Agentes Físicos

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CONTROLE DO CRESCIMENTO 
MICROBIANO POR AGENTES 
FÍSICOS 
 
 
OBJETIVOS 
 Estudar o efeito da temperatura, pH, pressão 
osmótica e radiações no controle do crescimento 
microbiano; 
 Reconhecer o papel dos diferentes agentes físicos 
no controle do crescimento microbiano, discutindo 
seus mecanismos de ação. 
PRESSÃO OSMÓTICA 
 
 Concentrações de sais – Plasmólise (retração da 
membrana) 
 Processo semelhante ao ressecamento 
 Bastante utilizado na conservação de alimentos. Ex: 
curar carnes (sal) e conservar frutas (açúcar) 
 Fungos-mais resistentes em crescer em baixas 
concentrações de água e em pressão osmótica elevada. 
METODOLOGIA 
 Efeito da pressão osmótica sobre o crescimento 
microbiano. 
 Staphylococcus aureus e Escherichia coli 
 Efeito da radiação UV sobre o crescimento 
microbiano. 
 Serratia marcescens 
 Efeito da temperatura sobre o crescimento 
microbiano. 
 Bacillus subtilis e Escherichia coli 
 Efeito do pH sobre o crescimento microbiano. 
 Saccharomyces cerevisiae e Escherichia coli 
 
 
CONTROLE DO CRESCIMENTO PELA 
PRESSÃO OSMÓTICA 
 Efeito da pressão osmótica sobre o crescimento 
microbiano. 
 Staphylococcus aureus e Escherichia coli 
 Em condições assépticas, retirar 0,1 mL da 
amostra das culturas microbianas e inocular em 
cada um dos tubos contendo caldo nutritivo com 
as seguintes concentrações de NaCl: 0, 5 e 10%. 
 Incubar a 35oC/ 48h. 
PROCEDIMENTO 
CONTROLE DO CRESCIMENTO POR 
RADIAÇÃO UV 
 Efeito da radiação UV sobre o crescimento microbiano. 
 Serratia marcescens 
 Preparar discos de papel de filtro como apresentado na pág. 
133; 
 Inocular assepticamente com ajuda de um swab as superfícies 
de 5 placas de Petri contendo ágar nutritivo com a cultura de 
Serratia crescida a ToC ambiente; 
 Fazer os seguintes tratamentos para as 5 placas: placa 1 (sem 
irradiação), placa 2 (irradiada por 3 min), placa 3 (coberta por 
um disco, irradiada por 1 min), placa 4 (coberta por um disco, 
irradiada por 3 min) e placa 5 (coberta por um disco, irradiada 
por 5 min). 
 Obs: durante a irradiação as placas devem permanecer 
descobertas, pela retirada de suas tampas. 
 Após irradiação retirar assepticamente os discos e descartá-los 
apropriadamente. 
 Incubar a ToC ambiente / 48h. 
 
PROCEDIMENTO 
CONTROLE DO CRESCIMENTO PELA 
TEMPERATURA 
 Efeito da temperatura: 
 Marcar devidamente os tubos a serem inoculados; 
 Em condições assépticas, retirar 0,1 mL da amostra 
das culturas microbianas (Bacillus subtillis e 
Escherichia coli) e inocular em cada um dos 5 tubos 
contendo caldo nutritivo. 
 Submeter a aquecimento (80°C) em diferentes 
tempos: 0, 10, 20, 30 e 40 minutos; 
 Após a marcação de cada tempo, imergir a cultura em 
banho de água gelada; 
 Fazer esse procedimento para os dois microrganismos; 
 Após o tratamento térmico, incubar todos os tubos em 
estufas a 35°C por 48 horas. 
PROCEDIMENTO 
CONTROLE DO CRESCIMENTO PELO PH 
 Efeito do pH sobre o crescimento microbiano. 
 Saccharomyces cerevisiae e Escherichia coli 
 O meio para a verificação do efeito do pH é o 
caldo nutritivo, adicionado de soluções tampões. 
 Em condições assépticas, retirar 0,1 mL da 
amostra das culturas microbianas e inocular em 
cada um dos tubos contendo caldo nutritivo 
ajustados com pHs 3, 7 e 9. 
 O procedimento deve ser feito para os dois 
microrganismos: Escherichia coli e 
Saccharomyces cerevisiae 
 Incubar todos os tubos em estufa a 35°C por 48 
horas. 
 
PROCEDIMENTO 
RESULTADOS 
 Efeito da pressão osmótica sobre o crescimento 
microbiano. 
 
Micro-organismos Crescimento em NaCl (%) 
0 5 10 
Staphylococcus 
aureus 
 
Escherichia coli 
RESULTADOS 
 Efeito da radiação UV sobre o crescimento 
microbiano. 
 Observar em que regiões das placas houve 
crescimento e se mudou o padrão de produção de 
pigmentação. 
 
RESULTADOS 
 Efeito da temperatura sobre o crescimento 
microbiano. 
 
Micro-
organismos 
Aspecto do crescimento / tempo de exposição a 
80oC (min) 
0 10 20 30 40 
Bacillus 
subtilis 
Escherichia 
coli 
RESULTADOS 
 Efeito do pH sobre o crescimento microbiano. 
 
Micro-organismos Aspecto do crescimento / pH 
3 7 9 
Saccharomyces 
cerevisiae 
Escherichia coli