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Bruna Caprioli Luiz Henrique Baeta Neves Marcia Maria dos Anjos BIOQCLIN 3- Determinação de Colesterol Total em Soro BIOQCLIN 4- Determinação da Fração HDL Colesterol emSoro BIOQCLIN 5 – Determinação de Triglicerídeos em Soro Bioquímica Clínica Universidade são Judas Tadeu Faculdade de Ciências Biológicas e da Saúde Curso Farmácia São Paulo 2018 Bruna Caprioli RA: 818112946 Luiz Henrique Baeta Neves RA:201404969 Marcia Maria dos Anjos RA: 201411995 FAR4AN BIOQCLIN 3- Determinação de Colesterol Total em Soro BIOQCLIN 4- Determinação da Fração HDL Colesterol em Soro BIOQCLIN 5 – Determinação de Triglicerídeos em Soro Orientador: Prefº. Sérgio Mengardo Trabalho realizado para a disciplina de Bioquímica Clínica, curso de Farmácia, da Universidade São Judas Tadeu, como parte dos requisitos necessários ás avaliações parciais da disciplina. Universidade são Judas Tadeu Faculdade deCiências Biológicas e da Saúde Curso Farmácia São Paulo 2018 Sumário. Introdução.................................................................................................3 Objetivos...................................................................................................4 2.1 Determinação de Colesterol total em soro...............................................4 Determinação da fração HDL Colesterol..................................................4 Determinação de Triglicerídeos em soro..................................................4 Materiais e métodos.................................................................................5 Determinação de Colesterol total em soro...............................................5 Determinação dafração HDL Colesterol..................................................6 Determinação de Triglicerídeos em soro..................................................7 5. Conclusão..................................................................................................7 Introdução Colesterol é um a substância gordurosa encontrada em todas as células no nosso corpo. Ele éessencial para a formaçãodas membranas celulares, para a síntese dos hormônios esteroidais como a testosterona, estrogênio, cortisol e outros, para a produção da bile, para digestão de alimentos gordurosos, para formação da mielinapara metabolização de algumas vitaminas (A, D, Ee K) etc. O colesterol tem 2 origens: a endógena, produzido pelo nosso próprio corpo,principalmente pelo fígado, e a exógena, adquirida através dos alimentos. Como se trata de uma substância gordurosa, ela não se dissolve no sangue. É igual a gotas de óleo na água. Portanto, para viajar através da corrente sanguínea e alcançar os tecidos periféricos, o colesterol precisa de um transportador. Essa função cabe as lipoproteínas que são produzidas no fígado. Sendo as principais delas HDL, LDL eVLDL. O HDL ( lipoproteínas de alta densidade) são partículas discoides que exercemimportante papel no transporte de colesterol dos tecidos periféricos para o fígado (transporte reverso do colesterol). A concentração de HDL – colesterol no plasma é avaliada proporcionala prevalência de doenças vasculares. Objetivos Determinação de Colesterol total em soro O objetivo desta prática foi realizar as análises e obter a dosagem de colesterol total emamostra de soro utilizando o método daespectrofotometria. Determinação da fração HDL Colesterol Através do método da espectrofotometria, o objetivo desta pratica foi o de calcular a dosagem de HDL no soro e a partir do resultado determinar a dosagem do LDL, comparando os resultados com os valores de referências 2.3 Determinação de Triglicerídeos em soro O objetivodestapráticafoiodecalcularadosagemdetriglicerídeosnosoro,atravésdo método daespectrofotometria e comparar os resultados com os valores de referência Materiais e métodos 3.1 Determinação de Colesterol total em soro Materiais utilizados: • 3 tubos de ensaio; • Espectrofotômetro e cubetas; • Micropipeta de 1,0mL; •Micropipeta de 10μL; • ponteiras descartáveis para micropipeta; • Banho maria a 37°C; • Soro humano recente; • Luvas descartáveis; • Reagente de cor Para a realização desta prática colocou -se 10 μl do soro no tubo teste, 10 μl da solução padrão no tubopadrão e 1 ml do reagente de cor em todos os tubos. Após serem homogeneizadas, incubaram-se as misturas à 37ºC por 10 minutos. Após esse tempo foram levadas até o espectrofotômetro para medir a absorbância do teste e do padrão, zerando o aparelho com o tubo branco contendo água destilada e utilizando o comprimento de onda de 510nm. TUBOS Teste Padrão ABSORBÂNCIA 0,696 0,484 Colesterol Total (mg/dl) = Absorbância do Teste x200 ________________________ Absorbância do Padrão Cálculo: Colesterol Total (mg/dl) = 0,696/0,484x200= 288mg/dl Valores de referência Desejável:130 .- 200mg/dL Limítrofe:200 – 239 mg/dL Dislipidemia: acima de 240 mg/dL Ao final da prática foi observado que a concentração de colesterol total estava normal nos exames. O colesterol total é a soma do colesterol HLD, LDL, VLDL e Triglicerídeos. Determinação da fração HDL Colesterol Materiais utilizados na aula foram: • 1 micropipeta de 200μL; • 1 micropipeta de 1,0 μL; • 1 micropipeta de 25 μL; • ponteiras descartáveis para as micropipetas; • água destilada; • centrífuga; • Espectrofotômetro; •Cubetas de espectrofotômetro. Em tubo 10x75, adicionar 200μL de soro e 200μL de reagente precipitante. Homogeneizar e deixar repousar por 10 minutos à temperatura ambiente. Centrifugar durante 15 minutos a 3.500 rpm ou 4 minutos a 12.000 rpm. Utilizar Reagente de Cor da determinação de: Colesterol Total. Após identificar 3 tubos de ensaio com B (branco), T (teste) e P (padrão). Após serem homogeneizadas, as misturas foram encubadas em banho-maria à 37ºC por 10 minutos. Após esse tempo foram levadas até o espectrofotômetro para medir a absorbância do teste e do padrão, zerando o aparelho com o tubo branco contendo água destilada e utilizando o comprimento de onda de 510nm. TUBOS Teste Padrão ABSORBÂNCIA 0,624 1,315 Cálculo HDL-c (mg/dl)= Absorbância do Teste _____________________x 50 x 2 Absorbância do Padrão HDL – c (mg/dL)=0,624/1,315x50x2= 47mg/dL 3.3 Determinação de Triglicerídeos em soro Materiais utilizados na aula foram: • 1 micropipeta de 200μL; • 1 micropipeta de 1 mL; • 1 micropipeta de 10 μL; • ponteiras descartáveis para as micropipetas; • reativo para determinação de triglicerídeos; • Espectrofotômetro; • Cubetas deespectrofotômetro TUBOS Teste Padrão ABSORBÂNCIA 0,624 1,315 Cálculo Triglicérides (mg/dl) = Absorbância do Teste x CP ______________________ Absorbância Padrão Triglicérides (mg/dl) = 0,624/1,315 x 200 = 95 mg/dl Valores de Referência LDL-c (mg/dl) = (Colesterol Total - HDL) - (Triglicérides) 5 LDL-c (mg/dl) = (288- 47) - (95) 5 LDL-c (mg/dl) =222 mg/dl Conclusão Ao final desta prática é visto que o valor obtidona dosagem de triglicerídeos no soro é desejável em indivíduos adultos. A determinação dos triglicérides possui um vasto significado clinico, especialmente em se tratando de doenças coronarianas e ateroscleróticas. Pessoas com mais idade, com excesso de peso, ou ambos, tendem a ter os níveis de triglicerídeos e colesterol total e levados. Muitas pessoas com doença cardíaca ou diabetes têm níveis elevados de triglicerídeos em jejum. Estudos têm demonstrado que pessoas com níveis de triglicerídeos acima do normal em jejum tem maior risco para ataque cardíaco e AVC.
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