Análise crítica de artigo (2018/1) - Nota máxima

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL 
FACULDADE DE FARMÁCIA 
DISCIPLINA DE PARASITOLOGIA BÁSICA 
 
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Cartões: 
 
ESTUDO E ANÁLISE CRÍTICA DO ARTIGO “VACINAS DE BLOQUEIO DE 
TRANSMISSÃO DA MALÁRIA: ENSAIOS E CANDIDATOS EM 
DESENVOLVIMENTO CLÍNICO” 
 
O artigo “Vacinas de bloqueio de transmissão da malária: ensaios e 
candidatos em desenvolvimento clínico”, originalmente intitulado “Transmission 
blocking malaria vaccines: Assays and candidates in clinical development” foi 
publicado em setembro de 2015 pelos autores R.W. Sauerwein e T. Bousema, do 
Departamento de Microbiologia Médica do Centro Médico da Universidade Radboud 
(Holanda). O estudo do artigo será apresentado a partir de um resumo de cada 
capítulo do artigo, exceto pelo Resumo que será transcrito para este trabalha na sua 
forma original. 
“Abstract 
Stimulated by recent advances in malaria control and increased funding, the 
elimination of malaria is now considered to be an attainable goal for an increasing 
number of malaria-endemic regions. This has boosted the interest in 
transmission-reducing interventions including vaccines that target sexual, sporogenic, 
and/or mosquito-stage antigens to interrupt malaria transmission (SSM-VIMT). 
SSM-VIMT aim to prevent human malaria infection in vaccinated communities by 
inhibiting parasite development within the mosquito after a blood meal taken from a 
gametocyte carrier. Only a handful of target antigens are in clinical development and 
progress has been slow over the years. Major stumbling blocks include (i) the 
expression of appropriately folded target proteins and their downstream purification, 
(ii) insufficient induction of sustained functional blocking antibody titers by candidate 
vaccines in humans, and (iii) validation of a number of (bio)-assays as correlate for 
 
blocking activity in the field. Here we discuss clinical manufacturing and testing of 
current SSM-VIMT candidates and the latest bio-assay development for clinical 
evaluation. New testing strategies are discussed that may accelerate the evaluation 
and application of SSM-VIMT.” 
 
● INTRODUÇÃO 
O Relatório Mundial da Malária em 2014 documentou um progresso 
considerável na redução dos casos de malária (causado pelo parasita do gênero 
Plasmodium​ ) em vários países. Na África Subsaariana, por exemplo, a prevalência 
média de infecções em crianças entre 2 e 10 anos diminuiu 48% desde 2000, com 
uma percentagem próxima de diminuição de mortalidade atribuída à malária. Em 
combinação com o tratamento e a prevenção da malária, as formas de transmissão 
da doença é uma das bases para o controle e sua erradicação, sendo que uma 
vacina que impeça a transmissão do ser humano para o mosquito teria o potencial 
crítico para este cenário, por diminuir a propagação da doença em humanos por 
impedir a infecção de mosquitos ​Anopheles​ , cujas fêmeas transmitem o parasito por 
serem hematófragas. Tradicionalmente se tem considerado antígenos apenas para o 
ciclo sexual e esporogônico, porém recentemente tem se estudado vacinas 
pré-eritrocitária pela potencialidade de poderem impedir a parasitemia pela geração 
de gametócitos e transmissão posterior. As vacinas pré-eritrocitárias, além de 
prevenir a transmissão de mais pessoas, tem a vantagem de serem uma proteção 
individual direta, enquanto que as vacinas que impedem o ciclo sexual esporogônico 
do mosquito apenas conferem defesa pessoal. 
Na década de 50 já houveram experimentos que mostraram que a imunização 
de galinhas com uma mistura de parasitas no ciclo sexual e assexual da espécie 
Plasmodium gallinaceum​ bloqueia a infectividade do parasita. Vinte anos depois 
apareceram antibióticos contra antígenos do ciclo sexual foi responsável e que 
agiam após a ingestão dos mosquitos. Os anticorpos podem destruir os gametas e 
zigotos até depois de várias horas que o mosquito se alimenta e pode prevenir 
completamente a infectividade para os mosquitos. Estudos que se seguiram desde 
1950 resultaram em um ensaio padrão de alimentação por membrana (SMFA, do 
inglês “standard membrane-feeding assay”) e a partir disso várias proteínas do ciclo 
 
sexual foram escolhidas como alvo para criação de anticorpos de bloqueio de 
transmissão. Os genes que codificam Pfs48/45, Pfs230 e Pfs25 foram escolhidas do 
Plasmodium falciparum​ e o ortólogo Pvs25 ​Plasmodium vivax​ . Estes genes foram 
isolados e estas proteínas já estão sendo utilizadas como alvo há três décadas. 
Muitos debates surgiram por conta da grande importância do combate da Malária e 
alguns desafios principais foram definidos: estrutura inadequada ou incompleta das 
proteínas da vacina como um produto para uso terapêutico; falta de um ensaio 
padrão e validado para eficácia clínica; inexistência de novas drogas para ensaios 
clínicos na fase I e fase II. 
No artigo serão discutidos os últimos progressos em vacinas contra a malária, 
os avanços nos estudos biológicos e sugestões de ações para o futuro. 
 
● CANDIDATOS SSM-VIMT NO DESENVOLVIMENTO CLÍNICO 
SSM-VIT são as vacinas que visam interromper a transmissão da malária 
(​VIMT) tendo como alvo os antígenos dos ciclos sexuais, esporogênicos e/ou estágio 
dentro do mosquito (SSM). A imunidade para bloquear a transmissão depende de 
anticorpos funcionais contra as proteínas da superfície de membrana formadas 
durante o ciclo sexual ou esporogênico ou antígenos para o intestino do mosquito, 
local onde os gametas dos parasitas responsáveis pela malária são fertilizados, 
embora a pré-fertilização aconteça nos eritrócitos humanos. Alguns antígenos 
podem se ligar aos gametas formados, impedindo a fertilização e a formação de 
zigoto. Os antígenos expressados na pré-fertilização podem induzir anticorpos a 
partir de uma infecção natural e portanto criando a possibilidade de aumentar o 
reconhecimento dos anticorpos induzidos pela vacina e sua longevidade. Como os 
zigotos não são formados no corpo humano, não há anticorpos relacionados a 
fertilização do ​Plasmodium ssp​ . Embora alguns alvos substanciais tenham sido 
identificados e testados através de ensaios pré-clínicos através dos anos, os 
principais candidatos continuam sendo as proteínas Pfs48/45 e Pfs230 (da 
pré-fertilização) e o antígeno da pós-fertilização Pfs25. As proteínas recombinantes 
do Pfs25 foram geradas com sucesso para as espécies P. falciparum and P. vivax. 
Os alvos derivados de mosquito foram identificados como sendo envolvidos na saída 
 
do ciclo do oocisto do intestino do mosquito representado pelo AnAPN1, formando o 
ínicio para SSM-VIT. 
 
● Pfs48\45 
45Pfs48 / 45 é expresso em gametócitos, uma vez que o parasita perde a 
diferenciação sexual no hospedeiro humano e desempenha um papel crítico na 
fertilidade dos gametas masculinos.Pfs48 / 45 é um membro de uma família proteica 
definida por um padrão de ligação dissulfureto de seis resíduos conservadosde 
cisteína e glicosilfosfatidilinositol (GPI) ancorados na membrana. O alvo mais eficaz 
para a transmissão de anticorpos bloqueadores é o epítopo I, enquanto os 
anticorpos contra os epitopos II e III são menos potentes, mas apresentam 
funcionalidade complementar na supressão da infectividade aos mosquitos. Embora 
o SSM-VIMT tenha sido estabelecido desde que o gene foi clonado em 1993, o 
Pfs48 / 45 provou ser um alvo difícil para a produção de confórmeros apropriados 
em múltiplos sistemas de expressão heteróloga. Um progresso significativo foi feito 
com a produção do fragmento de 10-C, contendo 10 cisteínas (resíduo 159-428) em 
fusão com a Proteína de Ligação a Maltose em Escherichia coli. Enquanto gerando 
conformadores apropriados e induzindo anticorpos bloqueadores de transmissão em 
camundongos, o rendimento permaneceu baixo após purificação. Estes desafios 
foram parcialmente superados por um fragmento funcionalmente dobrado de Pfs48 / 
45 (10C) como uma estrutura de antígeno quimérico fundido com uma seção de 
GLURP (GLURP.RO) em Lactococcus lactis. R0.10C purificado induziu anticorpos 
funcionais em ratos mostrando forte atividade bloqueadora de transmissão. Uma 
produção compatível com o processo de fabricação moderna (cGMP) totalmente 
atual e o processo de purificação a jusante do R0-10C foi estabelecida em escala 
industrial em colaboração com a Gennova Biopharmaceuticals (Índia) (Sauerwein, 
inédito). As condições de formulação são atualmente otimizadas na preparação para 
testes clínicos. 
 
● Pfs230 
A produção de Pfs230 começa em estágios de gametócitos imaturos como 
uma proteína precursora de 363 kD de 70 resíduos de cisteína, que é 
 
subseqüentemente processada em fragmentos de 300 e 307 kDa. Na ausência 
aparente de uma âncora GPI, esses fragmentos são complexos instáveis ​​expressos 
com Pfs48 / 45 na membrana parasita de gametócitos. Uma vez que estas formas 
parasitas são ativadas e transformadas em gâmetas, o Pfs230 é prontamente 
acessível na membrana para ligação a anticorpos específicos. A funcionalidade dos 
Mabs anti-Pfs230 depende dos isotipos de fixação do complemento. Um estudo de 
Read et al. demonstraram que os Mabs do isotipo de fixação adjunta preveniram a 
infectividade dos mosquitos ​P. falciparum na presença de complemento, enquanto 
nenhum dos Mabs testados de isotipos de fixação não complementares teve efeitos 
redutores da transmissão. Devido à sua complexidade, a expressão recombinante 
de Pfs230 de comprimento total nunca foi alcançada. Uma porção purificada do 
domínio Pfs230C, 230CMB, (resíduo 444 a 730) expressa em um sistema de 
expressão baseado em plantas induziu atividade bloqueadora completa na presença 
de complemento em coelhos, qualificando-se como potencial vacina SSM-VIMT e 
candidata para desenvolvimento clínico. 
 
● Pfs25 
Pfs25 tem estado na liderança desde 1983, quando específicos e potentes 
Mabs mostraram bloquear a transmissão. A proteína é eliminada da membrana e 
provavelmente envolvida na adesão do ookinete e subsequente penetrada no 
intestino. A potente atividade bloqueadora da transmissão de um painel de Mabs que 
reconhecem epitopos (lineares e conformacionais) impulsionou muito o 
desenvolvimento de vacinas subunitárias. A Pfs 25 recombinante, tem sido a única 
SSM- VIMTs testada em ensaios clínicos, primeiro como TBV25H que mais tarde se 
tornou Pfs25H. O primeiro ensaio humano de fase 1 ocorreu em 1994 com ​P. 
falciparum TBV25H absorvido a Alum, onde 1/8 dos voluntários experimentaram 
uma reação de hipersensibilidade. Os resultados de anticorpos foram baixos e 
consequentemente os resultados foram insatisfatórios na SMFA (Kaslow, não 
publicado). Em um segundo experimento, o TBV25H / alume foi usado para 
aumentar a carga induzida pelo multi-antígeno viral viral NYVAC-Pf7 que incluiu 
Pfs25, resultando em pelo menos 75% de reduções de oocistos na SMFA em 3/9 
dos voluntários. Muitas modificações foram empregadas para superar os problemas 
 
relacionados à homogeneidade e integridade conformacional de Pfs25H. Para 
aumentar a potência, foi explorada uma plataforma adjuvante diferente, resultando 
num ensaio clínico utilizando Montanide ISA 51 em vez de Alum. 
No entanto, este estudo teve que ser interrompido devido à ocorrência de 
reações de eritema nodoso provavelmente relacionadas a essa combinação 
específica de antígeno e, possivelmente, também ao caso das reações transitórias 
leucemóides observadas. Os soros de voluntários que ingeriram duas doses 
programadas de Pfs25 / ISA51 mostraram atividade funcional em testes de 
alimentação de mosquitos. O primeiro ensaio clínico de vacina bloqueadora de 
transmissão do P.vivax usando o recombinante Pvs25 formulado com Alhydrogel 
também induziu níveis muito baixos de anticorpos bloqueadores funcionais e 
reduções de oocistos> 75% não foram obtidas. O principal desafio para o SSM-VIMT 
baseado em Pfs25 parece a condicional inducional de altos títulos sustentados de 
anticorpos. As concentrações exatas de anti-Pfs25 abs no soro humano necessárias 
para> 75% de redução de oocistos não são conhecidas, mas provavelmente são 
maiores que 100 g / ml [10]; em contraste, 15-50 g / ml de Pfs25 Mab 32F81 é 
suficiente para um bloqueio quase completo em testes de alimentação de animais de 
laboratório e de campo. Mais recentemente, algumas dessas limitações podem ter 
sido tratadas com sucesso. A potente atividade bloqueadora de transmissão foi 
obtida em estudos pré-clínicos de imunização usando Pfs25 harmonizado com 
codon purificado expresso em E. coli, com Pfs25 produzido em cloroplastos de 
algas, com Pfs25 inChad63/vírus vacinal modificado, com nanopartículas 
Pfs25-IMX313 em Pichia pastoris ou com Pfs25 fundidas a um transportador de 
liquenase modificado (LicKM) em plantas de Nicotiana benthami-ana. Outra 
abordagem promissora para aumentar a imunogenicidade de Pfs25 é a conjugação 
com proteínas transportadoras com alta imunogenicidade conhecida, como por 
exemplo, o complexo protéico de membrana externa (OMPC) de Pseudomonas 
aeruginosa. O grupo do NIAID que foi pioneiro nessa abordagem com os cientistas 
da Merck subsequentemente transferiu a vacina conjugada de proteína Pfs25 para a 
clínica. A fase 1 de testes em humanos de Pfs25, que está sendo avançada pelo 
grupo NIAID em colaboração com a Universidade de Bakamo no Mali, é 
quimicamente conjugada com​ E. coli ​ expressa por ExoPro-teina A (EPA). 
 
 
● Antígeno de mosquito AnAPN1 
O antivetor SSM-VIMT pode inibir o desenvolvimento de parasitas induzindo 
anticorpos no intestino do mosquito. A aminopeptidase Anofelina Alanyl N (AnAPN1) 
é isolada da borda da escova apical nas microvilosidades dos intestinos de 
Anopheles gambiae. A presença de um indutor de anticorpos n bloqueantes 
imunodominantes que atrasou o desenvolvimento clínico de AnAPN1. Um guiabaseado na estrutura cristalina do APN1 foi expresso em ​E. coli​ e está em estudo. 
· 
● PARÂMETROS BIOLÓGICOS DO MUS-VIMT 
O bloqueio da atividade funcional depende de anticorpos antígenos da 
membrana da superfície alvo em estágios sexuais/ estágios esporogônicos ou alvos 
do intestino do mosquito. Outros aspectos não foram totalmente determinados além 
da especificidade, como a qualidade e a concentração de anticorpos, por exemplo, a 
capacidade de mediar a opsonização ou fixar o complemento. 
 
● O ensaio padrão de alimentação de membrana 
A escolha inicial e priorização dos candidatos de SSM-VIMT é feita por ensaios 
funcionais que é a via crítica de eficácia dos testes, e testes de anticorpos que 
impedem infecção de mosquitos. O ensaio padrão de alimentação de membrana 
(SMFA) é o mais utilizado para determinar a funcionalidade de anticorpos 
bloqueadores da transmissão; gametócitos cultivados in vitro são misturados com 
soro ou anticorpos purificados e alimentados através de alimentadores de membrana 
para laboratório. Os resultados da SMFA são a carga de infecção (densidade de 
oocistos) e a proporção de mosquitos infectados (prevalência de oocistos) em 
mosquitos que antes não estavam infectados. Os resultados são determinados por 
exame em microscópio do intestino do mosquito, por detecção de DNA do parasito 
por métodos moleculares, ou ainda detecção de proteínas do parasita por 
imunoensaios. Têm sido propostas fluorescência e abordagens de SMFA baseadas 
na luminescência pois a atividade da luciferase no SMFA está relacionado com a 
densidade e prevalência do oocisto. Porém, altas densidades na SMFA e densidade 
de oocisto relacionadas não são aspectos de infecções naturais. Por este motivo os 
 
resultados de SMFA dificilmente conseguem ser relacionados com a transmissão de 
malária na região. Para reduzir a transmissão da malária na população vacinada 
com SSM-VIMT, ela terá que reduzir a prevalência de oocistos, não apenas sua 
densidade na alimentação de mosquitos. Isto porque mosquitos com apenas um 
oocisto produzirão esporozoítos que podem ser infecciosos. Então, reduzir a 
densidade de oocisto pode não exercer mudança, a menos que também aconteça a 
redução de oocistos nos mosquitos. A prevalência e a densidade estão 
positivamente associadas experimentalmente, redução na densidade é necessária 
para obter taxas de prevalência. Assim, é necessário um número grande de 
mosquitos para chegar a estimativas precisas. A SMFA pode ser adaptada para 
fazer uma escala de prevalência mais real diluindo o gametócito para que <50% dos 
mosquitos estejam infectados e usando avaliações de estado de infecção 
escalonáveis do mosquito, tal como o SMFA baseado em luciferase. 
Uma SMFA para reduzir a densidade de oocisto é justificável desde que apresente 
medidas na densidade e na escala de prevalência. Para os candidatos que forem 
selecionados do SSM-VIMT, é importante testar sua eficácia contra uma variedade 
de diferentes densidades de oocistos de mosquitos controle para eficácia biológica 
que é mais relacionada com a realidade da saúde pública, ou seja, reduzir a chance 
de transmissão de um ser humano para um mosquito. 
 
● Ensaios imunológicos 
Concentrações de anticorpos contra candidatos a vacinas recombinantes são 
mensuradas por imunossorvente convencional ligado a enzimas de ensaio (ELISA) e 
demonstraram associar-se ao desfecho SMFA para anti-Pfs25, Pvs25, Pfs20, 
Pfs48/45 anticorpos. Para antígenos pré-fertilização, a capacidade dos soros de 
reconhecer a forma nativa de proteínas pode ainda ser testada por ELISA onde o 
extrato de gametócito é usado para revestimento, ou por ensaios de 
imunoflourescência semiquantitativa que utilizam gametas extracelulares (IFA) ou 
gametas intactos vivos em suspensão (SIFA). A quantificação foi melhorada 
recentemente usando luminescência em vez da fluorescência como leitura. 
 
 
 
 
● IMPACTO NA SAÚDE PÚBLICA DO MUS-VIMT 
A eficácia da vacina MTS-VIMTs na saúde pública foi recentemente debatida. 
Entre os parâmetros analisados, abordaram-se os aspectos da redução de 
incidência de infecções em todas as áreas endêmicas, como também a capacidade 
de acelerar a eliminação em ambientes de baixa endemia (por exemplo, EIR <8 
infecciosas mordidas / ano ou uma incidência de infecção abaixo de 0,2 / pessoa / 
ano). Em vista disso, foi estabelecido como alta eficácia em parâmetros biológicos, 
≥80% de redução no oocisto intensidade no intestino do mosquito. Tendo isso em 
vista, foi feito um desenvolvimento clínico para lançar uma vacina multi antígeno cuja 
finalidade é garantir alta cobertura em toda a população humana; usando um modelo 
de transmissão populacional com roedores e mosquitos Anopheles stephensi que 
possuem o ​Plasmodium berghei para determinar o impacto de intervenções de 
bloqueio de transmissões são longos de múltiplos ciclos de transmissão em 
diferentes populações com prevalências parasitárias que refletem diferentes níveis 
de transmissão intensidade. Este modelo mostra que a eficácia do MES-VIMT 
depende fortemente a intensidade de transmissão local. 
 
● DESFECHOS BIOLÓGICOS DE ENSAIOS CLÍNICOS EM ESTUDOS 
DE CONFIGURAÇÕES NÃO ENDÊMICAS 
● Ensaios imunológicos e de alimentação de mosquitos em ensaios de fase I. 
Os soros de indivíduos vacinados podem ser testados quanto à 
imunogenicidade, mas também para eficácia na SMFA e na membrana direta 
ensaios de alimentação (DMFA). No procedimento DMFA, o sangue venoso 
portadores de gametócitos naturalmente infectados são usados ​​como fonte de 
gametócitos e ofereceram mosquitos criado localmente em uma membrana sistema 
alimentador semelhante ao utilizado para o SMFA. Essa abordagem foi feita no 
ensaio clínico de Fase 1 com Pfs25, efetuando o de bloqueio da atividade de 
transmissão em uma minoria de vacinados, conforme detectado pela SMFA. O soro 
da amostra foi testado adicionalmente no DMFA por meio do isolamento de 
gametócitos e colônias de mosquitos do Burkina Faso e da Tailândia. Estes 
Experimentos DMFA confirmaram o potencial de bloqueio da transmissão vacinação 
 
contra uma gama de organismos geneticamente complexos, que circulam 
naturalmente na linhagens dos parasitas em estudo. 
 
● ENDEREÇOS BIOLÓGICOS E DE SAÚDE PÚBLICA DOS ENSAIOS 
EM CONFIGURAÇÕES ENDÊMICAS 
● Immunological and mosquito feeding assays 
As Fases 1 e 2 estudos, visam quantificar diretamente o potencial de 
transmissão de gametocitêmicos vacinados. Por conseguinte, a fase 2 estudos 
possui como ênfase o contexto endêmico, efetuando um ensaio randomizado em 
que indivíduos vacinados e não vacinados são comparados quanto à segurança, 
imunogenicidade e eficácia biológica vacinação. Dessa forma, são utilizados (além 
do SMFA e DMFA, o Direct Feedings Assay) mosquitos não infectados criados por 
laboratório da DFA .Estes alimentam-se diretamente da pele de portadores de 
gametócitos. Em decorrênciadesses estudos, foram estabelecidos parâmetros 
biológicos da Fase ensaios clínicos em endemias permitiram a determinação: da 
concentração e dinâmica de anticorpos; da dinâmica de atividade de bloqueio da 
transmissão funcional na SMFA com gametócitos cultivados; a atividade dinâmica de 
bloqueio da transmissão funcional no DMFA com doadores de gametócitos 
naturalmente infectados; de subgrupos de vacinados que se tornaram 
gametocitêmicos, a atividade de bloqueio da transmissão funcional pode ser 
avaliada por DMFA e DFA com gametócitos naturalmente adquiridos do vacinado. 
Para adquirir uma vacina totalmente eficaz. 
 
● Ensaios randomizados em grupo para pontos de extremidade de saúde 
pública. 
Atualmente, não há acordo sobre se os parâmetros substitutos das medidas 
de transmissão seriam satisfatórios para a aprovação acelerada, especialmente se a 
eficácia da vacina estiver abaixo do ideal. Duas deficiências relevantes dos 
resultados de infecção por mosquito são que eles não quantificam o efeito do 
SSM-VIMT em gerações repetidas, subestimando assim a eficácia na redução de 
infecções incidentes, e a associação pouco parametrizada entre reduções na 
probabilidade de um mosquito ser infectado e o nível de exposição à malária 
 
experimentado por uma comunidade. A abordagem convencional inclui ensaios de 
Fase 1 e Fase 2, seguidos por um ensaio de Fase 3 baseado em população em 
grande escala. Este ensaio de Fase 3 envolve um desenho randomizado por 
conglomerados e medidas de resultados baseados na incidência de infecção 
detectada por PCR, com pontos finais clínicos e avaliações de segurança como 
o​bjetivos secundários. O poder e o tamanho da amostra dependem fortemente das 
configurações escolhidas e suas características em termos de intensidade de 
transmissão, estabilidade da transmissão, outras intervenções de malária, 
homogeneidade de transmissão entre grupos e migração de indivíduos não 
vacinados para áreas de intervenção. 
 
● PERSPECTIVAS E CONCLUSÕES 
Estimulada pelos recentes avanços no controle da malária e o aumento do 
financiamento na área, a eliminação da malária é agora considerada como um 
objetivo atingível para o número crescente de regiões endêmicas da malária. Apesar 
do progresso muito lento nas últimas décadas, o primeiro ensaio clínico com 
Pfs25-EPA está sendo realizado em ambientes endêmicos e, independentemente do 
resultado de eficácia deste estudo, levará a um progresso considerável no 
conhecimento sobre como conduzir e avaliar os ensaios clínicos com SSM-VIMT. 
Uma alternativa que nunca foi totalmente explorada é a imunização passiva com 
anticorpos monoclonais bloqueadores da transmissão para prevenir a transmissão 
da malária. Os anticorpos monoclonais mais potentes apresentam atividade 
bloqueadora completa em microgramas por mililitro e alcançar concentrações de 
bloqueio em humanos pode ser viável. Tal abordagem poderia servir como uma 
prova geral de princípio para o SSM-TBV em ambientes endêmicos e também pode 
ser útil como uma intervenção em circunstâncias específicas, como epidemias de 
malária. 
Os ensaios para avaliar a eficácia biológica do SSM-VIMT têm sido 
investigados nos últimos anos, levando a uma melhor parametrização de diferentes 
testes de alimentação, sistemas de maior rendimento, uma variedade de 
ferramentas qualitativas e quantitativas para detecção de infecção e abordagens 
 
analíticas mais robustas. É importante ressaltar que houve um investimento 
oportuno na discussão do caminho do desenvolvimento do SSM-VIMT, desde 
estudos pré-clínicos até estudos populacionais. Além de ensaios com gametócitos 
cultivados ou gametócitos naturalmente adquiridos, é concebível induzir 
gametocitemia no modelo de Infecção por Malária Humana Controlada . Este modelo 
demonstrou ser uma ferramenta poderosa para avaliação de fármacos antimaláricos, 
estágios sanguíneos e candidatos a vacinas pré-eritrocitárias. A evidência inicial 
para a indução de gametócitos após o CHMI foi fornecida quando o mRNA da Pfs16, 
que é uma das proteínas expressas mais precocemente gametócito, foi detectado 
48h após a primeira detecção na circulação sanguínea do rRNA 18s de parasitas 
assexuados. Os desafios do estágio de sangue em voluntários mais recentemente 
forneceram evidências de que gametócitos maduros, detectados por microscopia e 
mRNA de Pfs25, podem ser induzidos após o tratamento medicamentoso (McCarthy, 
64ª Reunião Anual da Sociedade Americana de Medicina Tropical e Higiene, Nova 
Orleans 2014). Se esses gametócitos forem encontrados em concentrações 
suficientemente altas para infectar os mosquitos, isso abrirá o caminho para o uso 
de estudos de transmissão CHMI como parte da via de desenvolvimento para o 
desenvolvimento do MES-VIMT. 
Devido à natureza da atividade do SSM-VIMT e à evolução da epidemiologia 
da malária em muitos ambientes africanos e não africanos, os ensaios aleatorizados 
por grupo para o SSM-VIMT estarão entre os ensaios de intervenção mais 
desafiantes em termos de implicação em termos de implementação e 
monitoramento. Uma cuidadosa consideração de um projeto ideal de ensaios 
clínicos anteriores, em relação a um caso de aprovação acelerada, permanece de 
grande importância. 
 
 
 
 
 
 
ANÁLISE CRÍTICA 
De acordo a OMS (2016), a malária causa 400 mil mortes por ano, das quais 
80% a 90% acontecem na África. Globalmente falando, crianças menores de 5 anos 
representam 70% de todos os óbitos. Estes dados, junto com informações do artigo, 
reforçam a importância e a necessidade de uma vacina para a doença de modo a 
erradicá-la. Uma vacina que impeça a transmissão da malária do ser humano para o 
mosquito parece realmente muito promissor para seu controle e é possível que logo 
tenhamos uma vacina disponível para a população (já existe a Mosquirix ou RTSS 
porém não é recomendada ainda pela OMS). 
Em relação a metodologia aplicada para determinar à proteína mais eficaz 
para produção da vacina, ela demonstra uma técnica com excelente qualidade; 
entretanto, ausentaram descrições referentes aos procedimentos empregados, 
como: explicitações das proteínas marcadas e descrição completa do 
procedimento. A falta destes dados não afetaram a compreensão do artigo. Embora, 
o referente artigo não possui como foco as descrições dos ensaios, seria 
interessante detalhamento, visto que possibilitaria aos profissionais da área da 
saúde maior compreensão, visando futuramente em caso de êxito que esta vacina 
seja reproduzida em escala mundial. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
LINK DO ARTIGO: 
file:///C:/Users/Usuario/Downloads/artigo%202%20-%20mal%C3%A1ria%20(1).pdf