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UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ CENTRO DE CIÊNCIAS DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOLOGIA MOLECULAR DISCIPLINA: BIOQUÍMICA GERAL Estudo Dirigido IV Nucleotídeos e ácidos nucleicos 1- Qual a diferença entre nucleotídeos e nucleosídeos? . 2- Compostos que contém uma base nitrogenada, um açúcar e um grupo fosfato são chamados (a) ______________. Duas purinas encontradas no DNA são (b) _____________ e _______________. Uma pirimidina encontrada em todo DNA mas em somente alguns RNAs é (c) _____________. No DNA, o par de base (d) ______________-_____________ está unido por três pontes de hidrogênio; o par de base (e) ______________-_____________ têm somente duas pontes de hidrogênio. 3- Descreva brevemente o que significa dizer que as duas fitas do DNA são complementares. 4- Por que a diminuição da força iónica de uma solução de DNA de cadeia dupla permite o DNA desnaturar mais rapidamente (por exemplo, para desnaturar a uma temperatura mais baixa do que com uma maior força iônica)? 5- DNA de rato hibridiza mais extensivamente com o DNA humano do que o DNA de levedura. Explique pela descrição do fator ou dos fatores que determinam a extensão da hibridização. 6- Explique como nucleosídeos trifosfatos (como o ATP) atuam como carreadores de energia química. Genes e cromossomos 1- O que são íntrons? 2- Descreva a estrutura e a função de um típico plasmídeo bacteriano. 3- Descreva a hipótese atual para explicar a presença de DNA funcional na mitocôndria e no cloroplasto. 4- Descreva a estrutura e a função de um nucleossomo. 5- O que são histonas e qual a principal função delas na estrutura da cromatina? Replicação do DNA 1- A sequência de DNA mostrada abaixo é replicada da esquerda para a direita. Rotule os modelos para fita principal e para fita atrasada da síntese. 5’ – ACTTCGGATCGTTAAGGCCGCTTTCTGT - 3’ 3’ - TGAAGCCTAGCAATTCCGGCGAAAGACA – 5’ 2- Sabemos que a DNA polimerase catalisa a síntese apenas na direção 5’ – 3’. Contudo, durante a replicação semiconservativa do DNA nas células, elas conseguem catalisar a síntese de ambas as fitas, o que aparente requerer uma síntese na direção 3’- 5’. Explique o processo que ocorre na célula que permite a síntese de ambas às fitas irmãs pela DNA polimerase. 3- Faça um diagrama da reação catalisada pela DNA polimerase que ocorre entre uma deoxiribose no final da cadeia de DNA e a extremidade 5’ fosfato de um deoxirribonucleotídeo trifosfato. Incluindo a estrutura química do grupo fosfato, indique a localização dos açúcares e da base, e mostre o rearranjo de elétrons que ocorre. 4- Sabemos que a DNA polimerase pode apenas alongar uma cadeia de DNA pré-existente (requer um primer), não podendo iniciar uma nova cadeia. Contudo, durante a replicação semiconservativa do DNA na célula, uma cadeia filha de DNA completamente nova é sintetizada. Explique o processo que ocorre na célula que permite a síntese de cadeias irmãs pela DNA polimerase. 5- A síntese de DNA na fita atrasada em E.coli é um processo complexo que envolve diversas proteínas. A iniciação de uma nova cadeia é a catalisada pela enzima (a) ____________ a elongação é catalisada pela enzima (b) _________________. A síntese descontínua, cede pequenos fragmentos que são chamados de (c) ________________, que são eventualmente unidos pela enzima (d) _______________, que requer como cofator (e) _________________ 6- O que é um fragmento de Okasaki? Qual enzima(s) é (são) requerida(s) para sua formação em E.coli ? 7- A replicação do DNA em E. coli começa em um sítio no DNA chamado de (a) ________________. Na forquilha de replicação a fita (b) ______________ é sintetizada de forma contínua, enquanto que a fita (c) _______________ é sintetizada de forma descontínua, os pequenos pedaços são chamado de fragmentos de (d) _____________. Um RNA iniciador para cada fragmento é sintetizado pela enzima chamada de (e) _______________, e esse RNA iniciador é removido depois que o fragmento é sintetizado pela enzima (f) ______________, usando a (g) ________________ . os corte deixados para trás nesse processo são selados pela enzima (h) _______________. 8- Descreva brevemente o mecanismo bioquímico das seguintes enzimas atuantes na replicação em E. coli: (a) DNA helicase (b) Primase (c) A atividade exonucleasica 3’ – 5’ da DNA polimerase III (d) DNA ligase (e) Topoisomerase (f) A atividade exonucleasica 5’- 3’ da DNA polimerase I Metabolismo de RNA 1. Cite uma propriedade básica que distingue a RNA polimerase da DNA polimerase e citeuma propriedade comum a elas. 2. Escreva a seqüência da molécula de RNA mensageiro sintetizada a partir de uma fita molde de DNA que apresenta a seguinte seqüência: (5’)ATCGTACCGTTA(3’) 3. Descreva a sequência de eventos na via de iniciação do processo de transcrição pela RNA polimerase da E.coli. 4. As sequências específicas que a RNA polimerase de E. coli costuma se unir no seu DNA, antes de iniciar o processo de transcrição, geralmente contêm mais pares de base A=T do que pares de base CΞG. Explique brevemente qual a possível causa disso. 5. Compare as duas diferentes classes (ρ-dependente e ρ-independente) do processo de terminação da transcrição em procariontes. 6. Descreva as diferenças dos mecanismos de splicing entre os íntrons do grupo I e os íntrons do grupo II. 7. Descreva as importantes características das estruturas presentes nas extremidades 5’ e 3’ dos mRNAs maduros em eucariotos. Síntese de proteínas 1. (30) A fita molde de um segmento dupla-hélice de DNA contém a seguinte seqüência: (5’)CTT TGA TAA GGA TAG CCC TTC a) Qual é a sequência de bases do mRNA que pode ser transcrito a partir dessa fita? b) Qual sequência de aminoácidos poderia ser codificada a partir da sequência de bases do mRNA em (a), usando somente a primeira leitura, começando pela extremidade 5’? c) Suponha que a outra fita (complementar) é usada como molde para transcrição. Qual é a sequência de aminoácidos do peptídeo resultante, novamente começando pela extremidade 5’ e usando apenas a primeira leitura? 2. Na síntese protéica, 61 códons especificam os 20 aminoácidos. Pareamento de bases entre os códons do mRNA e os anticódons do tRNA assegura que o aminoácido correto será inserido na cadeia polipepetídica. Por que então a célula requer somente 32 diferentes tRNAs para reconhecer 61 diferentes códons? 3. Indique se as seguintes sentenças são verdadeiras (V) ou falsas (F). ( ) Ribossomo é o complexo onde a síntese protéica ocorre. ( ) Ribossomos contém muitas proteínas separadas. ( ) Os três RNAs ribossômicos em um ribossomo bacteriano são distribuídos em três grandes subunidades ribossomais. ( ) Existem quatro sítios de ligação para aminoacil-tRNAs em um ribossomo. 4. Uma dada sequência de mRNA pode ser traduzida em um dos três diferentes quadros de leitura. Descreva como procariontes determinam o quadro de leitura correto. 5. Descreva as três etapas do processo de tradução de proteínas em procariotos.
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