aula de prática sanguínea

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AUAL PRATICA PARASITOLOGICO DE SANGUE 
02/04/2018 
 
São feitos em lâminas de vidro comum para microscopia. Utiliza se 
sangue periférico, da orelha ou ponta da cauda; ou com sangue 
coletado em vasos de grande calibre, pode-se proceder a 
sedimentação em tubo de microhematócrito sendo o esfregaço 
confeccionado com o sangue que contém a papa de leucócitos. 
1.CONFECÇÃO DO ESFREGAÇO GOTA DELGADA 
1.1. ESFREGAÇO 
Coleta-se um a gota de sangue no canto da extremidade de uma 
lâmina, apóia-se à extremidade que contém a gota, 
aproximadamente, no primeiro décimo da superfície de uma segunda 
lâmina, com uma inclinação de cerca de 45º (variar a inclinação com 
a densidade e a quantidade de sangue, angulo maior esfregaço mais 
espesso) aguardar que o sangue, por capilaridade espalhe-se. 
Distenda o sangue sobre a Segunda lâmina empurrado com 
movimento uniforme, mantendo as lâminas em contato de modo que 
forme uma área franjada na parte final do esfregaço. Secar 
imediatamente agitando-se a lâmina ao ar. Identifique escrevendo no 
próprio esfregaço, com lápis comum ou na lâmina com lápis de 
diamante. 
 1.2. FIXAÇÃO 
Cubra o esfregaço ou introduza a lâmina em recipiente com 
álcool etílico absoluto P.A. ou álcool metílico absoluto P.A., por 3 a 5 
minutos. Secar ao ar em repouso ou agitado. 
 1.3.COLORAÇÃO 
 Usando solução de GIEMSA, diluir na proporção de 2 gotas 
da solução de GIEMSA para cada ml de solução tampão (ou água 
destilada), Cubra o esfregaço ou introduza a lâmina em recipiente 
com a solução de GIEMSA diluída, deixar cora por 30 minutos. Lavar 
a lâmina em água corrente para retirar o excesso de corante. Secar 
ao ar em repouso ou agitando. 
 Maiores detalhes no item COLORAÇÃO DE GIEMSA 
(ROMANOVSK) 
 1.4. EXAME 
 Usar a objetiva de 100x, com óleo de imersão. No esfregaço 
de camada delgada, examinar em ‘ZIG-ZAG’ passando pela franja. 
 
2. CONFECÇÃO DO ESFREGAÇO GOTA ESPESSA 
2.1. ESFREGAÇO 
Coloca-se um ou mais gotas de sangue na superfície de uma 
lâmina, em posição central ou deslocado desta se deseja colocar mais 
de um esfregaço por lâmina, com auxilio de uma agulha ou do 
próprio tubo de microhematócrito, espalhe, um pouco, a gota. Secar 
ao ar. Identifique escrevendo no próprio esfregaço, com lápis comum 
ou na lâmina com lápis de diamante ou com lápis na área 
esmerilhada. 
Causar a hemólise das hemácias introduzir e retirar, uma única 
vez (rápido) a lâmina com o esfregaço em água. Secar ao ar em 
repouso. 
 2.2. FIXAÇÃO, COLORAÇÃO e EXAME 
Proceder de forma similar ao usado para gota delgada 
 
COLORAÇÃO DE GIEMSA (ROMANOVSK) 
INDICAÇÃO 
Diagnóstico de hemoparasitos. 
PROCEDIMENTO 
1. Fazer um esfregaço delgado ou espesso, secá-lo ao ar; 
2. Fixar por 3 a 5 minutos em álcool metílico P.A.; 
3. Cobrir a lâmina com solução de giemsa diluída (ver diluição a 
seguir); 
4. Deixar corar por der tempo conforme diluição (ver a seguir). 
DILUIÇÃO DA SOLUÇÃO DE GIEMSA 
Diluir o Giemsa comercial no momento de usá-lo, com água destilada 
neutra tamponada (Ph 7-7.2) 
Concentração de solução de corante 
a) para coloração lenta (12 a 24 horas) 
Uma gota de giemsa comercial por ml de solução tampão 
b) para coloração rápida (30 minutos) 
Duas gotas de Giemsa comercial por ml de solução tampão 
c) para coloração ultra rápida (15 minutos) 
três gotas de Giemsa comercial por ml de solução 
* cada gota corresponde a 0,03 ml, logo, para preparar 10ml de 
diluição ‘a’ usa-se 0,3ml de Giemsa; ‘b’ usa-se 0,6ml de Giemsa; ‘c’ 
usa-se 0,9ml de giemsa. 
Após o tempo necessário para a coloração lavar a lâmina/esfregaço 
em água corrente para retirar o corante precipitado. 
Secar ao ar. 
Examinar em microscópio com objetiva de 100x usando óleo de 
imersão.