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UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS FCBA– FACULDADE DE CIENCIAS BIOLÓGICAS E AMBIENTAIS CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS Prática de Morfofisiologia Celular Comparada Tema: Material Genético Prática: Observação de sêmen de carneiro Prof. Dr. Marcos Gino Fernandes Mariana Palachini de Oliveira DOURADOS, 2°SEMESTRE DE 2012. Introdução: Sêmen é um fluido corporal branco acinzentado que é secretado pelas gônadas dos machos. Ele carrega o esperma ou espermatozoides e frutose e outras enzimas que ajudam o espermatozoide sobreviver para facilitar a fecundação bem sucedida. O espermatozoide maduro é composto de três partes cabeça, colo e cauda. Na cabeça encontramos o núcleo haploide envolvido por uma fina camada de citoplasma e o acrossoma, que também é chamado de capuz acrossômico e contém enzimas que auxiliam na penetração do espermatozoide do envoltório do óvulo. O colo é a junção entre a cabeça e a cauda. A cauda é composta de três peças: peça intermediária, peça principal e peça final. Apresenta muitas mitocôndrias, pois precisa de muita energia para sua motilidade. As mitocôndrias se arranjam circundando a parte inicial do flagelo denominada peça intermediária, e tem importante função no fornecimento de energia para a movimentação do flagelo e consequentemente condução do espermatozoide através do trato genital feminino. Objetivos: Observar a morfologia da célula germinativa masculina. Conhecer os flagelos dos espermatozoides. Diferenciar material não corado e corado. Material: Microscópio de luz. Sêmen de carneiro. Luvas. Conta-gotas ou pipeta. Solução de cloreto de sódio a 0,9%. Lâminas e lamínulas. Corante Rosa de Bengala. Procedimento A: Recolheu-se o sêmen do animal e, no momento da prática, misturou-o com a solução citrato de sódio a 2,9% na proporção de 1:1 (essa solução pode ser congelada para posteriores observações). Misturou-se a solução de sêmen mais citrato com NaCl 0,9% na proporção 1:1 (usou-se luvas). Pingou-se uma gota dessa solução contendo espermatozoides sobre a lâmina. Iniciou-se a colocação da lamínula em posição de 45° com relação á lâmina e, foi abaixando lentamente, até que a mesma ficou totalmente sobre a lâmina, evitando a formação de bolhas de ar. Retirou-se com papel absorvente o excesso de líquido para manter a lamínula fixa. Analisou-se em aumentos crescentes, utilizando os aumentos de 40x, 100x, 400x e 1000x. Esquematizou-se nos aumentos de 400x e 1000x. Procedimento B: Pingou-se uma gota da solução (sêmen + citrato) sobre a lâmina e fez um esfregaço (usaram-se luvas). Esperou-se secar. Pingou-se sobre o material o corante Rosa Bengala. Esperou-se cerca de cinco minutos e lavou-o, tirando assim o excesso do corante. Iniciou-se a coloração da lamínula em posição de 45° com relação á lâmina e foi-se abaixando lentamente, até que a mesma ficasse totalmente sobre a lâmina, evitando a formação de bolhas de ar. Retirou-se com papel absorvente o excesso de líquido para manter a lamínula fixa. Analisou-se em aumentos crescentes, utilizando os aumentos de 40x, 100x, 400x e 1000x. Esquematizou-se nos aumentos de 400x e 1000x. Resultados: B. Aumento de 400x-Sem corante. Aumento de 1000x-Sem corante. C. D. Aumento de 400x-Com corante. Aumento de 1000x-Com corante. Cabeça. Peça intermediária. Peça principal. Peça terminal. Conclusão: Discussão: O que é sêmen? R: Sêmen é um fluido corporal branco acinzentado que é secretado pelas gônadas dos machos. Ele carrega o esperma ou espermatozoides e frutose e outras enzimas que ajudam o espermatozoide sobreviver para facilitar a fecundação bem sucedida. Quais as estruturas do espermatozoide? Quais destas estruturas foram possíveis de serem observadas nessa prática? R: Cabeça, colo e cauda foram possíveis observarmos nessa prática as três partes cabeça, colo e cauda. Houve diferença entre o material corado e não corado? Quais? R: Sim. No material não corado só conseguimos observar a cabeça e a cauda já no material corado foi possível observar além da cabeça e da cauda o colo e suas peças. Qual a função das mitocôndrias na peça intermediária do espermatozoide? R: As mitocôndrias se arranjam circundando a parte inicial do flagelo denominada peça intermediária, e tem importante função no fornecimento de energia para a movimentação do flagelo e consequentemente condução do espermatozoide através do trato genital feminino. Qual a função do citrato de sódio na solução preparada? R: Dissolver os espermatozoides q eu se encontravam concentrados possibilitando assim uma melhor visualização. Referências: http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfjTcAI/esperma-semen-qual-a-diferenca-1 http://www.ebah.com.br/content/ABAAABnxoAJ/aula-29-organelas-envolvidas-na-espermatogenese http://diariodefarmacia2010.blogspot.com.br/2010_08_01_archive.html http://www.todabiologia.com/dicionario/esperma.htm http://www.news-medical.net/health/Semen-What-is-Semen-(Portuguese).aspx
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