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UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE CENTRO DE EDUCAÇÃO E SAÚDE UNIDADE ACADÊMICA DE SAÚDE AULA PRÁTICA INTRODUTÓRIA Prof. Fillipe de Oliveira Pereira Com o objetivo de auxiliar a compreensão dos conteúdos teóricos abordados na disciplina e preparar melhor os estudantes para as atividades de laboratório que ocorrerão durante o curso, as aulas práticas das disciplinas de bioquímica abordarão os conceitos básicos de trabalho em laboratório, vidrarias e equipamentos mais utilizados, bem como o preparo de soluções e reagentes para as análises bioquímicas. 1. Conduta no laboratório e equipamentos de segurança A palavra laboratório vem da união de 2 palavras do latim: labor = trabalho e oratorium = lugar de reflexão. Assim, o laboratório é um lugar de trabalho e concentração. Mantenha o telefone desligado. Usar calçados simples, fechados e pouco escorregadios. É preferível o uso de calças compridas. Cabelos devem ser mantidos presos. Nunca leve as mãos aos olhos e lave-as ao final da aula. É vetada a colocação de qualquer tipo de alimentação. Avental ou jaleco → é de uso obrigatório em todas as aulas, devendo ser de manga comprida. Luvas → é de uso obrigatório para a manipulação de vidrarias e reagentes durante as aulas. Mantenha as bancadas limpas e livres de materiais que não sejam úteis para o experimento. Não trocar as tampas dos fracos nem as pipetas ou outra vidraria. 2. Materiais de uso frequente Pisseta Tubos de ensaio Estante para tubos de ensaio Béquer Funil Erlenmeyer Bastão de vidro Frasco de reativo Espátula Proveta Pipeta graduada Pipeta automática Balão volumétrico 3. Equipamentos de uso frequente Balança pHmetro Espectrofotômetro Estufa Banho-maria Agitador de tubos 4. Soluções O preparo de soluções é um processo rotineiro em laboratórios. As soluções são misturas homogêneas constituídas de duas ou mais substâncias em determinada quantidade de solvente, onde o soluto é a substância em menor quantidade e o solvente é aquele em maior quantidade. O termo concentração é a quantidade de soluto que se encontra dissolvida em determinada quantidade de solvente, sendo expressa mais comumente em percentagem. Preparo de soluções em percentual → relação entre peso de soluto em 100g de solução final. Ex.: 25% (p/p) = 25 g de soluto + 75 g de solvente. Ex.: 25% (p/v) = 25 g de soluto em 100 mL de volume final. Ex.: 25% (v/v) = 25 mL de soluto em 100 mL de volume final. Preparo de soluções a partir de solutos sólidos → massa do soluto com o volume da solução Ex.: preparar 2 mL de uma solução de 10 g/mL C = massa/volume → Massa = C x volume → Massa = 10g/mL x 2 mL → Massa = 20 g Pesar 20 g e dissolver em 2 mL de volume final. Preparo de diluições a partir de diluições → C1V1 = C2V2 Ex.: Preparar 10 Ml de uma solução de NaOH a 15% a partir de uma outra solução a 40%. C1V1 = C2V2 → 40% x V1 = 15% x 10 mL → V1 = 150/40 = 3,75 mL 5. Procedimento Grupo 1 = preparar 10 mL de uma solução de leite desnatado a 5% (p/v). Grupo 2 = preparar 15 mL de uma solução a 1% a partir de uma solução de leite desnatado a 5%. Grupo 3 = preparar 10 mL de uma solução de etanol a 70% (v/v). Considere etanol absoluto = 100% Grupo 4 = preparar 100 mL de uma solução de soro fisiológico. 6. Referências PETKOWICZ, C. L. O. et al. Bioquímica: aulas práticas. Curitiba: Editora UFPR, 2007. SANTOS, P. C. P.; BOCK, P. M. (org.) Manual prático de bioquímica. Porto Alegre: Sulina; Editora Universitária Metodista IPA, 2012.
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