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16/09/2013 1 FACULDADE ESTÁCIO-SEAMA Bactérias 1) Definição As bactérias são organismos unicelulares, procarióticos, que podem ser encontrados na forma isolada ou em colônias e pertencente ao reino Monera. São microorganismos sem núcleo celular verdadeiro e possuem como única organela o ribossomo. 2) Características Gerais • As bactérias apresentam um único cromossomo circular disperso no citoplasma. • O DNA bacteriano não está associado a proteínas histonas. • Além do cromossômico único circular, as bactérias apresentam pequenos filamentos duplos de DNA circular denominados plasmídeos. • Algumas bactérias possuem parede celular constituída de peptideoglicano. • Podem formar esporos de resistência denominados endósporos. • Podem apresentar um ou mais flagelos, mas estes não são formados por centríolos. 1) Morfologia geral das bactérias Estrutura da célula bacteriana Coco Diplococo Estreptococo Estafilococos (cacho de uva) Bacilo Vibrião Sarcina (Cubo com oito células) Espirilo Estreptobacilo Espiroqueta 1) Morfologia geral das bactérias Estrutura da célula bacteriana Streptococcus sp. Streptococcus sp. Staphylococcus sp. Staphylococcus sp. Neisseria sp. Sarcina sp. Treponema sp. Bacillus sp. Vibrio cholerae Caulobacter sp. 16/09/2013 2 Fímbrias Cápsula Parede celular Plasmídeos DNA associado ao mesossomo Nucleóide Flagelo Enzimas relacionadas com a respiração, ligadas à face interna da membrana plasmática Mesossomo Citoplasma Ribossomos Membrana plasmática 1) Morfologia geral das bactérias Estruturas celulares • Morfologia geral das bactérias - (cápsula) A cápsula é formada pelo glicocálice, o qual consiste em uma substância polissacarídica produzida no citoplasma e secretados para a superfície celular. Funções da cápsula: 1. Impedir que a célula seja fagocitada por células de defesa. 2. Promover a adesão das bactérias em diferentes substratos (dentes humanos, trato respiratório, mucosa intestinal, etc.) 3. Proteger as bactérias contra desidratação e choques mecânicos. cápsula 16/09/2013 3 • Morfologia geral das bactérias - (Fímbrias) Fímbrias são apêndices que se estendem da membrana plasmática passando pela parede celular e cápsula emergindo para o meio externo. As fímbrias podem ocorrer em toda a superfície da célula. Função das fímbrias: Fixar as bactérias ao substrato e em outras células. • Morfologia geral das bactérias - (Pili) Os Pili sexuais normalmente são mais longos que as fímbrias, havendo um ou dois por célula. Pilus vem do Latim, que significa pêlo, cabelo. Pili - Plural; Pilus - Singular. Funções dos pili: Responsável pela formação da ponte citoplasmática que permite a transferência de informação genética durante o processo de conjugação. Bactéria + Bactéria - Pili sexuais 16/09/2013 4 • Morfologia geral das bactérias - (Flagelos) Flagelos são organelas especiais de locomoção, constituídas por uma estrutura protéica denominada flagelina, formando longos filamentos delgados e ondulados de 3-12 m que partem do corpo da bactéria e se estendem externamente à parede celular. Um flagelo tem três partes: o corpo basal (estrutura composta por vários anéis que ancora o flagelo à membrana citoplasmática), uma estrutura curta em forma de gancho e um longo filamento helicoidal. O número de flagelos é bastante variável entre as bactérias. Os flagelos das bactérias não provém do centríolo como os flagelos de células eucariotas. • Morfologia geral das bactérias - (Flagelos) O método exato do movimento dos flagelos é desconhecido (contração das cadeias protéicas - movimento ondulatório; movimento rotatório a partir da extremidade fixa - gancho) e aparentemente a energia vem da degradação de ligações energéticas de fosfato. Em geral, a motilidade ocorre ao acaso embora, às vezes, esteja relacionado com quimiotaxia. As bactérias recebem denominações especiais de acordo com a distribuição dos flagelos: - atríquias (sem flagelo); - monotríquias (um flagelo em uma das extremidades); - anfitríquias (um flagelo em cada extremidade); - lofotríquias (tufos de flagelos em uma ou ambas as extremidades); - peritríquias (cercadas de flagelos). 16/09/2013 5 Classificação E. coli Morfologia geral das bactérias (Flagelos) Monotríquia Lofotríquia Anfitríquia Petríquia • Morfologia geral das bactérias - (Parede celular) Parede celular é um envoltório semi-rígido, o qual é alvo de muitos antibióticos, composto por por ácido diaminopimérico (DPA), ácido murâmico e ácido teicóico além de aminoácidos, carboidratos e lipídeos. Todos esses compostos estão reunidos para formar substâncias poliméricas complexas que por sua vez estruturam a parede. Uma macromolécula complexa denominada peptideoglicano (também chamada de mucopeptídeo ou mureína) forma a estrutura rígida da parede. Composição das peptidioglicanos: Polímero de carboidratos associados à proteínas. 16/09/2013 6 • Morfologia geral das bactérias - (Parede celular) As bactérias podem ser divididas em dois grandes grupos, segundo a composição química da parede celular: 1) Bactérias Gram-positivas 2) Bactérias Gram-negativas Coloração de Gram Christian Gram - 1884 PAREDE CELULAR - Gram-positivas • Morfologia geral das bactérias - (Parede celular) Gram-Positivas: possuem uma quantidade maior de peptideoglicano em sua parede celular, o que torna a parede dessas bactérias mais espessa e rígida do que a das bactérias Gram negativas. Composta de proteínas, lipídeos, peptideoglicano e ácidos teicóicos (cadeias de polifosfato com resíduos de ribitol e glicerol), essas bactérias são sensíveis à lisozima e sua parede constitui o local de ação de alguns antibióticos além de apresentar elementos básicos para identificação sorológica. 16/09/2013 7 PAREDE CELULAR - Gram-positivas • Morfologia geral das bactérias - (Parede celular) PAREDE CELULAR - Gram-negativas • Morfologia geral das bactérias - (Parede celular) Gram-Negativas: a parede celular dessas bactérias é menos espessa e elas são mais complexas do que as Gram-positivas por apresentarem uma membrana externa cobrindo a fina camada de peptideoglicano. A membrana externa é o que distingue as bactérias Gram-negativas, servindo como uma barreira seletiva para a entrada e saída de algumas substâncias da célula e podendo ainda causar efeitos tóxicos sérios em animais infectados. A estrutura da membrana externa é composta por fosfolipídios, lipoproteínas e lipopolissacarídeos (LPSs). Os lipopolissacarídeos estão localizados exclusivamente na camada externa da membrana, enquanto que os fosfolipídeos estão presentes quase completamente na camada interna. 16/09/2013 8 PAREDE CELULAR - Gram-negativas • Morfologia geral das bactérias - (Parede celular) Os LPSs são compostos por três segmentos ligados covalentemente: (1) lipídeo A, firmemente embebido na membrana; (2) cerne do polisssacarídeo, localizado na superfície da membrana; e (3) antígenos O, que são polissacarídeos que se estendem como pêlos a partir da superfície da membrana em direção ao meio circundante. A porção lipídica do LPSsé também conhecida como endotoxina e pode atuar como um veneno, causando febre, diarréia, destruição das células vermelhas do sangue e um choque potencialmente fatal. PAREDE CELULAR - Gram-negativas Endotoxina • Morfologia geral das bactérias - (Parede celular) A coloração de GRAM foi desenvolvida em 1984 pelo bacteriologista dinamarquês Hans Gram. Utilizando corantes a base de iodo as bactérias são coradas de púrpura, pois o iodo impregna na parede celular. Em seguida uma solução descolorante é aplicada. As bactérias que mantêm a cor púrpura são denominadas GRAM positivas. As bactérias que perdem a cor púrpura após a descoloração são classificadas como GRAM negativas. 16/09/2013 9 • Morfologia geral das bactérias - (Membrana Celular) 16/09/2013 10 • Morfologia geral das bactérias - (Membrana Celular) Membrana celular: A membrana citoplasmática tem espessura de aproximadamente 10 nm e separa a parede celular do citoplasma. É constituída principalmente de lipídeos e proteínas, desempenhando importante papel na permeabilidade seletiva da célula (funciona como uma barreira osmótica). Ela difere da membrana citoplasmática das células eucarióticas por: - não apresentar esteróides em sua composição; - ser sede de numerosas enzimas do metabolismo respiratório (mesmas funções das cristas mitocondriais); - controlar a divisão bacteriana através dos mesossomos. • Morfologia geral das bactérias - (Membrana Celular) Funções: 1. Proteção 2. Transporte seletivo de nutrientes 3. Síntese de componentes da parede celular 4. Secreção de enzimas digestivas 5. Respiração celular 6. Ancora flagelos, fímbrias e pili 7. Armazenamento de pigmentos e enzimas da fotossíntese (em cianobactérias) • Morfologia geral das bactérias - (Citoplasma) Citoplasma: Sinônimos (hialoplasma e citosol). Possui 4/5 de água e 1/5 de substâncias dissolvidas ou em suspensão (proteínas, carboidratos, lipídios, íons, etc). Possui em seu conteúdo: Ribossomos (única organela), plasmídeos e o cromossomo circular único (região do nucleóide). 16/09/2013 11 • Morfologia geral das bactérias - (Plasmídeos) Plasmídeos: algumas bactérias possuem moléculas menores de DNA, também circulares, cujos genes não codificam características essenciais, porém muitas vezes conferem vantagens seletivas à bactéria que as possue. Essas moléculas chamadas plasmídeos são capazes de auto-duplicação independente da replicação do cromossomo, e podem existir em número variável no citoplasma bacteriano. Principais funções dos plasmídeos: 1. Apresentar genes que conferem resistência a diversos antibióticos. 2. Apresentar genes responsáveis por síntese de toxinas. 3. Apresentar genes que codificam enzimas que ativam a degradação de carboidratos e substâncias como tolueno, cânfora e hidrocarbonetos do petróleo. • Morfologia geral das bactérias - (Endósporos) Endósporos Estruturas de latência que exibem altíssima resistência tanto a agentes físicos como químicos. Quando as bactérias com capacidade de esporular se encontram em ambientes cujas condições tornam-se inadequadas, estas iniciam o processo de esporulação, garantindo assim a manutenção de seu material genético. Nucleóide Endósporo em formação Conteúdo celular em degeneração Endósporo maduro As bactérias esporuladas podem permanecer dormentes por milhares de anos e retornar ao seu estado ativo quando as condições ambientais tornarem-se favoráveis. Endósporo 16/09/2013 12 ENDOSPOROS 16/09/2013 13 Cianobactérias Nitrosomonas Salmonella Bactérias-filhas Estrangulamento citoplasmático Duplicação cromossônica Cromossomo Bactéria 16/09/2013 14 Bactérias-filhas Estrangulamento citoplasmático Duplicação cromossônica Cromossomo Bactéria Reprodução Assexuada • Bipartição ou Cissiparidade Células filhas idênticas a célula mãe Não ocorre variabilidade genética Podemos afirmar que bipartição é a mesma coisa que mitose? Não!!! O termo mitose refere-se a cariogamia (divisão do núcleo), como bactérias não tem núcleo não sofrem mitose. Qual a grande desvantagem da Bipartição? Não há troca de material genético, portanto não há variabilidade. Se o ambiente modificar, pode erradicar todas as bactérias de uma só vez. Qual a grande vantagem da Bipartição? Permite a rápida colonização de bactérias, em meio ambiente favorável, num pequeno intervalo de tempo. • Formação de um novo genótipo através da troca de material genético entre DNAs. • Ocorre entre dois cromossomos homólogos. – eucariotos: MEIOSE – procariotos: RECOMBINAÇÃO Recombinação genética Reprodução Sexuada a) Transdução 16/09/2013 15 Reprodução Sexuada b) Transformação Uma bactéria pode absorver DNA livre no meio ambiente, proveniente de outra bactéria morta, e inserí-lo ao seu material genético. 16/09/2013 16 Experimento de Griffith (1928) Transformação 16/09/2013 17 Transformação Reprodução Sexuada c) Conjugação Ocorre quando duas ou até três bactérias se unem, normalmente, por uma ponte formada através das pili sexuais, sendo os plasmídeos passados de uma bactéria para outra. Conjugação – Lederberg & Tatum (1946) Experimentos delineados para determinar se as bactérias realizam processos sexuais. – contato entre células – plasmídeo ou cromossomo Recombinação genética 16/09/2013 18 16/09/2013 19 16/09/2013 20 16/09/2013 21 Taxa de crescimento vs. temperatura Curva de crescimento característica de diferentes microrganismos. 16/09/2013 22 PRESSÃO OSMÓTICA As bactérias necessitam de água para seu crescimento e seu conteúdo celular é de 80 a 90% de água. Em solução hipertônica, haverá passagem da água de dentro da célula para o meio com alta concentração de soluto. A perda de água por osmose causa a plasmólise ou encolhimento do citoplasma da célula. Esse fenômeno acaba por inibir o crescimento. O processo de adição de sais ou outros solutos pode ser utilizada na preservação dos alimentos. Alimentos como peixe salgado, mel e leite condensado são preservados através desse mecanismo Não Halófilos: não necessitam de sal e não toleram a presença no meio. Halotolerantes: não necessitam de sal mas toleram a presença no meio. Halófilos: necessitam de sal em uma concentração moderada Halófilos extremos: necessitam de sal em altas concentrações. Taxa de crescimento de alguns microrganismos vs a concentração de sal. 16/09/2013 23 16/09/2013 24 MEIO DE CULTURA MEIO DE CULTURA: material nutriente preparado no laboratório para o crescimento de microrganismos. CULTURA: microrganismos que crescem e se multiplicam no meio de cultura. 16/09/2013 25 16/09/2013 26 MEIO DE CULTURA MEIO DE CULTIVO SELETIVO E DIFERENCIAL: Meio seletivo: favorece o crescimento de uma determinada bactéria de interesse, impedindo o crescimento de outras bactérias. Ex: ágar Sabouraud dextrose, pH 5,6, é utilizado no crescimento de fungos que são favorecidos, em relação as bactérias, pelo baixo pH. Meio diferencial: facilita a identificação de um determinado organismo. Ex: meio ágar-sangue, utilizado para a identificação de bactérias capazesde destruir células sangüíneas (anel claro em torno da colônia). MEIO DE CULTURA MEIO DE ENRIQUECIMENTO: favorece o desenvolvimento de uma população bacteriana que esta em desvantagem entre outras populações. MEIOS REDUTORES: meios com reagentes, como o tioglicolato de sódio, que é capaz de se combinar com o oxigênio dissolvido eliminando este elemento do meio de cultura (específico para microrganismos anaeróbicos).
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