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Análise de Leite Recife 2017 Disciplina: Bromatologia Profa.: Gilcelia Lino gilceliajanaina@gmail.com Introdução: Definição: Secreção de pH neutro (6,5 a 6,7) oriunda da glândula mamária de mamíferos. Classificação do leite • Tipo A – sala de ordenha própria; ordenha mecânica; leite resfriado imediatamente após a obtenção; pasteurização e envaze na própria granja leiteira; Leite no comércio 12h após a ordenha. • Tipo B – sala de ordenha própria; ordenha mecânica; leite resfriado imediatamente após a obtenção; leite pasteurizado e envazado em usinas; leite no comércio 24 h após a ordenha. • Tipo C – não há necessidades de instalações especiais para ordenha (manual); refrigeração não é obrigatória imediatamente após a ordenha; leite armazenado em latões; pasteurizado em usina. Tratamento térmico • Pasteurização: Processo térmico largamente difundido e efetuado em condições padronizadas (tempo e temperatura) visando a destruição total de microrganismos patogênicos presentes, sem alterar a composição, o sabor e o valor nutritivo. • Lenta : 620C - 65°C por 30’ • Rápida: 750C por 15” • resfriamento imediato a menos de 100C Controle da pasteurização • controle : fosfatase(-) peroxidase (+) • Inativa a lipase prevenindo a rancidez em leite pasteurizado Esterilização • Comercial: • Sistema tradicional: 1250C por 4’ sob agitação das embalagens • ou (1150C por 15’) Processo UHT • Leite UHT: leite homogeneizado, submetido durante 2 a 4 segundos a uma temperatura entre 130°C e 150°C, mediante um processo térmico de fluxo contínuo, sendo imediatamente resfriado a temperatura inferior a 32°C, e envasado sob condições assépticas em embalagens estéreis e hermeticamente fechadas. Métodos de Análise Características organolépticas Cor: Branco-opaca (reflexão da luz pelos glóbulos de gordura, fosfato de cálcio e caseína). Corpo deve ser ligeiramente amarelada devido a carotenóides lipossolúveis. Sabor: levemente adocicado, dependendo dos teores de açúcar (lactose) e sal (NaCl) presentes. Aroma: típico, bastante suave e está relacionado com o teor de ácido cítrico na forma de citrato. Métodos de Análise • Acidez Acidez do leite é bastante variável (maior em leites com teores elevados de extrato seco desengordurado). A acidez titulável do leite varia de acordo com o teor de sais minerais, proteínas, vol. do indicador adicionado e com a tonalidade adotada com o ponto de viragem. A acidez inicial do leite ao sair do úbere é normalmente de 15 a 20°C Dornic ou 0,14 e 0,18 g de ácido láctico por 100mL de leite, é denominado acidez titulável inicial ou natural. Métodos de Análise • Aumento de acidez: desdobramento da lactose em ácidos, dos quais o mais importante é o láctico (provocado por multiplicação das bactérias do leite) - Acidez titulável adquirida. • Teste de acidez: é uma das determinações mais comuns utilizadas para avaliar a qualidade do leite e derivados, assim como no controle de processamento (elaboração de queijo e iogurte, etc.). Indica o estado de conservação do leite (a acidez tende a aumentar à medida que o leite está mais velho). Métodos de Análise Determinação da acidez em graus Dornic • Procedimento: Transfira, com auxílio de uma pipeta, 10 ml da amostra para um erlenmeyer de 50 ml. Adicione 2 gotas de indicado fenolftaleína. Titule com solução de NaOH 1/9 N até o aparecimento de uma coloração rósea. Cálculo V x 10 = acidez oD V = volume de NaOH 1/9 N gasto na titulação Métodos de Análise Determinação de pH- Pode ser uma medida direta e rápida de obtenção da acidez de leite e derivados. O leite recém- ordenhado apresenta reação levemente ácida (pH 6,5 a 6,7). acima de 6,7: indica possível infecção no úbere do animal (mastite); abaixo de 6,5: indica presença de colostro ou atividade microbiana (= formação de ácido láctico a partir da lactose). Métodos de Análise Estabilidade em Alizarol Procedimento: • Transfira, com auxílio de uma pipeta, 5 ml de leite para um tubo de ensaio. Adicione 5 gotas da solução de alizarol. coloração vermelho-tijolo ------------ leite normal coloração amarelada ------------------- leite com acidez alta coloração azulada ---------------------- leite alcalino Métodos de Análise Determinação de amido Procedimento: • Transferir, com uma pipeta graduada, 10 mL da amostra para um béquer; • Aquecer a amostra até ebulição em banho-maria fervente, mantendo o aquecimento por 5 min; • Resfrie em água corrente; • Adicionar 5 gotas de solução de Lugol (ou tintura de iodo); Métodos de Análise Determinação de amido - Em adulterações, a adição de amido serve para alterar a densidade do leite diluído, possibilitando a fraude. Nesta técnica o amido reage como iodo livre formando um composto de absorção de coloração azul. Métodos de Análise Teste de fosfatase Princípio: pela hidrólise de ésteres fosfóricos libera-se o fenol. Este condensa com 2,6 dicloroquinona cloroimida, resultando indofenol que em meio alcalino apresenta coloração azul. Baseia-se no fato de que, quando o processo de pasteurização for bem conduzido, inativa a enzima fosfatase do leite. O teste fosfatase positivo indica que houve falha na temperatura ou no tempo de tratamento térmico, ou então, mistura de leite cru com leite pasteurizado. Métodos de Análise Teste de peroxidase Princípio: ação da peroxidase sobre o peróxido de hidrogênio libera o oxigênio que transforma o gaiacol de sua forma leuco para sua forma corada. A peroxidase é uma enzima presente no leite que é destruída quando ocorre aquecimento acima de 75°C, por mais de 20 segundos. A pasteurização pode não destruir a peroxidase. Métodos de Análise Teste de peroxidase Procedimento: • Transfira 10 mL da amostra para um tubo de ensaio de 20 mL, aqueça em banho-maria a (43±2)•°C por 5 minutos. Na capela, adicione 2 mL da solução de guaiacol pelas paredes do tubo e 3 gotas de peróxido de hidrogênio. O desenvolvimento de uma coloração salmão indica peroxidase positiva. Métodos de Análise Conservantes • Substâncias presentes ilegalmente no leite para aumentar sua durabilidade. • Ex: formaldeído, ácido bórico e boratos, água oxigenada. Métodos de Análise Ácido bórico e boratos: Procedimento: • Meça 25 ml da amostra e transfira para uma cápsula de porcelana. Adicione 3 gotas de solução de NaOH 10%. Aqueça até carbonização e transfira o resíduo para um erlenmeyer. Adicione 1 ml de H2SO4 (D = 1,84). Aqueça em banho-maria por 10 minutos. Esfrie e adicione 10 ml de álcool metílico. Adapte, ao frasco, uma rolha atravessada por um tubo de vidro dobrado em ângulo reto. Aqueça o frasco e Inflame os vapores observando a coloração da chama. Reação positiva – coloração verde Métodos de Análise Água oxigenada Procedimento: • transferir 10mL de amostra para um tubo de ensaio graduado de 20mL. • Adicionar 2mL de uma solução de guaiacol a 1% e 2mL de leite cru. O aparecimento da cor salmão indicará presença de água oxigenada. Métodos de Análise Formaldeído Procedimento: • Transfira 50 mL da amostra para um frasco de destilação e adicione 80 mL de acido fosfórico a 20%. Destile cerca de 40 mL, recolhendo em frasco Erlenmeyer de 200 mL. Transfira 10 mL da amostra destilada para um tubo de ensaio, adicione 1 mL da solução de floroglucina a 1%, 2 mL de uma solução de hidróxido de sódio a 10% e agite. Em presença de formaldeído aparecerá uma coloração salmão.
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