aula prática coloração de Gram

Prévia do material em texto

Durante as aulas práticas foram realizadas a coloração de Gram. de duas espécies bacterianas: S. aureus e E. coli. O que foi observado na microscopia após a coloração dessas duas bactérias?
S. aureus  
Forma: cocos
Arranjo: irregular 
Gram.: positivo (roxo)
E. Coli
Forma: bacilo
Arranjo: isolado
Gram: negativo (vermelho)
Cite todos os passos da coloração de Gram.
1º passo: preparar a lamina 
2º passo: aplicação de violeta de genciana (coloração púrpura) por 1 min. (as células absorvem a solução)
 Lavar com água destilada
3º passo: aplicar iodo por 1 min. (a células vão ficar azul escuro) 
 Lavar com água destilada 
4º passo: lavar a lamina com álcool (as células de Gram- positivas vão ficar azuis e as de Gram-negativa vão ficar sem cor)
 Lavar com água destilada 
5º passo: aplicação de fucsina por 30 seg. (as células de Gram- positivas vão ficar azuis e as de Gram-negativa vão ficar vermelhas)
 Lavar com água destilada.
 Secar e observar ao microscópio.
O que é o complexo iodo-pararosanilina?
Com a adição do lugol ocorre a formação do completo iodo-parasonilina. Esta reação tem particularidade de fixar o corante primário nas estruturas coradas.
Descreva como são e do que se compõem as paredes das bactérias Gram positivas e Gram negativas?
Gram-positiva: a parede celular e basicamente constituída por peptideoglicana, mas também podem ser encontrados outros tipos de moléculas como o acido teicoio são polímeros contendo resíduos de glicerol-fosfato, que são covalentes ligados ao N-acetil murâmico da peptideoglicana. Alguns ácidos teicoicos contendo glicerol são diretamente ligados a lipídios presente na membrana da bactéria gram-positivo. E por essa associação com lipídios, esses são chamados de acido lipoteicos, como os ácidos leicoico e lipoteicoicos são carregados negativamente, são os responsáveis pela carga negativa da superfície celular das bactérias Gram-negativa.
Ficam coradas de púrpura no teste de coloração de gram.
Bactérias; Streplococcus pneumonias-causa pneumonia
 Alostriduim tetani- causa tétano
Gram-negativas: tem uma parede mais complexas em comparação das gram-positivas, tanto estrutural quanto quimicamente. Estruturalmente a parede celular contem duas camadas externas a membrana plasmática; há uma fina camada de peptideoglicano ,externa a essa camada há uma membrana externa a área entre um membrana e outra é chamada de espaço periplasmatico;esse espaço é um compartimento que contem componentes de ferro,proteínas,açúcares e outros.
A membrana externa serve tanto para estruturas bactérias quanto para funcionar como barreira. A monocamada externa e composta por hipopolissacaridios (LPS), também chamadas de endotoxina, um potente estimulador das respostas imune e inata. O LPS se liga a receptores-padrao de patogenia e ativa as células B (BETA) e induz macrófagos e outras células a liberar interluicina (IL), fator de necrose tumoral.
A variedade de proteínas encontradas na membrana externa limitada.
Ficam coradas de vermelha com a coloração de gram.
Bactérias: Vibrio colerae-provoca cólera
Pseudomonas aeruginosas-prociona infecções urinarias e respiratória
.
Cite alguns fatores que podem influenciar na coloração de Gram, podendo inclusive levar a  erros?
Pular etapas pode fazer com que não fiquem coradas corretamente as células, como não aplicar o álcool que caso isso ocorra às células gram-negativas serão mostradas com a coloração roxa que no caso essa cor e para as gram-positivas.