2. AMOSTRAGEM

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Análise de Sementes
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AMOSTRAGEM
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1 Objetivo e importância
Obter uma amostra de tamanho adequado que permita a realização dos diferentes testes e que tenha na mesma proporção os componentes do lote;
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Soja 
1 grama ----------------- 12 sementes
1Kg ----------------- 12.000 sementes
1 tonelada ----------------- 12 milhões
1 lote (20 ton) ----------- 240 milhões
Teste de Germinação
400 sementes
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2 Definições 
LOTE
É a quantidade definida, identificada e homogênea de sementes com atributos físicos e fisiológicos semelhantes.
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AMOSTRAS
Amostra simples
É cada pequena porção de sementes retirada por meio de amostrador, ou com a mão, de diferentes locais do lote, obedecendo a intensidade de amostragem.
Amostra composta
É formada pela combinação e mistura de todas as amostras simples retiradas do lote. Essa amostra é usualmente bem maior que a necessária para os vários testes, necessitando ser reduzida antes de ser enviada ao laboratório.
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Amostra média
É a amostra recebida pelo LAS para ser submetida à análise e deve ter, no mínimo, o peso especificado nas RAS para a espécie em questão (Tabela 1). É, geralmente, resultante da homogeneização e redução da amostra composta, podendo ser a própria quando o seu peso estiver de acordo com o exigido.
Amostra de trabalho
É a amostra obtida no LAS, por homogeneização e redução da amostra média, até o peso mínimo requerido, nunca inferior ao estabelecido nas RAS (Tabela 1).
Subamostra
É a porção de uma amostra obtida pela redução da amostra de trabalho, usando um dos métodos especificados nas RAS.
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3 Homogeneidade do lote de sementes
Um lote de sementes nunca é perfeitamente homogêneo:
Mesmo que as sementes provenham de uma única lavoura haverá desuniformidade.
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A homogeneidade de um lote de sementes é determinada, principalmente, pelos cuidados com que os produtores separam as sementes com características diferentes e na forma com que é manejado o equipamento de limpeza, classificação e secagem.
Se um lote é excessivamente heterogêneo e as diferenças entre as amostras de diversos sacos são visíveis ao amostrador, a amostra média obtida de acordo com as RAS não será representativa e a amostragem desse lote deve ser recusada. 
A transilagem, o rebeneficiamento e a redução do tamanho do lote são medidas empregadas para melhorar a homogeneidade do lote.
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4 Peso máximo dos lotes
O peso máximo de um lote de sementes não deve exceder ao indicado nas RAS (quadro 2), para as espécies especificadas, sujeitas a uma tolerância de 5%.
Lotes com quantidades maiores devem ser subdivididos e receber outra identificação antes de serem amostrados.
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Sementes de grandes culturas
Máximo 20.000 Kg para sementes iguais ou maiores que trigo e de 10.000 Kg para as menores.
Sementes de hortaliças, espécies florestais, frutíferas e ornamentais
Máximo 5.000 Kg para sementes igual ou maiores que quiabo e de 1.000 Kg para as menores.
Sementes de poáceas e de fabáceas forrageiras
Máximo 10.000 Kg para sementes iguais ou maiores que sorgo e de 5.000 Kg para as menores.
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5 Obtenção de amostras representativas
A amostragem para um certificado internacional deve ser executada por pessoas treinadas, reconhecidas individualmente pelo LAS. O amostrador deve possuir um certificado de proficiência na amostragem, reconhecido pelo chefe do laboratório.
Durante a amostragem, o proprietário do lote de sementes deve fornecer todos os dados para complementar a identificação do mesmo e dispô-lo de tal modo que cada recipiente ou local do lote possa ser amostrado. Se for evidente que o lote não é homogêneo, a amostragem não deve ser efetuada.
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No caso do proprietário solicitar amostras extras para guardar, as mesmas serão retiradas por ocasião da amostragem oficial, sendo lacradas e assinaladas com a palavra Duplicata. 
As amostras simples devem ser retiradas do lote por meio de amostradores, que são os instrumentos apropriados.
Quando a amostragem for realizada em sementes que deslizem com dificuldades nos amostradores, como acontece com algumas gramíneas e com sementes com muita quantidade de impurezas, a amostra poderá ser extraída com a mão.
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Quando o lote está em recipientes (incluindo sacos) esses, ao serem amostrados, devem ser selecionados ao acaso e amostras simples devem ser retiradas da parte superior, mediana e inferior dos recipientes, mas não necessariamente de mais de uma posição do mesmo recipiente.
 
Em lotes de sementes a serem embalados em recipientes pequenos (sacos de papel, polietileno, latas), é preferível que a amostragem seja realizada antes da embalagem das sementes.
Para sementes já acondicionadas, um número suficiente de recipientes deve ser aberto e amostrado e novamente fechado.
Em sementes armazenadas a granel, as amostras simples devem ser retiradas de diferentes pontos do lote e em profundidades diferentes.
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6 Tipos de amostradores e métodos para amostragem dos lotes
Amostrador do tipo duplo
Amostrador do tipo simples (Amostrador Nobbe)
Recipiente para amostragem durante o beneficiamento
Amostragem manual
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Amostrador tipo duplo
Consiste em dois cilindros ocos de metal que se ajustam perfeitamente um dentro do outro, com uma extremidade sólida e afilada, providos de aberturas ou janelas iguais que podem ser justapostas, por meio da rotação do cilindro interno. 
Possuem 6 a 9 aberturas;
O amostrador deve ser inserido diagonalmente na massa de sementes, num ângulo de 30 graus na posição fechada, isto é, com as aberturas dos cilindros desencontradas e, uma vez aberto, deve ser girado algumas vezes até que fique completamente cheio de sementes. 
Em seguida, deve ser fechado e retirado do saco, despejando-se as sementes em recipiente apropriado.
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Amostrador do tipo simples (Nobbe)
Este tipo de amostrador serve para coletar amostras de sementes acondicionadas em sacos e pode ser construído em diferentes dimensões, de acordo com as espécies de sementes.
Consiste em um cilindro afilado, suficientemente longo para alcançar o centro da embalagem, com uma abertura oval próxima à extremidade afilada e com um cabo perfurado, por onde as sementes são descarregadas.
O comprimento total do amostrador deve ter 50 cm, incluindo o cabo de 10cm e a ponta de cerca de 6 cm, ficando livre cerca de 34 cm do cilindro, o que é suficiente para alcançar a parte central do saco. Para os trevos e sementes semelhantes, o diâmetro interno do cilindro deverá ter 1,0 cm e, para os cereais, em geral, 1,5 cm.
Ao se utilizar esse tipo de amostrador, deve-se ter o cuidado de introduzi-lo diagonalmente no saco, com a abertura voltada para baixo.
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Recipiente para amostragem durante o beneficiamento
A amostragem também pode ser realizada durante o processo de beneficiamento de um lote, utilizando-se recipientes que podem ser movimentados manual ou mecanicamente através do fluxo de sementes. As amostras devem ser coletadas em intervalos regulares durante todo o processo.
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Amostragem manual
As espécies de sementes que não deslizam com facilidade, como as gramíneas palhentas, algodão com linter, amendoim com casca, lomentos de Stylozanthes e algumas sementes de espécies arbóreas, devem ser amostradas manualmente.
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7 Intensidade da amostragem
A granel ou no fluxo
lotes de até 500 quilos de sementes: pelo menos 5 amostras simples;
lotes de 501 a 3.000 quilos de sementes: uma amostra simples de cada 300 quilos, porém não menos de 5 amostras;
lotes de 3001 a 20.000 quilos de sementes: uma amostra simples de cada 500 quilos, porém não menos de 10 amostras;
lotes acima de 20.001 quilos de sementes: uma amostra simples para cada 700 kg, mas não menos do que 40 amostras.
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Em sacos, tambores ou outros recipientes
lotes de até 5 recipientes: amostre cada recipiente e retire sempre 5 amostras pelo menos;
lotes de 6 a 30 recipientes: amostre 5 recipientes ou, pelo menos, um de cada 3 recipientes, aquele número que for maior;
lotes de 31 a 400 recipientes: amostre 10 recipientes ou, pelo menos, um de cada 5 recipientes, aquele número que for maior;
lotes de 401 ou mais recipientes: amostre 80 recipientes ou, pelo menos, um de cada 7 recipientes, aquele número que for maior.
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Em pequenos recipientes
Recomenda-se que o peso máximo de 100 quilos seja tomado como unidade básica e os recipientes pequenos sejam combinados de maneira a formar essas unidades de amostragem da seguinte forma:
20 recipientes de 5 quilos;
33 recipientes de 3 quilos;
100 recipientes de 1 quilo.
A amostragem realizada nas unidades básicas deve ser feita tomando-se recipientes inteiros e fechados.
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8 Pesos mínimos das amostras médias
Os pesos mínimos das amostras médias estão especificados no Quadro 2 das RAS.
Quando não for fornecido o peso na tabela e a determinação do número de outras espécies for requisitada, as amostras médias devem conter um mínimo de 25.000 sementes.
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Importante 
No caso da amostra ser menor do que a prescrita, o amostrador deve ser notificado e a análise suspensa até que semente suficiente seja recebida em uma nova amostra média. 
Exceção para o caso de semente muito cara, cuja análise pode ser completada tanto quanto possível e a seguinte declaração inserida no certificado: A amostra média pesou apenas ..... gramas e não está de acordo com as RAS .
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9 Embalagem, identificação, selagem e remessa da amostra
O tipo de embalagem para a remessa das amostras médias ao LAS deve ser de material resistente, para que não se rompa durante o transporte e deve proteger as sementes contra o calor, umidade ou contaminação por doenças e pragas. 
Cada amostra deve ser identificada de maneira que se possa estabelecer sua conexão com o respectivo lote. 
Amostras destinadas ao teste de germinação devem estar acondicionadas em embalagens permeáveis. 
No caso de ser solicitada a determinação do grau de umidade, as amostras devem ser remetidas separadamente, em embalagens impermeáveis e hermeticamente fechadas.
O órgão responsável pela coleta das amostras deve enviá-las sem demora ao LAS e, no caso de amostras oficiais, essas não devem ser deixadas aos cuidados de pessoa não autorizada. 
Se as sementes forem tratadas quimicamente (fungicidas ou inseticidas), devem ser fornecidos, junto com a amostra, o nome do produto, do ingrediente ativo e a dosagem utilizada.
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10 Obtenção das amostras de trabalho
A amostra média, ao chegar ao LAS, deve ser protocolada e homogeneizada, pois durante o transporte poderá sofrer uma estratificação. Deve ser reduzida a uma ou mais amostras de trabalho (de acordo com os testes a serem realizados), de peso igual ou ligeiramente maior que os estipulados nas RAS.
Quando for requerida uma duplicata da amostra, essa deve ser retirada independentemente, isto é, depois de retiradas as amostras de trabalho.
As sementes restantes da amostra média constituirão a amostra de arquivo e devem ser armazenadas prontamente em locais apropriados, à prova de umidade e calor.
Na redução da amostra média, são utilizados métodos mecânicos e manuais.
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Método mecânico
Divisor cônico (boerner)
Divisor centrífugo (gamet)
Divisor de solo
Método manual
Método modificado da separação ao meio
Método da colher
Método manual da separação ao meio
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Método mecânico
Adequado para todas as sementes que deslizam com facilidade. Independente do aparelho utilizado, o cuidado com sua limpeza interna é de fundamental importância antes de cada operação.
O uso de divisores mecânicos elimina o efeito da ação do analista no resultado da homogeneização e redução.
A amostra média deverá ser passada no mínimo duas vezes pelo divisor para ser homogeneizada e recomposta antes da divisão propriamente dita, que é realizada por meio de repetidas passagens das sementes pelo divisor removendo-se, a cada vez, metade da porção. 
O processo de divisões sucessivas é repetido até que se obtenha a amostra de trabalho de peso aproximado, mas nunca inferior ao exigido para a espécie.
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Divisor cônico (Boerner)
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Divisor centrífugo (Gamet)
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Divisor de solo
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Método manual
Na impossibilidade do uso de métodos mecânicos, a redução da amostra média deve ser feita manualmente, respeitando o princípio das divisões sucessivas em que são baseados os divisores.
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Método modificado da separação ao meio 
Consiste em um tabuleiro quadrado ou retangular, dividido em um número par de compartimentos quadrados e iguais, que são, alternadamente, providos de fundo. 
Depois de manualmente homogeneizada, a amostra média é uniformemente esparramada sobre o tabuleiro e esse, ao ser levantado, retém aproximadamente metade da amostra, deixando a outra metade sobre a mesa. 
Desse modo, a amostra é repetidamente dividida até a obtenção do peso desejado.
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Método da colher
Utilizado somente para sementes pequenas. 
As sementes são colocadas em uma bandeja e misturadas. 
Com o auxílio de uma colher (com uma beirada reta) e de uma espátula, remova pequenas porções de sementes de, pelo menos, cinco lugares da bandeja até obter o peso aproximado da amostra de trabalho, nunca menor do que o tamanho requerido.
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Método manual da separação ao meio
É restrito àssementes palhentas, com ganchos, espinhos ou alas (exemplos: Andropogon, Arrhenatherum, Astrebla, Brachiaria, Oryza, etc.) e para alguns gêneros de árvores e arbustos.
Após a homogeneização da amostra média, essa é colocada sobre uma mesa limpa, formando um amontoado, o qual é dividido ao meio. 
Cada metade é novamente dividida, resultando quatro porções, as quais são novamente divididas e separadas em duas fileiras de quatro. 
Conservam-se na mesa 2 porções de cada fileira, que são combinadas alternadamente, sendo as demais removidas. 
Esse procedimento é repetido tantas vezes quantas forem necessárias.
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11 Armazenamento das amostras
Antes e após a análise, todo o esforço deve ser feito para que a amostra recebida seja conservada de modo a se manter inalterada, sendo também importante iniciar a análise no dia da chegada da amostra no LAS. 
Se houver necessidade de armazenamento da amostra antes da análise, esse deve ser feito em local adequado, de modo que não ocorram alterações na qualidade das sementes, como no grau de umidade, dormência e germinação.
Após a retirada das amostras de trabalho, necessárias para os testes, as sementes remanescentes da amostra média irão constituir a amostra de arquivo. 
Sobras da análise de pureza ou de qualquer outro teste devem ser eliminadas, não podendo fazer parte da amostra de arquivo. 
As amostras analisadas, especialmente as destinadas à análise oficial, devem ter suas amostras de arquivo correspondentes e serem guardadas por um ano da data da emissão do Boletim.
As amostras devem ser armazenadas em locais arejados, preferencialmente com controle de
temperatura e umidade relativa. 
O LAS não pode, entretanto, ser responsabilizado pelo declínio da porcentagem de germinação durante o armazenamento das amostras de arquivo.
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