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Departamento de Microbiologia e Parasitologia (MIP) Instituto Biomédico Disciplina: Microbiologia II Monitor: Hugo Mendonça Gabarito ED – P1 1 – Defina bactéria Bactérias são seres unicelulares, procariotos, que se proliferam por fissão binária – uma célula se divide em duas idênticas a original. Possuem todo maquinário bioquímico para seu crescimento, reprodução e produção de energia 2 – Cite as principais diferenças entre a célula procariótica e célula eucariótica Procariotos – ausência de membrana nuclear: o material nuclear está disperso no citoplasma. Não possuem organelas, somente ribossomos (subunidade 70S). Divisão celular por fissão binária. Eucariotos – Núcleo possui membrana nuclear e está isolado do citoplasma. Possui diversas organelas, ribossomos 80S e divisão celular através de mitose. 3 - Cite duas funções da parede celular e esquematize as paredes celulares de bactérias Gram positivas e Gram negativas indicando seus principais componentes Funções: Rigidez e forma da célula, proteção contra agentes antimicrobianos e sistema imune 4 - Descreva o método de coloração de Gram Os reagentes utilizados no método são o cristal violeta, lugol, álcool e fucsina. As bactérias que adquirem a coloração azul violeta são chamadas de Gram positivas e aquelas que adquirem a coloração vermelho são chamadas de Gram negativas. Primeiro adiciona-se o cristal violeta por 1 minuto e, após isso, o lugol durante 1 minuto. O lugol, reagente a base de iodo, consegue fixar o cristal violeta na parede celular criando um complexo (CVI). Após isso, utiliza-se o gotejamento por 15 segundos de álcool. Em bactérias Gram negativas o álcool ira extrair a camada lipídica aumentando a permeabilidade e conferindo coloração transparente devido a saída do complexo CVI. Em seguida, adiciona-se a fucsina que confere coloração avermelhada para essas bactérias. Em bactérias Gram positivas o complexo CVI não é retirado devido a redução da permeabilidade e a coloração azul-violeta é mantida mesmo com a adição da fucsina. 5 - Explique as principais funções Cápsula bacteriana – Ação antifagocitária. Além de reserva de nutrientes e água e relacionada com aderência Messossomas – Papel importante na divisão e respiração celular. Abriga enzimas utilizadas nesses processos. Camada limosa – Promove aderência através da formação do biofilme Flagelos – Conferem mobilidade a bactéria, constituídos por proteína flagelina Pili – . Também chamados de fímbrias. Relacionadas com aderência da bactéria. Presentes em bactérias Gram-negativas. Participação do processo de transferência genética denominado conjugação através da formação do pili sexual. São constituídos de proteína pilina. 6 - Indique a temperatura ótima de crescimento de microrganismos Psicrófilos – 5ºC – 20ºC Mesófilos – 28ºC – 45ºC Termófilos – 46 ºC – 70 ºC Termófilos extremos – 71ºC - 110 ºC 7 – Descreva as fases da curva de crescimento de uma população bacteriana Fase lag - Não há divisão celular; adaptação das células ao novo ambiente; - Aumento do volume total em 2 a 4 vezes; - Síntese de DNA, proteínas e enzimas. Fase log ou exponencial - Reprodução celular ativa; tempo de geração constante; - Período de maior atividade metabólica da célula; - Células ficam particularmente vulneráveis a mudanças ambientais nesta fase Fase estacionária - Número de células morrendo é equivalente ao número de células novas; - Velocidade de crescimento diminui; - Diminuição de nutrientes e O2 (aeróbios) e acúmulo de produtos tóxicos Fase de morte ou declínio - Condições impróprias para o crescimento, sendo que células mortas excedem o número de novas 8 – Explique o que são plasmídeos Plasmídeos possuem a capacidade de se replicarem independente do cromossoma. São pequenas moléculas de DNA de fita dupla circular. São capazes de conferir vantagens as bactérias. São elementos genéticos moveis e podem ser compartilhado entre bactérias através do processo de conjugação. 9 – Explique o que são transposons Segmentos de DNA que podem saltar ou autotransferir-se de uma molécula de DNA para outra. Não são autorreplicáveis. Conferem resistência e virulência a bactéria. 10 - Cite e descreva os 3 principais mecanismos de transferência genética - Transformação: a célula doadora morre por lise e libera seu DNA no meio, onde é capturado pela célula receptora - Conjugação: . Em bactérias Gram negativas: a bactéria doadora irá produzir feromônios para as demais bactérias e irá produzir o pili sexual promovendo comunicação e transferência de plasmídeos de bactérias doadoras para bactérias receptoras Em bactérias Gram positivas: Bactérias receptoras produzem feromônios ativando as células doadoras ocorrendo formação de substância de agregação onde ocorrerá a troca de plasmideos - Transdução: envolve a transferência de DNA de uma célula para outra por meio de um vírus bacteriófago. Dividida em transdução generalizada e especializada Generalizada: Ocorre degradação do DNA bacteriano e fagos incorporam sequências aleatórias do DNA. A célula sofre lise e as partículas são liberadas, carregando DNA viral e bacteriano. Ocorre recombinação do DNA exógeno com o DNA da célula receptora Especializada: o fago se integra ao DNA bacteriano, incorporando genes bacterianos específicos próximos ao sítio de integração viral 11 – Diferencie microbiota residente e transitória Residente: formada por microrganismos encontrados regularmente em determinada idade e área da superfície, e, quando alterada, recompõe-se com facilidade Transitória: formada por microrganismos não patogênicos ou potencialmente patogênicos que permanecem na pele ou mucosa por horas, dias ou semanas. São provenientes do meio externo, não provocam doença e não se estabelecem em definitivo na superfície. 12 – Cite funções da microbiota normal Influenciam na formação de anticorpos, ajudam na absorção de nutrientes, síntese de substâncias, influencia na anatomia e fisiologia. 13 – Indique os principais microrganismos encontrados na microbiota Pele - Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aerugionsa Orofaringe - Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Estreptococcos Nariz e nasofaringe - Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae Vagina - Lactobacillus acidophilus (bacilos de Doderlein) Intestino grosso – Escherichia coli, Enterococcus faecalis 14 – Explique o que são microrganismos Aeróbicos estritos/obrigatórios – Utilizam O2 para seu crescimento Anaeróbicos estritos/obrigatórios - Não crescem em meios com presença de O2 Anaeróbicos facultativos – Utilizam O2 quando disponível, mas também crescem em sua ausência Microaerofilos – Necessitam de baixos teores de O2 15 – Diferencie esterilização, desinfecção, assepsia e antissepsia Esterilização: Processo absoluto que envolve a remoção ou inativação completa de todas as formas de vida de um determinado objeto ou material Desinfecção: Tem o objetivo de reduzir ou inibir o crescimento e não necessariamente esterilizam. Não eliminam esporos. Assepsia: Desinfecção de matérias utilizados na prática Antissepsia: Desinfecção relacionada a pele, mucosas e tecidos vivos 16 – Cite os principais agentes físicos utilizados no controle de microrganismos Calor úmido: autoclave, fervura, pasteurização Calor seco: flambagem, incineração Radiação: ionizante – gama, não ionizante 17 – Cite 2 agentes químicos esterilizantes Glutaldeido e formaldeido 18 – A esporulação é uma forma de sobrevivência da bactéria e utilizada por bactérias do gênero Clostridium. Explique como ocorre esse processo. É uma forma de sobrevivência da bactéria e tem inicio quando os nutrientes se tornam escassos. A bactéria irá diminuir seu metabolismo quase a zero, a célula vegetativa morre e libera o endósporo e que, após longos períodos em estado latente, irá germinar dando origem a uma nova célula vegetativa. O endósporo é extremamente resistente ao calor, dessecação e agentes químicose físicos. 19 – Cite as etapas do crescimento bacteriano - Alongamento celular e replicação do DNA. A replicação do DNA é o principal indício de reprodução bacteriana. - Início da formação do septo (divisão da Parede celular e da membrana citoplasmática); - Individualização das células-filhas com formação de paredes ao redor das regiões contendo DNA replicado; - Separação das células-filhas. 20 – Cite os componentes principais do peptideoglicano N-acetilglicosamina e N-acetilmurâmico 21 – Cite os principais tipos de arranjos de flagelos Monotríquio, em que a bactéria possui flagelo polar único Anfitríquio, em que a bactéria possui flagelo em ambos os pólos Lofotríquio, em que a bactéria possui tufos de flagelos polares Peritríquio, em que a bactéria possui flagelos ao redor de todo o corpo bacteriano
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