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* Crescimento microbiano * Crescimento e morte – critérios utilizados * Métodos utilizados para determinar o crescimento microbiano: Determinação do peso seco Determinação de constituintes essenciais Determinação da atividade catalítica Câmaras de contagem Turbidimetria Aparelho de Andersen Impactação em membrana Filtração por membrana Contagem viável em placas * DETERMINAÇÃO DO PESO SECO O QUE É PESO SECO ? Peso de um material completamente destituido de água Peso seco de uma folha de um vegetal = peso da folha completamente seca * COMO APLICAR ? * * * * * DETERMINAÇÃO DO CONSTITUINTS ESSENCIAIS COMO “C” ou “N” * DETERMINAÇÃO DA ATIVIDADE CATALÍTICA * * * * * * * * FILTRAÇÃO POR MEMBRANA * Amostrador de Andersen * Amostragem de microrganismos do Ar: Amostradores em cascata Pode-se utilizar diferentes meios de cultura * * Placas após incubação * Amostragem por impactação em membrana: Outros amostradores Membrana hidrossolúvel * CONTAGEM VIÁVEL EM PLACAS * 1 2 3 4 9 1 2 3 4 5 9 9 TUBOS DE ENSAIO CONTENDO MEIO DE CULTIVO SÓLIDO NOVE TUBOS DE ENSAIO CONTENDO EXATOS 9 mL DE SOLUÇÃO SALINA EM CADA * 1º - FUNDIR OS MEIOS DE CULTIVO QUE ESTÃO NOS TUBOS E MANTER A 50º C ATÉ O MOMENTO DA REALIZAÇÃO DO TESTE 2º - REALIZAR AS DILUIÇÕES ATÉ 10 -9 . . . . . . . AMOSTRA 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -9 * 1º - FUNDIR OS MEIOS DE CULTIVO QUE ESTÃO NOS TUBOS E MANTER A 50º C ATÉ O MOMENTO DA REALIZAÇÃO DO TESTE 2º - REALIZAR AS DILUIÇÕES ATÉ 10 -9 . . . . . . . AMOSTRA 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -9 * 1º - FUNDIR OS MEIOS DE CULTIVO QUE ESTÃO NOS TUBOS E MANTER A 50º C ATÉ O MOMENTO DA REALIZAÇÃO DO TESTE 2º - REALIZAR AS DILUIÇÕES ATÉ 10 -9 . . . . . . . AMOSTRA 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -9 * 1º - FUNDIR OS MEIOS DE CULTIVO QUE ESTÃO NOS TUBOS E MANTER A 50º C ATÉ O MOMENTO DA REALIZAÇÃO DO TESTE 2º - REALIZAR AS DILUIÇÕES ATÉ 10 -9 . . . . . . . AMOSTRA 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -9 * 1º - FUNDIR OS MEIOS DE CULTIVO QUE ESTÃO NOS TUBOS E MANTER A 50º C ATÉ O MOMENTO DA REALIZAÇÃO DO TESTE 2º - REALIZAR AS DILUIÇÕES ATÉ 10 -9 . . . . . . . AMOSTRA 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -9 * 3º - TRANSFERIR 1 mL ou 0,1 mL DE CADA DILUIÇÃO PARA PLACAS DE PETRI VAZIAS E ESTERILIZADAS, ANOTANDO AS RESPECTIVAS DILUIÇÕES * * TRANSFERÊNCIA DE 1 mL DE CADA DILUIÇÃO PARA PLACAS DE PETRI VAZIAS E PREVIAMENTE ESTERILIZADAS * 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -6 10 -7 10 -8 10 -9 4º - VERTER O MEIO DE CULTIVO PREVIAMENTE FUNDIDO PARA CADA PLACA DE PETRI * 10 -1 10 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -6 10 -7 10 -8 10 -9 5º - IMEDIATAMENTE APÓS O PREENCHIMENTO DAS PLACAS COM O MEIO DE CULTIVO, REALIZAR MOVIMENTOS “EM OITO” COM CADA PLACA, EM UMA SUPERFÍCIE PLANA E INCUBAR * * 6º - AGUARDAR O SURGIMENTO DE COLÔNIAS, REALIZAR A CONTAGEM E EFETUAR O CÁLCULO * Curva de crescimento microbiano Lag fase * Curva de crescimento microbiano Lag fase * Curva de crescimento microbiano Log do nº de céls Tempo (horas) Lag fase * Log do nº de céls Tempo (horas) Fase de crescimento exponencial * Log do nº de céls Tempo (horas) Fase estacionária máxima * Log do nº de céls Tempo (horas) Fase de morte ou declínio *
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