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FUNCIONAMENTO DO DNA Transcrição e Tradução Transcrição • A informação genética contida no DNA pode ser copiada em mais DNA durante a replicação, ou traduzida em proteínas. • Os primeiros pesquisadores tinham bons motivos para acreditar que a informação não era transferida do DNA para a proteína. Um motivo é que o DNA é encontrado no núcleo (cél. Eucariótica), enquanto a proteína é sabidamente sintetizada no citoplasma. Outro ácido nucléico, o ribonucléico (RNA), é necessariamente um intermediário. • Aparentemente o RNA é sintetizado no núcleo e então se desloca para o citoplasma. É um bom candidato para intermediário na transferência de informação entre o DNA e a proteína. • A conclusão hipotética é que o RNA é sintetizado a partir do DNA e passa para o citoplasma, onde é usado para síntese de proteínas. • PROPRIEDADES DO RNA: • É também uma longa macromolécula de ácido nucléico (como é o DNA), mas suas propriedades são bem diferentes: • 1) O RNA é unifilamentar e não uma dupla hélice • 2) O RNA tem um açúcar ribose e não desoxirribose, em seus nucleotídeos. • 3) O RNA tem a base Uracil no lugar da Timina, entretanto, o Uracil forma pontes de hidrogênio com adenina do mesmo modo que a Timina. • Uma enzima de trancrição, a RNA polimerase, pode fazer a transcrição de um modo muito similar a replicação • O RNA é transcrito de um único filamento de DNA num determinado momento. • Na maioria dos procariontes, uma única RNA- polimerase transcreve todos os tipos de RNA. Nos eucariontes superiores três variadas RNA- polimerases transcrevem diferentes classes de RNA. • Podemos considerar a transcrição como ocorrendo em três estágios distintos: início, alongamento e término. • INÍCIO: As regiões do DNA que marcam o início da transcrição são chamadas PROMOTORES. Uma unidade dissociativa da RNA polimerase, o fator sigma, permite que a RNA polimerase reconheça e se ligue fortemente às regiões de promotores. • A enzima então desenrola o DNA e inicia a síntese de uma molécula de RNA. • ALONGAMENTO: • Logo após o início da transcrição, o fator sigma se dissocia da RNA polimerase. O RNA é sempre sintetizado no sentido 5’- 3’. • TÉRMINO: • A RNA polimerase também reconhece um sinal de término de cadeia. Em alguns casos, o reconhecimento é direto. Em outros, um auxílio de um fator protéico adicional, chamado rho, é necessário ao reconhecimento dos sinais de término. TRADUÇÃO OU SÍNTESE DE PROTEÍNAS • O RNA portador da informação é apropriadamente chamado RNA mensageiro (mRNA). Ele age como uma cópia da informação do DNA nuclear, enviada para orientar a síntese de proteínas no citoplasma. DIFERENTES CLASSES DE MOLÉCULAS DE RNA: • RNA transportador (RNAt) • RNA ribossômico (RNAr) • RNA mensageiro (RNAm) SÍNTESE DE PROTEÍNAS • É agora o momento da informação entre genes e proteínas mudar de linguagem usada. Ao ir do DNA para o RNA, a linguagem seqüência de nucleotídeo permaneceu a mesma. • Ao ir de RNA para proteína, a linguagem é mudada de uma seqüência de nucleotídeo para uma seqüência de aminoácidos. Esse processo é chamado Tradução. • INÍCIO: • Os aa são trazidos ao ribossomo por seu tRNA adequado. • A primeira etapa na incorporação de um aa em uma proteína envolve a ligação do aa a seu tRNA correto. • ATIVAÇÃO DO AA: • Cada um dos 20 tipos de aa tem que ser ativados antes de ligar ao seu tRNA Na ativação, uma enzima (aminoacil-tRNA-sintetase) catalisa a reação de um aa específico com adenosina-trifosfato (ATP), formando aminoacil-adenilato. Aminoacil-sintetase aa + ATP • O aminoacil-adenilato (aa-AMP) é referido como um aa ativado que agora pode reagir com o seu tRNA. • O aminoacil-adenilato é adicionado ao tRNA formando aminoacil-tRNA. • FORMAÇÃO DO COMPLEXO INICIADOR: • É formado pelo tRNA + N formil metionina + m RNA + subunidade menor do ribossomo • Para formar este complexo iniciador, precisa- se de 3 fatores de iniciação que são as proteínas IF1, IF2 e IF3 e pela guanosina trifosfato que irão unir o mRNA e o de transferência + N formil metionina à subunidade menor do ribossomo. • ALONGAMENTO: • Imediatamente após a subunidade maior se liga a subunidade menor e completa a montagem do 1º ribossomo, que ainda transporta o tRNA carregado com N formil metionina (1° aa ). • Logo após dá-se a entrada do 2º aa no sítio A do ribossomo. Com isso forma- se a ligação peptídica entre o aa do sítio A com o do sítio P feita pela peptidil- transferase. • Em seguida ocorre o deslocamento do ribossomo pelo mRNA no sentido 5’- 3’, liberando o tRNA do sítio P e transferido o que havia no A para o P. • Isso é chamado de TRANSLOCAÇÃO que é mediada por 2 fatores o G e o GTP: o G é o responsável pela translocação, ele desloca o tRNA vazio do sítio P para fora. A fonte de energia responsável por esta reação é o GTP. • TÉRMINO: As etapas acima continuam até que se encontrem um grupo de término. Os códons UAA,UAG,UGA são terminalizadores de síntese proteíca. Aí, o sítio aminoacil fica aberto, possibilitando a entrada de um proteína RF, ocorrendo da hidrólise do último tRNA e a dissociação das subunidades do ribossomo, liberando o m RNA. • As subunidades se dissociam e são capazes de repetir todo processo
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