Revisão Aulas Práticas - Microscopia

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Biologia Celular GeralBiologia Celular Geral
Revisão 
Aulas Práticas
Biologia Celular GeralBiologia Celular Geral
Aula Prática 1 
Uso do Microscópio ComumUso do Microscópio Comum
Uso do Microscópio Comum
• A microscopia óptica ou microscopia de luz
possibilita o aumento de imagens através da 
luzluz
• O avanço deste tipo de microscopia ocorreu 
atrelado ao desenvolvimento da óptica
Robert Hooke popularizou o uso do microscópio entre os
biologistas e foi o primeiro a usar o termo célula no estudo
dos seres vivos
• Além de ampliar a imagem de um objeto, o
microscópio serve para aumentar o poder de
resolução do olho humano.
Uso do Microscópio Comum
• Poder de resolução é a capacidade de
distinguir dois pontos muito próximos um do
outro.
Poder de Resolução
• Limite de resolução do olho humano – LR = 0,1 a
0,2 mm
• micrômetro (µm) 10-6 m ou 10-3 mm (0,001 mm)
• nanômetro (nm) 10-9 m ou 10-6 mm (0,000001
mm)
• angström (Å) 10-10 m ou 10-7 mm (0,0000001 mm)
Uso do Microscópio Comum
• Os microscópios ópticos têm um limite de 
resolução da ordem de 0,2 µm, 
• Para observar uma estrutura em • Para observar uma estrutura em 
microscópio óptico, é necessário que ela 
seja suficientemente fina, além de ter 
índices de refração ou coloração
diferentes do meio que a circundam.
2. Partes componentes do 
microscópio óptico 
• Componentes mecânicos:
• Base ou Pé: é o suporte do microscópio, peça que 
sustenta todas as outras. 
• Braço ou Coluna: é a peça que liga a base até a parte 
superior do microscópio e onde se deve segurar o superior do microscópio e onde se deve segurar o 
microscópio para ser transportado.
• Mesa ou Platina: é uma placa de metal com um orifício 
no centro, por onde passam os raios luminosos. O 
objeto que vai ser observado é colocado sobre uma 
lâmina de vidro e esta, sobre a platina, exatamente em 
cima do orifício. Peça circular, quadrada ou retangular, 
paralela à base. Possibilita a passagem dos raios 
luminosos concentrados no condensador.
• Componentes mecânicos:
• Charriot: acessório localizado superficialmente à platina, é 
formado por uma presilha, dois botões giratórios e dois trilhos 
que têm a função de movimentar a lâmina no plano horizontal 
(da frente para trás e da esquerda para a direita, ou vice-versa) 
e assim permitir a observação de toda a sua área.
• Tubo ou Canhão: cilindro que suporta os sistemas de lentes, 
2. Partes componentes do 
microscópio óptico 
• Tubo ou Canhão: cilindro que suporta os sistemas de lentes, 
localizando-se na extremidade superior a ocular e inferior ao 
revólver com objetivas. A distância interpupilar, ou seja, a 
distância entre as oculares, pode ser regulada por um 
mecanismo existente no canhão.
• Revólver: peça encontrada abaixo do canhão na qual se 
inserem várias lentes objetivas. É dotado de um movimento de 
rotação que permite posicionar a objetiva desejada para a 
observação do material a ser analisado.
• Componentes mecânicos:
• Parafusos macrométrico e micrométrico: na parte 
lateral do braço existem dois parafusos 
encaixados um no outro. O maior deles é o 
2. Partes componentes do 
microscópio óptico 
encaixados um no outro. O maior deles é o 
macrométrico, que permite grandes avanços ou 
recuos da platina em direção à objetiva, 
enquanto o parafuso micrométrico permite 
pequenos avanços ou recuos. Esse movimento da 
platina leva à focalização do material observado 
em diferentes aumentos. 
Revolver
Charriot
Tubo ou Canhão
Braço
Mesa ou Platina Charriot
Macro/Micrométrico
Mesa ou Platina
Base ou pé
• Componentes ópticos:
• Fonte de luz: normalmente uma lâmpada ou, em modelos 
mais antigos, um espelho, que se apóia na base do 
microscópio. No caso da fonte de luz ser uma lâmpada, 
pode-se observar, ao lado da estativa ou da base do 
microscópio, o interruptor da lâmpada e o regulador da 
intensidade luminosa.
2. Partes componentes do 
microscópio óptico 
microscópio, o interruptor da lâmpada e o regulador da 
intensidade luminosa.
• Condensador: de forma circular e situado entre a platina e 
a base, o condensador converge os raios luminosos 
provindos da lâmpada e projeta-os como um cone de luz 
sobre o material que está sendo examinado.
• Receptáculo do filtro: peça de forma circular, presa ao 
condensador, destinada à recepção de um filtro. Este é 
uma placa de vidro colorida (azul, verde, etc.) que torna a 
luz adequada ao uso.
Componentes ópticos:
• Diafragma: fica acima do receptáculo do filtro e se liga a 
uma alavanca que permite sua abertura ou fechamento, 
levando ao controle da passagem total ou parcial da luz.
• Lentes Objetivas: são lentes que projetam uma imagem 
aumentada e invertida do objeto nas oculares e inserem-se 
ao revólver, através de rosca. Toda objetiva traz gravado o 
número do aumento que proporciona. A objetiva de 100x é 
também chamada objetiva de imersão e é somente utilizada 
com óleo especial, o qual permite maior refração da luz para 
também chamada objetiva de imersão e é somente utilizada 
com óleo especial, o qual permite maior refração da luz para 
dentro da objetiva, corrigindo a pouca luminosidade nas 
observações feitas em grandes aumentos.
• Lentes Oculares: aumenta a imagem do objeto após o 
aumento já proporcionado pela objetiva. É através desta 
lente que o observador vê a imagem do objeto. Em 
microscópios binoculares, normalmente há, na base de uma 
ou de ambas oculares, um anel de ajuste de dioptria para 
equalizar possíveis diferenças no ponto de foco entre os 
olhos.
Ocular
On/Off Luz
Objetiva
Diafragma/Condensador 
Fonte de luz
PROCEDIMENTOS PARA O CORRETO 
MANUSEIO DO MICROSCÓPIO
• O aluno deve repetir várias vezes as operações 
descritas abaixo visando a atingir maior 
desenvoltura no manuseio do microscópio 
óptico.
• 1. Acenda a lâmpada do sistema de iluminação.• 1. Acenda a lâmpada do sistema de iluminação.
• 2. Abra totalmente o diafragma e coloque o 
sistema condensador - diafragma na posição mais 
aberta, pois é aquela que permite melhor 
iluminação.
• 3. Gire o revólver, colocando em posição a 
objetiva de menor aumento.
• 4. Ponha a lâmina com a lamínula para cima 
na platina (ou mesa) e prenda-a com a 
presilha.
• 5. Gire o revólver, colocando em posição a 
PROCEDIMENTOS PARA O CORRETO 
MANUSEIO DO MICROSCÓPIO
• 5. Gire o revólver, colocando em posição a 
objetiva de 4X (menor aumento).
• 6. Movimente o charriot, fazendo com que o 
preparado fique em baixo da objetiva.
• 7. Com o parafuso macrométrico, eleve a 
platina ao máximo, observando que a objetiva 
não toque na lamínula, pois poderá quebrá-la.
• 8. Focalize a preparação para a obtenção de 
PROCEDIMENTOS PARA O CORRETO 
MANUSEIO DO MICROSCÓPIO
• 8. Focalize a preparação para a obtenção de 
uma imagem nítida, movimentando o 
parafuso macrométrico e abaixando a platina 
até que se possa visualizar a imagem.
• 9. Melhore o foco regulando apenas com o 
parafuso micrométrico.
• 10. Coloque a região do preparado que você 
precisa visualizar com maior aumento bem no 
centro do campo visual da lente.
• 11. Gire o revólver, colocando em posição a 
PROCEDIMENTOS PARA O CORRETO 
MANUSEIO DO MICROSCÓPIO
• 11. Gire o revólver, colocando em posição a 
objetiva de 40X (aumento médio).
• 11. Repita os passos dos itens 6, 7 e 8.
• 12. Esquematize o que observa tentando 
detalhar todas as estruturas observáveis
• Observação importante: A objetiva 
de 100X é chamada de imersão e 
seu uso será explicado 
PROCEDIMENTOS PARA O CORRETO 
MANUSEIO DO MICROSCÓPIO
seu uso será explicado 
posteriormente. Não utilize esta 
objetiva sem a indicação prévia do 
professor.
• Campo microscópico é a área dapreparação 
que se está observando ao M.O. Quanto maior 
o aumento da imagem, menor é a 
abrangência do campo. Devido a isso, sempre 
PROCEDIMENTOS PARA O CORRETO 
MANUSEIO DO MICROSCÓPIO
abrangência do campo. Devido a isso, sempre 
iniciamos a observação ao M.O. com uma 
combinação de lentes que proporcione o 
menor aumento, a fim de se ter uma visão 
panorâmica da região que se quer observar 
com maior aumento.
• A maioria dos nossos microscópios possuem 
lentes parafocais. Isto implica que, uma vez 
obtido o foco com a objetiva de menor 
aumento, basta girar o revólver, colocar a 
PROCEDIMENTOS PARA O CORRETO 
MANUSEIO DO MICROSCÓPIO
aumento, basta girar o revólver, colocar a 
objetiva de maior aumento em posição e 
acertar o foco apenas com o parafuso 
micrométrico.
• Calcula-se o aumento da imagem obtida ao 
M.O. multiplicando-se o valor do aumento da 
lente ocular pelo valor do aumento da lente 
objetiva. Com base nestas informações, 
responda:responda:
1. Qual o aumento mínimo do microscópio?
2. Qual o aumento máximo do microscópio?
COMO PREPARAR UMA LÂMINA 
TEMPORÁRIA?
- Coloque no centro de uma lâmina limpa uma ou 
duas gotas de água e o material a ser 
examinado.
- Encoste a lamínula na água, formando um 
ângulo de 45° em relação à lâmina e solte-a.ângulo de 45° em relação à lâmina e solte-a.
- Retire o excesso de água, se houver, encostando 
um pedaço de papel de filtro nas bordas da 
lâmina, observando que a água deve cobrir 
todo o espaço coberto pela lamínula.
- Registrar o material a ser examinado.
PREPARANDO UMA LÂMINA TEMPORÁRIA
A B
C D
FINALIZANDO OS TRABALHOS
1. - Desligue a iluminação
2. - Coloque a objetiva de menor aumento
3. - Abaixe a platina (e o condensador)
4. - Retire a lâmina da platina (ou mesa)4. - Retire a lâmina da platina (ou mesa)
5. - Cubra o aparelho com sua capa
6. - Lave as lâminas e lamínulas 
7. - Descarte o lixo
8. - Deixe a mesa em ordem
Aula Prática 2 
PlastídeosPlastídeos
PLASTÍDEOS
• Os plastídeos são organelas citoplasmáticas 
típicos de células vegetais, com estruturas e 
funções variadas. Os plastídeos podem ser 
classificados de acordo com a presença ou classificados de acordo com a presença ou 
ausência de pigmentos em dois grandes 
grupos: os cromoplastos (pigmentados) e os 
leucoplastos (desprovidos de pigmentos e, em 
geral, associados à função de reserva).
PLASTÍDEOS
• Os leucoplastos que sintetizam e acumulam 
amido recebem a denominação de 
amiloplastos. Quando estão relacionados ao 
acúmulo de óleo, são conhecidos como acúmulo de óleo, são conhecidos como 
elaioplastos. Os proteinoplastos acumulam 
proteínas.
Deplasmólise
PLASTÍDEOS
• A ciclose é uma corrente que resulta do 
movimento citoplasmático de forma passiva e 
ordenada que arrasta as organelas e substâncias 
em suspensão. Embora na se saiba ao certo se 
esta é o seu real papel biológico, a ciclose facilita 
o intercâmbio de materiais dentro da célula e 
esta é o seu real papel biológico, a ciclose facilita 
o intercâmbio de materiais dentro da célula e 
desta com o meio externo. Esse fenômeno pode 
ser facilmente visualizado em células de espécies 
de Elodea sp (Hidrocharitaceae, 
Monocotiledônea), cujo movimento 
citoplasmático desloca os cloroplastos.
Grãos de AmidoGrãos de Amido
Aula Prática 3 
Permeabilidade e EstômatosPermeabilidade e Estômatos
1. Quando as células guarda estão túrgidas, o
estomato abre e ocorre transpiração
EstômatosEstômatos
estomato abre e ocorre transpiração
2. Quando as células guarda plasmolisam, o
estoma fecha e não ocorre transpiração
OSMOSE EM CÉLULA VEGETALOSMOSE EM CÉLULA VEGETAL
A osmose é o movimento da água entre meios com
concentrações diferentes de solutos separados, por uma
membrana semipermeável.membrana semipermeável.
A água movimenta-se sempre de um meio hipotônico
(com menor concentração de soluto) para um meio
hipertônico (maior concentração de soluto)
OSMOSE EM CÉLULA VEGETALOSMOSE EM CÉLULA VEGETAL
Aula Prática 4 
BasofiliaBasofilia
Corantes
• A maioria dos tecidos é incolor ------ métodos para a coloração 
das células / tecidos
• Na coloração para Microscopia Óptica (M.O.) são utilizados 
corantes hidrossolúveis. 
• A maioria dos corantes comporta-se como ácidos ou bases e, 
tendem a formar reações salinas com radicais ionizáveis 
presentes nos tecidos. 
• Os componentes dos tecidos que se coram facilmente com 
corantes básicos são chamados basófilos, sendo chamados 
acidófilos os que se ligam a corantes ácidos.
• O azul-de-toluidina e azul-de-metileno são exemplos de 
corantes básicos. A hematoxilina comporta-se 
principalmente como um corante básico, ligando-se a 
estruturas basófilas dos tecidos. Os mais importantes 
componentes teciduais que reagem com corantes 
Corantes
componentes teciduais que reagem com corantes 
básicos são as nucleoproteínas e as glicoproteínas ácidas, 
devido a grupamentos ácidos que apresentam. 
• Corantes ácidos, tais como orange G, a eosina, a fucsina
ácida, coram principalmente componentes básicos das 
proteínas citoplasmáticas. 
• Metacromasia – significa mudança de cor. É 
uma propriedade de certos corantes, 
geralmente básicos. Algumas substâncias e/ou 
estruturas, como os grânulos citoplasmáticos 
Corantes
estruturas, como os grânulos citoplasmáticos 
são metacromáticos. Por exemplo, quando o 
azul-de toluidina está ligado a uma substância 
que ocorre em altas concentrações, cora esta 
substância em púrpura.
Mucosa Bucal 500x
Mucosa Bucal 1000x
Epiderme Cebola 500x
Epiderme Cebola 1000x
Aula Prática 5 
Morfologia NuclearMorfologia Nuclear
• O núcleo é uma organela presente somente em células eucariontes.
É circundado por um envoltório nuclear que se comunica com o
citoplasma através dos poros nucleares.
• Apresenta duas funções básicas na célula: regular as reações
químicas que ocorrem no seu interior e armazenar informações
genéticas.
• Apesar de a maioria das células possuírem um único núcleo, alguns
tipos de células não possuem núcleo (anucleadas) e outros possuem
vários núcleos (multinucleadas). Isto pode ser derivado de processos
normais, como o da maturação dos eritrócitos de mamíferos, ou ser
resultado de divisões celulares mal processadas, em que uma das
células-filhas não possui núcleo e a outra fica binucleada. As células
anucleadas são incapazes de se dividirem para produção de
descendência celular.
• O tipo de célula anucleada mais conhecida é o eritrócito
dos mamíferos, que também não apresentam organelas
como as mitocôndrias e serve principalmente para o
transporte de oxigênio dos pulmões para os tecidos
celulares. Os eritrócitos sofrem maturação através do
processo denominado eritropoiese, que se dá na medula
óssea e onde perdem o núcleo, as organelas e os
ribossomos.
• Os eritrócitos (ou hemáceas) são as células mais
abundantes dentre as células sanguíneas (>99%). Além
das hemáceas (glóbulos vermelhos) a parte sólida do
sangue é contituídas pelos glóbulos brancos (leucócitos)
e plaquetas (ou trombócitos). O componente líquido do
sangue, o plasma contém (além de água) proteínas,
nutrientes, hormônios, sais e resíduos do metabolismo.
ERITRÓCITOS (ou glóbulos vermelhos) – transporte de O2 por 
meio da hemoglobina. 
PLAQUETAS (ou trombócitos) – fragmentos de células maiores. 
• Cada um dos tipos celulares componentes do 
sangue apresenta uma morfologia particular e 
desempenha uma determinada função:
PLAQUETAS (ou trombócitos) – fragmentos de células maiores. 
Coagulação sanguínea.
LEUCÓCITOS(ou glóbulos brancos) – resposta imunológica, destruindo 
organismos invasoresou outros agentes que sejam lesivos ao corpo.
• AGRANULÓCITOS
MONÓCITOS: após deixarem a circulação sanguínea são 
diferenciados em células macrófagos (células fagocitárias) 
LINFÓCITOS: Contribuem com 20-30% dos leucócitos. Geralmente
os linfócitos entre os leucócitos do sangue são as menores células e
apresentam um núcleo redondo com cromatina condensada e
citoplasma escasso.
�AGRANULÓCITOS
NOTA: O percentual de linfócitos varia de acordo com a saúde do paciente. Em cados
dedepressão ou stress, o percentual é reduzido, ou no caso de uma infecção viral,
esse percentual aumenta bastante. Uma baixa quantidade de linfócitos no sangue
atesta que o corpo não possui defesas contra doenças perigosas.
Basófilos - Possui forma esférica e núcleo irregular em forma de trevo. Seu
núcleo geralmente é segmentado ou bilobulado, raramente com três ou mais
lóbulos. Seu citoplasma é levemente basofílico (cor azul) e quase sempre
ofuscado pelos vários grânulos grosseiros corados de roxo. Os granulos estão
dispostos irregularmente cobrindo também o núcleo. É a célula circulante
menos encontrada no sangue periférico dentre os leucócitos.
Aproximadamente de 0-1% dos leucócitos são basófilos. Secretam histamina,
um mediador importante da resposta inflamatória.
�GRANULÓCITOS POLIMORFONUCLEADOS
ummediador importante da resposta inflamatória.
Eosinófilos - São os glóbulos brancos que atuam contra parasitas
multicelulares e certas infecções nos vertebrados. Seu núcleo
contém de 2 a 3 lóbulos ligados por um fino filamento nuclear. Seu
citoplasma é tomado por grânulos vermelho-alaranjados.
Constituem cerca de 1-6% dos leucóctios do sangue.
�GRANULÓCITOS POLIMORFONUCLEADOS
�GRANULÓCITOS POLIMORFONUCLEADOS
Neutrófilos - Realizam a fagocitose. São fagocitos capazes de ingerir
microrganismos ou partículas. Seu núcleo é polilobulado
geralmente apresenta três lóbuluos ligados por um fino filamento
nuclear. Seu citoplasma é abundante e possui grânulos finos
dispersos. Os neutrófilos são as células mais abundantes dentre 50-
70% dos leucócitos
Sangue de Sapo
Aula Prática 6 
Divisão CelularDivisão Celular
Ciclo celularCiclo celular
�Interfase
�fase M (mitótica)
Mitose→ divisão nuclear
Citocinese→ divisão do citoplasma
� G1: intervalo 1
M Ciclo celularCiclo celular
� G1: intervalo 1
� S: síntese de DNA
� G2: intervalo 2
�M: mitose e citocinese
G1G2
S
Ciclo celularCiclo celular
�Prófase
�Condensação dos cromossomos
�Formação do fuso mitótico
� Desintegração da membrana nuclear
Início da prófaseInício da prófase Prófase tardiaPrófase tardia
Ciclo celularCiclo celular
�Metáfase
�Cromossomos se alinham na placa 
metafásicametafásica
MetáfaseMetáfase
�Anáfase
�Cromátides irmãs se separam
Ciclo celularCiclo celular
�Cromátides irmãs se separam
�Migração dos novos cromossomos para os pólos
do fuso
AnáfaseAnáfase
Ciclo celularCiclo celular
�Telófase
�Cromossomos 
chegam aos pólos do 
�Citocinese
�O citoplasma se 
chegam aos pólos do 
fuso
�A membrana nuclear 
se reconstitui
�Os cromossomos 
começam a relaxar
�O citoplasma se 
divide
�Formação da 
parede celular 
(vegetais)
TelófaseTelófase
Mitose em ponta de raiz de
cebola