacteriana, é necessário a coleta do material. Em geral, a coleta de superfícies é
feita com swab estéril. Urina e secreções são coletados em frascos, e sangue em tubos ou frascos
de hemocultura.
https://www.bd.com/resource.aspx?IDX=3562
https://www.bd.com/scripts/brasil/productsdrilldown.asp?CatID=115&SubID=
308&siteID=10056&d=brasil&s=brasil&sTitle=&metaTitle=Microbiologia&dc=br
asil&dcTitle=BD+-+Brasil
Coleta com swab Frascos de hemoculturaColeta de hemoculturahttp://www.sciencecodex.com/aggregated-
images/tech/jIv3x1W938BxXzHX.jpg
Coleta com frascos
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Identificação bacteriana
A identificação da espécie bacteriana pode ser feita por meio de testes bioquímicos, sistema
automatizado, sistema API (Analytical Profile Index), laminocultivos ou culturas indicadoras.
http://www.biomerieux.pt/upload/API_ID41.jpg
http://www.interlabdist.com.br/produtos/mostra_
produto/1573,urilab-cromoclin-trio-c10un
http://images.slideplayer.com.br/18/5764974/slides/slide_1
.jpg
Testes bioquímicos Sistema API laminocultura
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Micoplasmas
O gênero Mycolasma pertence à família Mycoplasmateceae.
São menores que as demais bactérias do Domínio Eubactéria e não possuem parede celular.
Algumas espécies apresentam estruturas semelhantes à micélios de fungos e, por isso, foram
designados como micoplasmas.
Causam, principalmente, infecções do trato respiratório.
http://ibiantech.com/wp-content/uploads/2013/09/Micoplasma.jpg
http://www.icb.usp.br/bmm/ext/arquivos/imagens/timenetsky%20micoplasma.jpg
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Riquétsias
O gênero Rickettsia pertence à Família Rickettsiaceae. São bactérias muito pequenas, quase não
vistas ao microscópio óptico.
São, obrigatoriamente, parasitas intracelulares e costumam parasitar piolhos, pulgas e carrapatos.
O tifo é causado pela Rickettsia prowasekii, transmitida por piolhos, enquanto a febre maculosa é
causada pela Rickettsia rickettsii, transmitida por carrapato.
https://dnaeoutrascoisas.files.wordpress.com/2014/02/slide2.jpg
http://cdn.doutissima.com.br/content/uploads/2013/09/febre-maculosa.jpg
https://lh4.googleusercontent.com/-hma-n1xcYCc/UBqTO01CZnI/AAAAAAAAB4I/cB5cl8msoCg/s300/tifo-
epidemico.jpg
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