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Universidade Federal do Recôncavo da Bahia Centro de Ciências Agrárias, Ambientais e Biológicas Microbiologia Geral Relatório da Aula Prática de Preparo de materiais e meios de cultura para esterilização Discentes: Camila Guerra Jessica Cavalotti Maria Thieta Lobao Rafaela Silva Faria Docente: Maria Gardenny Ribeiro Pimenta Cruz das Almas 2014 Introdução O crescimento dos microrganismos nos diferentes meios de cultura utilizados fornece as primeiras informações para a sua identificação. É importante conhecer o potencial de crescimento de cada meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado para cada material. Alguns procedimentos são essenciais na hora da preparação de cada meio de cultura para a obtenção de melhores resultados e evitar contaminações. Para o preparo de materiais e meio de cultura para esterilização devemos aprender a preparar o material de forma correta para esterilização, pesar e hidratar o meio de cultura e aprender o funcionamento de uma autoclave. Materiais e Métodos Os materiais utilizados nesta aula pratica dirigida pela Profª Maria Gardenny são: Placa de Petri, Pipetas de 10 mL, Erlenmeyer, Papel Kraft ou jornal, Fita, Pincéis para marcação, Tesoura, Algodão, Gazes, Meio de cultura, Água destilada, Balança semi-analítica e o Autoclave. O método que prosseguimos com a nossa prática foram: a preparação de vidraria para esterilização e a preparação do meio de cultura. Na preparação de vidraria para esterilização utilizamos a: Placa de Petri aonde Separamos as placas limpas e secas, embalamos as placas de preferência duas a duas (evitar empilhar um número grande de placas) para facilitar a esterilização e estocagem, colocamos as placas no centro do papel e embrulhar firmemente para evitar a absorção de umidade, utilizamos a fita adesiva para reforçar o lacre. Pipetas graduadas aonde colocamos uma pequena rolha de algodão no bocal de cada uma das pipetas, embrulhamos uma a uma. Tubos de ensaios, balões de fundo chato, erlenmeyrs etc. nós cortamos um pedaço de gaze e colocamos na boca de um tubo de ensaio e em seguida, colocamos algodão até se obter um tampão firme. Vale ressaltar que nos erlenmeyers ou qualquer recipiente utilizado para esterilização de meios de cultura, proceder da mesma forma, colocando para finalizar a coifa com papel Kraft ou jornal para proteger o tampão. E na preparação do meio de cultura fizemos o cálculo da massa que será pesada, transferimos a quantidade para um pedaço de papel laminado com o auxílio de uma espátula, sobre a balança e após a pesagem, adicionamos 100 mL de água destilada para hidratar o meio de cultura. Também é valido ressaltar que o preparo de meios de cultura com ágar devem ocorrer com água destilada aquecida ou com o auxílio do micro-ondas ou chapa aquecedora. Resultados e discussão Os resultados ocorrem de forma como o esperado, obtivemos uma solução para o meio liquido de 100mL, x=1,3g e para o meio sólido 100mL, x=235g. Com base nos conhecimentos adquiridos com esta aula prática observamos que convivemos com os micro-organismos praticamente em todos os ambientes naturais como o ar, solo, água, entre outros. Para evitar a contaminação do meio devemos utilizar técnicas de esterilização, os quais são fundamentais ao se realizar uma amostra ou linha de pesquisa, pois devemos evitar aquilo que é possível, pois sempre haverá o inevitável. Questionário Qual a importância do correto preparo do material para esterilização? A esterilização é o processo que promove completa eliminação ou destruição de TODAS as formas de microrganismos presentes: vírus, bactérias, fungos, protozoários e esporos... o manuseio errado, o método errado e a falta cuidado pode ocasionar um resultado que não seria esperado no experimento desejado. O que são meios de cultura? Meios de cultura são preparações químicas que possuem em sua formulação, nutrientes necessários para que os micro-organismos possam se multiplicar permitindo, entre outras funções, seu estudo e análise. Qual o propósito da adição de ágar na formulação dos meios de cultura? O propósito de adição de ágar é a conservação e manutenção de culturas e solidificar. Por que a esterilização é necessária antes da utilização dos meios de cultura ou materiais em Microbiologia ? A esterilização de materiais é a total eliminação da vida microbiológica destes materiais. É diferente de limpeza e diferente de assepsia. Por isso é necessária antes de utilização dos meios de cultura ou materiais em microbiologia, uma das formas de esterilização obtém-se através do uso do Autoclave, para grandes quantidades de meios, ou de uma panela de pressão, para pequenas quantidades de meios. Um produto é microbiologicamente estéril quando não contem nenhuma forma de microrganismo vivo.
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