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Universidade Federal de Ciências da Saúde de Porto Alegre Biomedicina-Noturno Bioquímica I Profa. Alethéa Gatto Barschak Andressa Dutra Dode Sabrina Lima Schmidt Aminoácidos: Curva de titulação da glicina Porto Alegre, 16 de agosto de 2017. Introdução Os aminoácidos são estruturas fundamentais da estrutura protéica. A glicina, um aminoácido , é apolar, com grupamento R alifático, ou seja, possui um hidrogênio como radical R. A glicina, é um ácido que pode ceder 2 prótons durante a titulação com uma base, quando protonada. Observa-se um aumento de resistência da variação do pH, no pK¹ e pk². A partir do acréscimo gradual de uma base, pode-se observar a capacidade tamponante do aminoácido. A base utilizada no experimento foi o Hidróxido de Sódio pois (...) Glicina Hidróxido de Sódio Materiais e Métodos Foram utilizados 20 ml de solução de Glicina 0,02 M, 43 ml totais de uma base- Hidróxido de sódio 0,1M-, pHmetro portátil, 1 frasco de Erlenmeyer, 1 pipeta , 1 proveta e 1 pipetador. No experimento, não foi necessário a utilização de ácido clorídrico pelo grupo, pois a solução já estava acidificada pelo técnico. Colocou-se 20 ml de solução de Glicina em uma proveta, e após, o conteúdo fora transferido para um frasco de Erlenmeyer. O pHmetro primeiramente foi lavado em água corrente e água destilada, seco delicadamente com papel. O pHmetro foi posicionado dentro da solução de Glicina e portanto, ligado. O pH inicial da substância foi medido, e a cada 1ml de Hidróxido de Sódio acrescentado, a leitura de pH era realizada. Após a solução alcançar pH próximo ou igual à 12, o pHmetro fora desligado, novamente limpo e seco. Resultados e Discussão Abaixo consta os dados de acompanhamento de NaOH. NaOH adicionado(ml) pH NaOH adicionado(ml) pH 0 1,82 23 11,47 1 1,75 24 11,52 2 2,02 25 11,56 3 2,25 26 11,60 4 2,54 27 11,63 5 2,61 28 11,67 6 2,66 29 11,69 7 2,70 30 11,71 8 2,95 31 11,73 9 3,03 32 11,75 10 3,26 34 11,78 11 3,45 34 11,79 12 3,81 35 11,81 13 7,43 36 11,81 14 8,78 37 11,82 15 9,37 38 11,83 16 9,77 39 11,84 17 10,63 40 11,85 18 11,09 41 11,86 19 11,24 42 11,88 20 11,34 43 11,91 21 11,41 44 11,89 22 11,47 Colocou-se 1 ml de NaOH ao invés de 0,5 ml, pois o pHmetro inicial utilizado apresentou certa descalibração, portanto, foi necessário a troca do instrumento, também principalmente, devido ao tempo de duração da aula, pois a prática ficaria incompleta- pelo fato de não ser alcançado o valor de pH 12-. 3.1. Questionário Calcule o pI da glicina e identifique a forma iônica predominante neste ponto. pI=(2,34+9,60)/2= 5,97. Calcule o pH de uma solução de glicina sabendo-se que estão presentes as formas A+ e A- na relação de 90:10. pH= pKa+log[sal]/[base] Todos os aminoácidos devem apresentar uma curva de titulação semelhante a da glicina? Justifique a resposta. Todos os aminoácidos com um único grupo alfa-amino, um único alfa-carboxila e um grupo R desprovido de grupos ionizáveis tem curvas semelhantes a da glicina por possuírem pKa muito similares, por exemplo, pKa do grupo -COOH encontra-se na região de 1,8 e 2,4 e o pKa do grupo -NH3 encontra-se na região de 8,8 e 11,0. Por que razão a curva de titulação da glicina sofreu um achatamento no pK1 e outro no pK2 ? O pK1 e pK2 sao as zonas de tamponamento do aminoácido, nesses pontos o pH é igual ao pKa, as áreas de tamponamento tem função de segurar o pH de manter estável o pH da solução. Caso a glicina ocorresse em altas concentrações no sangue ela desempenharia um papel importante na manutenção (tamponamento) do pH fisiológico? Justifique a resposta. A histidina é o único aminoácido com poder tamponante efetivo pois seu pH se encontra próximo ao pH fisiológico, Porem a glicina pelo seu poder de agir tanto como acido tanto como base dependendo do meio em que se encontra, teria o papel de manter o pH fisiológico do sangue estável, ou seja, sem grandes variações perto do seu pH ótimo que seria 7,8 aproximadamente. Compare as curvas, teórica e experimental, obtidas nesta aula prática e comente eventuais divergências. Construir um gráfico de pH x volume de NaOH 0,1M adicionado, em papel milimetrado. CURVA TEORICA DA GLICINA Conclusão Referências Bibliográficas Glicina: Lenninger; Hidróxido de Sódio: https://www.hoffmanmfg.com/products/sodium-hydroxide/
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