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Embriologia Veterinária - Fecundação, Clivagem, Compactação, Mórula e Blástula

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Prévia do material em texto

Fecundação, clivagem, 
compactação. Mórula. Blástula.
Profa. Dra. Cristina de Fátima Lucio
FECUNDAÇÃO
Fusão do material genético de DOIS gametas –
espermatozoide e oócito
- combinação de GENES derivados dos pais
- formação de novos indivíduos
FECUNDAÇÃO
5 ETAPAS:
1- contato e reconhecimento do SPTZ e oócito
- espécie-específico
- ligação do SPTZ à zona pelúcida do oócito
FECUNDAÇÃO – etapa 1
1- contato e reconhecimento do SPTZ e oócito
- espécie-específico
- ligação do SPTZ à zona pelúcida do oócito
Moléculas presentes na ZP de uma determinada espécie SOMENTE são 
reconhecidas por SPTZ da mesma espécie
FECUNDAÇÃO – etapa 1
1- contato e reconhecimento do SPTZ e oócito
ADESÃO: aproximação aleatória e associação 
não-específica entre os gametas
FECUNDAÇÃO – etapa 1
1- contato e reconhecimento do SPTZ e oócito
ZONA PELÚCIDA:
- glicoproteínas: ZP1, ZP2 e ZP3
- ZP3: ligação primária ao SPTZ e induz 
reação acrossomal
PROTEÍNAS LIGANTES AO OVO
- no SPTZ
FECUNDAÇÃO
5 ETAPAS:
2- reação acrossomal do SPTZ e penetração na 
zona pelúcida
- ocorre APÓS a ligação da etapa 1
FECUNDAÇÃO – etapa 2
reação acrossomal do SPTZ e penetração na ZP
- SPTZ: exocitose celular chamada de 
REAÇÃO ACROSSOMAL
ACROSSOMO:
- organela derivada do Complexo de Golgi
- contém enzimas lisossomais
FECUNDAÇÃO – etapa 2
reação acrossomal do SPTZ e penetração na ZP
- aumento da capacidade fusigênica da 
membrana plasmática: pH (0,3) e Ca2+
- LIBERAÇÃO das enzimas do acrossomo
SOMENTE após a reação acrossomal, o SPTZ consegue penetrar a 
ZONA PELÚCIDA
FECUNDAÇÃO – etapa 2
reação acrossomal do SPTZ e penetração na ZP
- APÓS a reação acrossomal, o SPTZ 
permanece ligado à ZP, aderido à proteína ZP2
PENETRAÇÃO DA ZP:
- motilidade espermática + hidrólise 
enzimática do conteúdo acrossomal
- acrosina e hialuronidase
FECUNDAÇÃO
5 ETAPAS:
3- ligação e fusão com a membrana vitelínica
FECUNDAÇÃO – etapa 3
Ligação e fusão com membrana vitelínica (oolema)
- proteínas transmembrana da 
família ADAM
- proteína FERTILINA
FECUNDAÇÃO – etapa 3
Ligação e fusão com membrana vitelínica (oolema)
- proteínas transmembrana da família ADAM
- proteína FERTILINA
FECUNDAÇÃO – etapa 3
Ligação e fusão com membrana vitelínica (oolema)
BLOQUEIO À POLISPERMIA
-APÓS a penetração do SPTZ, a OOLEMA perde a 
habilidade de se fundir com outros SPTZs
- despolarização elétrica da membrana do oócito de 
70 mV negativos para 20 mV positivos
- influxo de Ca2+ (1 mM)
- bloqueio do receptor para SPTZ na oolema
- grânulos corticais
FECUNDAÇÃO
5 ETAPAS:
4- fusão do material genético dos pronúcleos 
masculino e feminino
- ocorre no interior do oócito
FECUNDAÇÃO – etapa 4
Fusão do material genético dos pronúcleos 
masculino e feminino
- duração de 12 horas
- envelope do núcleo do SPTZ sofre uma 
vesiculação e expõe a cromatina condensada
- descondensação da cromatina do SPTZ
- protaminas do SPTZ substituídas
por histonas do oócito 
FECUNDAÇÃO – etapa 4
Fusão do material genético dos pronúcleos 
masculino e feminino
- núcleo do oócito completa a segunda divisão 
da MEIOSE
- migração dos pronúcleos
PRÓ-NÚCLEOS 
FEMININO E 
MASCULINO
FECUNDAÇÃO – etapa 4
Fusão do material genético dos pronúcleos 
masculino e feminino
- condensação da cromatina em CROMOSSOMOS
Filamentos de ACTINA e MICROTÚBULOS
FECUNDAÇÃO
5 ETAPAS:
5- ativação de metabolismos do óvulo, que 
iniciam o desenvolvimento
FECUNDAÇÃO – etapa 5
Ativação do óvulo e início do desenvolvimento
- mudanças no citoplasma do oócito 
FUNDAMENTAIS para o desenvolvimento embrionário
- Ca2+ intracelular
- pH de 6,8 para 7,2
- ativação de síntese protéica e DNA 
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
FASE INICIAL
ZIGOTO: embrião de uma única célula
CÉLULA DIPLÓIDE (2n)
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
FASE INICIAL
Inicía-se o processo de CLIVAGEM: divisões mitóticas 
extremamente rápidas, com a formação de inúmeras 
células pequenas, os BLASTÔMEROS
- PRIMEIRA clivagem: 11 a 20 horas após 
fecundação
- SEGUNDA clivagem: padrão rotacional de 
divisão dos blastômeros ( 2 a 3 dias da fecundação)
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
FASE INICIAL
O embrião ainda está cercado pela ZONA PELÚCIDA
limita a expansão do embrião
11 a 20 horas 2 a 3 dias
4 a 5 dias
11 a 20 horas
5 a 6 dias 5 a 7 dias
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
FASE INICIAL: 3 a 5 dias
Até o estágio de 8 células: arranjo frouxo, com 
espaço abundante entre os blastômeros
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
FASE INICIAL
Embrião com 16 células: 
compactação dos 
blastômeros
FASE INICIAL
Embrião com 32 células: 
MÓRULA: massa interna e 
massa externa
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PROCESSO DE COMPACTAÇÃO
MÓRULA MÓRULA COMPACTA
- camada externa das células se diferencia
- íntima conexão entre blastômeros
zona pelúcida
compactação da 
mórula
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PROCESSO DE COMPACTAÇÃO
MÓRULA MÓRULA COMPACTA
- variável entre as espécies
embrião 8 células
embrião 16-32 células
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PROCESSO DE COMPACTAÇÃO
MÓRULA MÓRULA COMPACTA
- camada externa das células se diferencia
- íntima conexão entre blastômeros
TROFECTODERME 
ou TROFOBLASTO
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PROCESSO DE BLASTULAÇÃO
MÓRULA COMPACTA BLASTOCISTO 
- células do trofoblasto passam a secretar fluido 
para a cavidade do embrião: BLASTOCELE
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PROCESSO DE BLASTULAÇÃO
MÓRULA COMPACTA BLASTOCISTO 
- blastômeros internos posicionam-se em um polo 
do embrião, formando a MASSA CELULAR INTERNA
zona pelúcida
trofoblasto
massa celular interna (MCI)
blastocele
zona pelúcida
trofectoderme
massa celular 
interna
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PROCESSO DE BLASTULAÇÃO
Trofoblasto dá origem à PLACENTA FETAL
Massa celular interna dá origem 
ao EMBRIÃO/FETO
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PROCESSO DE BLASTULAÇÃO
BLASTOCISTO INICIAL
BLASTOCISTO
BLASTOCISTO EXPANDIDO
Massa celular 
interna
Massa celular 
externa
Chegam ao útero!!
CAMINHO DO EMBRIÃO
FERTILIZAÇÃO NA 
AMPOLA
8 cél 16 cél
MÓRULA
MÓRULA 
COMPACTA BLASTOCISTO
OVIDUTO
CORNO UTERINO
BLASTOCISTO 
EXPANDIDO
24 a 48h 
3 a 7 d
2 a 3 d
CHEGADA DO EMBRIÃO NO ÚTERO
PASSAGEM PARA O ÚTERO
Dias pós-
ovulação
Estágio de 
desenvolvimento
Formação do blastocisto
(dias pós ovulação)
SUÍNO 2 4 a 8 células 5 – 6 
BOVINO 3 – 3.5 8 a 16 células 7 – 8
OVINO 3 8 a 16 células 6 – 7
EQUINO 5 – 6 Mórula 6
CANINO 8 Blastocisto 8
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
ATIVAÇÃO DO GENOMA EMBRIONÁRIO
- INÍCIO DO DESENVOLVIMENTO: controlado pelo 
genoma MATERNO
- mudança da quantidade de mRNA materno para 
embrionário
blastocisto suíno D6
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
ECLOSÃO DO BLASTOCISTO
- fundamental para que o embrião consiga aderir à 
parede do ÚTERO
- lise de parte da ZP pela estripsina do trofoblasto
e enzimas do endométrio
Eclosão de blastocisto suíno
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
ECLOSÃO DO BLASTOCISTO
Diferenciação da massa celular interna (MCI) em 
EPIBLASTO e HIPOBLASTO
trofectoderme ou trofoblasto
epiblasto
hipoblasto
hipoblasto
trofectoderme ou trofoblasto
epiblasto
saco vitelínico primitivo
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
ECLOSÃO DO BLASTOCISTO
Funções do saco vitelínico primitivo:
- formação do epitélio interno do saco vitelínico- placentação (algumas espécies)
- regulação na sobrevivência, proliferação e 
diferenciação do epiblasto
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
ALONGAMENTO DO BLASTOCISTO
- RUMINANTES e SUÍNOS: evidente alongamento 
do embrião, que se distribui pelos cornos uterinos
Embrião bovino 
D13 chega a ter 1 
metro de 
comprimento, 
ocupando todo o 
útero!!
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PARTICULARIDADES DO EMBRIÃO EQUINO
- retenção de oócitos no oviduto (> 7m)
- oócito VIÁVEL: liberação de PGE2
CLIVAGEM
- DEUTOPLASMÓLISE: extrusão de material 
celular para espaço perivitelínico, que tende a 
sumir
- ocorre em oócitos ricos em lipídeos
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PARTICULARIDADES DO EMBRIÃO EQUINO
- formato elipsóide no OVIDUTO
- formato esférico com a blastocele
- formação de cápsula acelular entre o 
TROFOBLASTO e ZP, que persiste até 20º dia de 
gestação, no BLASTOCISTO
- colágeno + glicoproteínas + ác fosfotúngstico
- FUNÇÃO: semelhante à ZP, imunoproteção
DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO
PARTICULARIDADES DO EMBRIÃO DA CADELA
- ovulação de oócitos imaturos 2n
- fertilização: 2 a 3 dias pós ovulação
- Entrada no útero: 10º dia pós ovulação
- estágios: MÓRULA ou BLASTOCISTO
- migração intercornual: 6 dias
- início da implantação : 16 a 18 dias

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