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Experimento 10 Cromatografia em coluna: Materiais e reagentes Bureta Algodão Bastao de vidro Hagarose Béquer Etanol Proveta Solução de corantes Parte Experimental: Em uma bureta, adicionou-se uma pequena quantidade de algodão (para evitar a passagem do suporte solido), com auxilio de um bastão de vidro, e adicionados 3,110g de hagarose, pesados em uma balança analítica, e então foi adicionado o etanol, com uma proveta, até passar do menisco e deixou-se gotejar até atingir o menisco. Acrescentou-se 0,2ml da solução de dois corantes já preparada, com auxilio de uma pipeta de 1ml, e começou a se fazer a separação deixando o etanol gotejar. Primeiramente a solução que saiu primeiro era de cor rosa, recolhidos em um béquer, a segunda solução ficou com uma cor azul, também recolhidos em um béquer. Assim determinando os dois corantes da mistura que foram o rodamina B e o azul de metileno. Cromatografia em Camada Delgada Materiais e reagentes: Álcool hidratado Acetato de Etila Hexanol Papel filtro Pipeta graduada Vidro de Pepino Capitar Béquer Parte Experimental: Adicionou-se álcool hidratado (solvente) em um vidro de pepino, com auxílio de uma pipeta graduada de 10ml, até que a parte do papel filtro onde havia as gotas de corantes ficou submersa em solvente Em um papel filtro cortado no tamanho determinado, foi aplicado pequenas amostras de corantes como mostrado no desenho 1, com o auxílio de um capilar, e transferido para o vidro de pepino. desenho 1 Foi feito o mesmo processo mais 2 vezes, apenas trocando o solvente para acetato de etila e hexanol. Para identificar qual solvente é mais eficaz para eluir os corantes, e os dados do calculo do fator de retenção (Rf ) podem ser vistos na tabela 1. Tabela 1 – Eluição dos Analitos (Rf) Corante Solvente Hexano(mm) Acetato de Etila(mm) Etanol(mm) Fluoresceína 0 9,154 10 Rodamina B 5,638 10 10 Azul de Bromotimol 4,042 10 10 Azul de Metileno 0 0 6,344
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