2014_II_Aula_Pratica_sobre_Fungos_filamentosos

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Aspectos macroscópicos e preparo de lâminas para visualização de fungos filamentosos
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Características gerais dos fungos
São organismos eucarióticos que podem ser:
 - Pluricelulares (Filamentosos)
 - Unicelulares (Leveduras)
São organismos heterotróficos:
- Sapróbios: são fungos que se nutrem da matéria orgânica de organismos mortos (ou de partes que podem se destacar de um organismo, como pele, folhas e frutas que caem no solo), provocando a sua decomposição;
Parasitas: são aqueles que vivem à custa de outro ser vivo, prejudicando-o e podendo até matá-lo.
. Objetivos do isolamento:
 Identificação, estudos dos requerimentos nutricionais, pesquisa de produtos metabólicos, etc.
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Métodos de isolamento de fungos filamentosos
Periferia da lesão:
tecido vivo – isolamento do fitopatógeno.
Incubação por até 15 dias/ em média 30ºC
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Centro da lesão:
tecido morto – predomínio de saprófitas.
Transferência para meio de cultura de fragmentos do tecido atacado, do alimento, etc.
FUNGOS PARASITAS
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ISOLAMENTO DE FUNGOS PATOGÊNICOS
Raspado e/ou avulsão de pelos, material de biópsia, etc.
Fragmentos do material inoculado em meios de cultura seletivos para fungo patogênico
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FUNGOS SAPRÓFITAS
Diluição, estrias ou fragmento do material em superfície de meio sólido.
Métodos de isolamento de fungos filamentosos
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Alternaria spp
Rhizopus spp
IV 217 - Aula prática 7
Aspectos coloniais dos fungos filamentosos
Penicillium spp
Aspergillus flavus
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MÉTODO DE CULTIVO EM LÂMINA
OBSERVAÇÃO DAS ESTRUTURAS INTACTAS DO FUNGO
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CÂMARA ÚMIDA
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Preparo de lâminas de fungos filamentosos
Colônia de fungo em meio de cultura ou, sobre um substrato – uso da alça de platina em forma de “L, retirando um fragmento profundo da colônia;
Colônia de fungo em meio de cultura, sobre um substrato ou crescimento sobre a superfície – uso da fita adesiva
MONTAGEM DE LÂMINAS
 - Azul de algodão: Para fungos que apresentam micélio claro;
 - Agente clarificante (NaOH ou KOH - 30%): Para fungos que apresentam micélio escuro. Fâneros (materiais com queratina: raspados de pele, pêlo, casco, chifre, unha, etc. )
 
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ESTRUTURAS VEGETATIVAS
Micélio cenocítico – conjunto de hifas não septadas.
Micélio septado – conjunto de hifas septadas.
Hifa não septada
Hifa septada
Observação microscópica de fungos
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ESTRUTURAS DE REPRODUÇÃO ANAMORFA
Fusarium spp
Curvularia spp
Alternaria spp
Observação microscópica de fungos
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ESTRUTURAS DE REPRODUÇÃO ANAMORFA
Tetraploa spp
Microsporum spp
Helminthosporium spp
Observação microscópica de fungos
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IV 217 - Aula prática 7
Observação microscópica de fungos
Estípede
ESTRUTURAS DE REPRODUÇÃO ANAMORFA
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Aspergillus niger
Conídio
Vesícula
Fiálide
Métula
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Penicillium sp
IV 217 - Aula prática 7
Conídios
Fiálides
Estípede
Observação microscópica de fungos
ESTRUTURAS DE REPRODUÇÃO ANAMORFA
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Ramo
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Rhizopus sp.
Observação microscópica de fungos
ESTRUTURAS DE REPRODUÇÃO ANAMORFA
Esporangióforo
Esporângio
Rizóide
Esporos
Columela
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PREPARO DE LÂMINAS
*Clarificante = NaOH ou KOH:
	*Para lâminas com fâneros (estruturas com queratina) = raspados de pelo, pele, casco, chifre, unha, etc.
	*Lâminas de Aspergillus niger.
	*Lâminas com vegetais.
*Corante = Azul de Algodão:
	*Para lâminas de colônias de fungo, exceto A. niger.