Tipos de cultura celular

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Tipos de cultura 
celular 
Hugo 
O que é cultura celular? 
Podem fazer-se culturas a partir tecidos humanos, animais e 
vegetais; 
Conjunto de técnicas que permitem cultivar ou 
manter células isoladas fora do organismo onde 
existem, mantendo as características próprias. 
Tipos de cultura celular 
 
◦ Cultura Primária 
 
◦ Cultura Secundária/linhagem “finitas” 
 
◦ Linhagem Celular Estabelecida (ou contínua) 
 
◦ Linhagem Celular Transformada 
O que cultura primária? 
 
◦ É o estagio da cultura após o isolamento 
das células e antes da primeira 
subcultura. 
 
◦ Partir do primeiro subcultivo (repique 
ou passagem), passa a ser uma 
linhagem celular. 
 
Células recém-tiradas do tecido in vivo e colocadas 
in vitro. 
O que cultura primária? 
 
 
◦ São inicialmente heterogêneas 
 
◦ Vantagem: Células mantêm as características do tecido de 
origem 
 
◦ Desvantagem: Pouca quantidade de células 
Como obter uma cultura 
primária? 
 
◦ (1) Escolha e aquisição da amostra 
 
◦ (2) Isolamento tecidual 
 
◦ (4) Dissecação / Explante 
 
◦ (5) Cultivo 
Cultura primária de fibroblastos 
pulpares 
I – Aquisição da amostra 
 
Cultivo primário 
II – Isolamento do tecido 
 
Cultivo primário 
III – Dissecação e/ou 
desagregação Explante 
 
III – Dissecação e/ou 
desagregação Desagregação 
mecânica 
Processos mecânicos 
Cultivo primário 
 
III – Dissecação e/ou 
desagregação Desagregação 
Enzimática 
Processos enzimáticos 
Processos enzimáticos 
IV - Cultura após a colocação em 
um frasco de cultivo (trocas do 
meio) 
Cultivo primário 
 Cuidados 
 
◦ (1) Gordura e tecido necrótico devem ser removidos durante a 
dissecação. 
 
◦ (2) O tecido deve ser fatiado finamente pelo uso de 
instrumentos afiado para causar danos mínimos 
 
◦ (3) Enzimas usadas para a desagregação devem ser removidas 
subsequentemente (evitar danos às células de interesse) 
Cultivo primário 
 Cuidados 
◦ (4) A concentração de células no cultivo primário deve ser 
muito maior do que o usado normalmente para o subcultivo 
porque a taxa de sobrevivência deste tipo de cultivo é muito 
pequena 
 
◦ (5) Deve-se usar um meio enriquecido (HAM F-12) ao invés de 
meios simples (DMEN) e soro fetal (Bovino) 
 
◦ (6) Tecido embrionário desagrega-se mais rapidamente e o 
rendimento de células viáveis e taxa proliferativa são bem 
superiores do que aquelas obtidas de tecido adulto. 
 
◦ (7) Verificação de parâmetros éticos 
O que cultura secundária? 
◦ Obtidas pelo subcultivo das culturas primárias 
 
◦ Culturas mais homogêneas 
 
◦ Vantagem: Possuem maior velocidade de crescimento do que a cultura 
primária 
◦ Desvantagem: Podem ter alterações morfológicas e de expressão de 
proteínas 
Células derivadas de culturas primárias que estão 
sendo cultivadas in vitro por algum tempo, mas não 
sofreram transformação. Podem sofrer senescência. 
Cultura secundária 
◦ Linhagens celulares “finitas” 
 
◦ Inibição por contato; 
◦ Senescência celular replicativa e crise. 
O que é cultura 
estabelecida? 
◦ Imortalização pode ocorrer ESPONTANEAMENTE ou INDUZIDA (vírus 
oncogênicos ou tratamentos químicos). 
 
◦ Vantagem: Pode ser propagada in vitro por tempo indeterminado 
(não sofre senescência). 
 
◦ Desvantagem: As células não possuem todas as suas características 
originais 
Células derivadas de culturas primárias ou linhagens 
celulares, que podem se dividir indefinidamente 
(“imortalizadas”). 
Cultura estabelecida 
Limite de 
Hayflick 
Cultura estabelecida 
◦ Linhagens celulares estabelecidas 
 
◦ Inibição por contato; 
◦ Senescência celular replicativa e 
crise. 
Linhagem celular 
transformada 
◦ Quando alterações na linhagem celular afetam o controle do ciclo 
celular 
 
◦ Morfologia alterada 
 
◦ Alta taxa de crescimento 
 
◦ Menor dependência de soro e de ancoragem 
Células com características tumorais/ cancerígenas 
Linhagem celular 
transformada 
◦ Aumento da variação cromossômica entre células 
 
◦ Vantagem: Quantidade de células é praticamente ilimitado 
 
◦ Desvantagem: Células mantêm poucas características originais do 
tecido proveniente 
Linhagem celular 
transformada 
◦ Linhagens celulares estabelecidas 
 
◦ Inibição por contato; 
◦ Senescência celular replicativa e 
crise.