Lambert Beer

Prévia do material em texto

INSTRUMENTOS PARA ANÁLISE 
É necessário um estímulo (radiação eletromagnética, energia elétrica, mecânica ou 
nuclear) para provocar uma resposta. 
Fonte de 
 Energia 
Sistema em 
 Estudo 
Informação 
 Analítica 
O instrumento converte a informação armazenada nas propriedades físicas 
ou químicas do analito em um tipo de informação que pode ser manipulada 
e interpretada. 
Estímulo Resposta 
 Espectrofotômetro UV/Visível 
Estímulo 
Resposta 
Vários fenômenos podem ocorrer com a 
radiação luminosa, como: reflexão, refração, 
espalhamento ou ser absorvida pelo material. 
Absorção de Radiação 


chhE 
E = energia 
h = constante de Planck (6,626 . 10-34 J s) 
 = frequência 
c = velocidade da luz (2,998 . 108 m s-1) 
 = comprimento de onda 
Baixa energia Alta energia 
Comprimento de onda e Energia 
Frequência  (m) Energia Nome Uso 
1020 a 1021 10-12 Nuclear Raios-g Medicina 
1017 a 1019 10-10 Eletrônica Raios-X 
Diagnóstico 
por imagens 
1015 a 1016 10-7 Eletrônica Ultra-Violeta Higienização 
1013 a 1014 10-6 Eletrônica Visível Iluminação 
1012 a 1013 10-4 Vibracional Infravermelho Aquecimento 
109 a 1011 10-2 Rotacional Microondas Cozimento 
105 a 108 102 
Rádio 
Frequência 
Comunicação 
Usos da radiação eletromagnética 
I0= 
I = 
Um espectrofotômetro é um instrumento que mede a 
quantidade de luz de um comprimento de onda que passa 
através de um meio. 
A absorbância é muito importante 
porque ela é proporcional à 
concentração de espécies absorvente 
a luz. 
(cm) 
( Mol/L ) 
Obs : A Lei de Beer é valida 
apenas para soluções diluídas. 
As unidades de ε são usualmente 
em M−1cm−1 ou L mol−1cm−1 
 Leitura 
Uso em Análises 
Esta técnica é muito usada em laboratórios de controle de 
qualidade, pesquisa e desenvolvimento de análises clínicas e 
toxilógicas. Algumas de sua aplicações incluem a medição da 
concentração de substâncias tais como proteínas, o 
crescimento de células bacterianas, e reações enzimáticas. 
INSTRUMENTAÇÃO 
INSTRUMENTAÇÃO 
Esquema Básico de um Instrumento para Medir a Absorção 
Sistema de Feixe Simples 
Sistema de Feixe Duplo 
Absorção Molecular no UV/Vis 
0 2 4 6 8 10
0,0
0,2
0,4
0,6
0,8
1,0
T
ra
n
sm
it
ân
ci
a
Concentração
0,0 2,5 5,0 7,5 10,0
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
A
b
so
rb
ân
ci
a
Concentração
LEI DE LAMBERT-BEER 
Gráficos 
Transmitância x concentração Absorbância x concentração 
0,0 2,5 5,0 7,5 10,0
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
A
b
so
rb
ân
ci
a
Concentração
A absorbância aumenta 
conforme aumenta qualquer 
um dos três: e, b ou c 
Absorção Molecular no UV/Vis 
LEI DE LAMBERT-BEER 
Absorção Molecular no UV/Vis 
Aumento do caminho óptico 
Absorção Molecular no UV/Vis 
Aumento da concentração 
 Leitura 
Cromóforo é a parte da molécula que é responsável pela absorção da luz 
 Um espectro de absorção é um gráfico mostrando 
como A (absorbância varia com o comprimento de onda. 
Caracteristicas da absorção 
 Absorbância é diretamente proporcional a concentração e 
possui uma grandeza admensional ou seja não tem unidade 
(dimensão). 
 Absorbância é chamada algumas vezes de densidade óptica 
 Absortividade ( ou coeficiente de retenção ) é a 
caracteristica de uma substância, e indica qual a quantidade 
de luz que é absorvida num determinado comprimento de 
onda 
2. Converta em absorbância: 
 (%) = 25,5 – 56,7 – 32,8 – 3,58 
3 . Converta em percentagem de transmitância.: 
A = 0,0510 – 0,918 – 0,379 – 0,261 – 0,485 
. 1 . Qual o valor da absorbância que corresponde a 45% 
de transmitância. 
 Exercícios 
 
5. A absorbância de uma solução 2,31 x 10-5 mol L-1 de um 
composto é de 0,822, no comprimento de onda de 350 nm, 
numa cubeta de 1 cm de caminho óptico. Calcule a 
absortividade molar do composto em 350 nm. 
4. Encontre a absorbância e a transmitância de uma solução 
0,00255 mol L-1 de uma substância com coeficiente de 
absortividade molar de 315 mol-1 cm–1 numa cubeta de 2,00 cm de 
caminho óptico . 
6 . Em uma determinação de cobre, se mede uma absorbância de 
0,65. Sabe-se que existe uma concentração aproximada de 10-4 
moles/L de um interferente com absortividade molar de 100 
L/moles.cm. Sabendo que a cubeta tem uma espessura de 1 cm, 
calcule a absorbância devida somente ao cobre. 
7. Se uma solução 0,010M tem em determinado comprimento de 
onda 45%T , qual será sua transmitância porcentual para uma solução 
0,020M da mesma substância. 
 8 . Várias soluções padrão de Y se empregam para traçar uma 
curva de calibração com os seguintes dados: 
Concentração 
(ppm) 
Absorbância 
1,00 0,26 
2,00 0,44 
3,00 0,54 
4,00 0,61 
Se uma solução problema tem uma absorbância de 0,50 nas 
mesmas condições, qual a concentração de Y em moles/l, 
sabendo que seu peso molecular é 156 g/mol ? 
9. Encontre a absorbância e a transmitância de uma solução 
0,00250 mol L-1 de uma substância com coeficiente de 
absortividade molar de 315 L mol-1 cm–1 numa cubeta de 25mm 
de caminho óptico a 550nm. 
10 . A absortividade de uma certa substância é 5.000 cm-1 mol-1 L, 
no comprimento de onda de seu máximo de absorção. Calcular qual a 
concentração em mol L-1 dessa substância numa determinação 
espectrofotométrica, com celas de 10,0 mm de trajeto ótico, para 
uma absorvância de 0,75. 
11. Encontre a absorbância e a transmitância de uma solução 0,00350 
mol L-1 de uma substância com coeficiente de absortividade molar de 
415 L mol-1 cm–1 numa cubeta de 2,5cm de caminho óptico a 550nm. 
12 . Qual a absortividade de uma certa substância, cuja a concentração 
molar é igual a 0,00006 mol/l no comprimento de onda de seu máximo 
de absorção. A substância foi analisada num espectrofotômetro, com 
celas de 2cm de trajeto ótico, e obteve uma absorbância igual a 1,25. 
 
15 - Se a absorbância de uma solução padrão de CuSO4 com concentração 
de 0,00025 mol L-1 foi 0,150 à 540 nm utilizando-se uma cubeta de 3 cm, 
qual a absortividade molar da substância neste comprimento de onda? 
14 - Qual a concentração de MnO4 
-1 em mol L-1 de uma solução com 
absorbância de 0,345 à 500nm utilizando uma cubeta de 2cm? A 
absortividade molar a 500nm é 10.000 mol-1 Lcm-1.