TESTES DE IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS

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TESTES DE IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS
ANOTAÇÕES EM SALA DE AULA
LIVRO: PRÁTICAS DE MICROBIOLOGIA, VERMELHO
PRÁTICA 2: TÉCNICA DE INOCULAÇÃO DE BACTÉRIAS EM MEIOS DE CULTURA
 
TÉCNICAS DE INOCULAÇÃO:
SEMPRE FLAMBAR QUALQUER COISA NÃO INFLAMÁVEL, COMO BOCA DE TUBOS
SEMPRE FAZER TUDO BEM PERTO DA LAMPARINA ACESA
ABRIR TANTO TUBO QUANTO PLACA DE PETRI COM UMA MÃO SÓ
- PRECISA DE:
- LAMPARINA
- PLACA DE PETRI
- SWABS
- SOLUÇÃO SALINA
- COMO:
- COM O SWAB, MOLHAR NA SOLUÇÃO SALINA E FRICCIONAR EM ALGUMA SUPERFÍCIE
- PASSAR NA PLACA DE PETRI
PRÁTICA 3: COLORAÇÃO GRAM
- GRAM + ROXO
- GRAM - ROSA
- POR QUE FUNCIONA?
- GRAM + TEM PAREDE CELULAR MAIS ESPESSA E A VIOLETA GENCIANA SE GRUDA NELA JUNTO DO IODO, VAI SER DIFÍCIL DE REMOVER
- GRAM - TEM PAREDE MAIS FINA E SUA MEMBRANA EXTERNA LIPÍDICA É SOLUBILIZADA PELO ÁLCOOL - FICA MAIS FÁCIL DA FUCSINA CORAR APÓS A VIOLETA SER DESCORADA PELO ÁLCOOL.
- COMO:
- COM A PIPETA DE PASTEUR VAI PEGAR UMA GOTA DA SOLUÇÃO SALINA E COLOCAR NA LÂMINA
- COM ALGUMA ALÇA VAI PEGAR AS BACTÉRIAS E ELUIR NA LÂMINA (ESFREGAÇO BACTERIANO)
- DEPOIS VAI PINGAR UMA GOTA DE VIOLETA E DEIXAR POR 30 SEGUNDOS
- VERTE PARA RETIRAR EXCESSO
- LUGOL/IODO O SUFICIENTE PARA CORAR E DEIXAR POR 30 SEGUNDOS
- VERTER NOVAMENTE
- ÁLCOOL POR 10 SEGUNDOS
- VERTER
- FUCUSINA POR 10 SEGUNOS
- VERTE E LAVA COM ÁGUA DESTILADA DA PISSETA
- DEIXA SECAR NUMA SUPERFÍCIE INCLINADA
- COLOCA-SE A LAMÍNULA 
PRÁTICA 4: SEMEADURAS
 
- TÉCNICAS DE SEMEADURA EM MEIOS LÍQUIDOS (REPIQUE):
VAI PEGAR A CULTURA DE ALGUM RECIPIENTE COM AGULHA E INOCULAR DENTRO DE UM TUBO
 
- SEMEADURA EM MEIO SÓLIDO INCLINADO:
FAZER ESTRIAS NA SUPERFÍCIE DO TUBO AO INOCULAR, USANDO A ALÇA DE PLATINA.
 
- SEMEADURA EM MEIO SEMI-SÓLIDO POR PICADURA:
COM A AGULHA DE PLATINA VAI INOCULAR A BACTÉRIA COM APENAS UMA PICADA BEM NO MEIO
 
PRÁTICA 5: SENSIBILIDADE
- SEMEADURA POR ESGOTAMENTO:
- COM A ALÇA DE PLATINA VAI COLOCAR A CULTURA EM PEQUENA QUANTIDADE E FAZER ESTRIAS EM 4 QUADRATANTES NA PLACA DE PETRI
- NO FINAL FAZ ZIGUE ZAGUE PARA SE TER COLONIAS ISOLADAS
 
- DISTENÇÃO:
- COM MICRO PIPETA SE PEGA A CULTURA DE BACTÉRIAS E COLOCA NA PLACA DE PETRI
- COM A ALÇA DE DRIGASLKY (TEM UM TRIÂNGULO NA PONTA) PASSA ESSA BACTÉRIA POR TODA A PLACA COM SUAVIDADE
 
- ANTIBIOGRAMA:
- PEGOU A PLACA COM DISTENÇÃO E SE COLOCOU ANTIBIÓTICOS DENTRO SEPARADOS DE FORMA UNIFORME. 
- VAI OU NÃO FORMAR HALOS DE INIBIÇÃO
PRÁTICA 6: IDENTIFICAÇÃO DE ESTAFILOCOCOS
- CATALASE
- IDENTIFICA GRAM +: MICROCOCOS OU ESTAFILOCOCOS
- DETECTA ENZIMA CITOCROMO OXIDASE QUE DECOMPÕE O PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO - O QUE FAZ LIBERAR H20 E O2
- SE OCORRER EFERVESCÊNCIA - CATALASE +
- COM RESULTADO + SEGUE PARA O TESTE DE COAGULASE
- COMO FAZ:
- PEGA UMA GOTA DE UM EPPENDORF E COLOCA NA LÂMINA
- COLOCA PERÓXIDO DE HIDROGÊNIO
- EFERVESCÊNCIA = CATALASE +
- COAGULASE
- TMB IDENTIFICA GRAM + COMO ESTAFILOCOCOS 
- COAGULASE LIVRE REAGE AO FATOR PLASMÁTICO
- FORMA COMPLEXO QUE ATUA NO FIBRINOGÊNIO, O QUE FAZ COM QUE FIBRINA SEJA FORMADA = COÁGULO
- SE FORMAR COÁGULO, É COAGULASE + PARA ESTAFILOCOCOS AUREUS
- COMO FAZ:
- 3 GOTAS DO EPPENDORF COM A CULTURA EM OUTRO EPPENDORF
- SE FORMAR COÁGULO APÓS INCUBAÇÃO NA ESTUFA = COAGULASE +
PRÁTICA 7: IDENTIFICAÇÃO DE ENTEROBACTÉRIAS
- FERMENTAÇÃO DA LACTOSE:
- COM ALÇA DE PLATINA RETIRA DE UM TUBO A CULTURA DE BACTÉRIA
- INOCULA EM OUTRO TUBO (VERMELHO)
- SE OCORRER MUDANÇA DE VERMELHO/ROSA PARA AMARELO = LACTOSE +
- CITRATO DE SIMONS
- PEGA A CULTURA DE BACTÉRIA E COLOCA NUM TUBO VERDE
- SE FICAR AZUL, É PQ A BACTÉRIA CONSUMIU O CITRATO = CITRATO +
- MOTILIDADE (ÁGAR MUELLER HINTON)
- MERGULHA A AGULA NO FALCON
- INSERE ESSA AGULHA NO TUBO AMARELO O MAIS RETO POSSÍVEL
- SE HOUVER CRESCIMENTO PARA ALÉM DO PONTO DE PICADURA = MOTILIDADE +