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Nutrigenômica 1 UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO SEMI-ÁRIDO CURSO: BIOTECNOLOGIA DISCIPLINA: GENÔMICA E PROTEÔMICA PROFESSOR: WESLLEY PAIVA Nutrologia Conceito: Área médica que estuda a fisiopatologia, o diagnóstico e o tratamento de moléstias nutricionais; - As doenças nutricionais são diretamente e indiretamente relacionadas a todas as substâncias que são ingeridas, absorvidas e metabolizadas no organismo (compostos bioativos); Estudo da genômica na nutrologia: Prevenir, diagnosticar e tratar doenças alimentares; Alimento: São produtos consumidos diariamente pelo homem e que pela ação de seus nutrientes, desempenham um papel único e funcional no funcionamento do organismo humano; Nutrientes básicos: Água, proteínas e gorduras; Micronutrientes: Ferro, sódio e potássio; 2 Nutrologia Nutrientes secundários: Podem ser favoráveis ou desfavoráveis - Licopeno: Encontrado no tomate (Potente oxidante); - Fitoesteróis: Presente em óleos vegetais; - Riboflavinas: Presente na soja 3 farmacoterapêuticos Nutrigenômica Oficialmente declarada em 2001 4 Genômica Nutricional ou Nutrigenômica: Uma nova visão do estudo dos alimentos e da pesquisa nutricional na qual a avançada tecnologia funcional genômica é usada, para determinar mecanismos pelos quais os alimentos e seus componentes individuais modulam processos que ocorrem nos tecidos do corpo humano 5 6 Nutrigenômica 7 Nutrigenômica: Revolução nos Alimentos Melhoramento de plantas BRASIL: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto e Escola de Agronomia de Piracicaba 8 Alimentos mais adequados nutricionalmente EUA: 800% de crescimento na produção de milho com transgênico; Milho com mais lisina e triptofano, chegando a valores semelhantes ao do leite de vaca; ONTEM: Laborioso e demorado; HOJE: Fácil execução e mais rápido; 1ª onda de transformação genética dos alimentos - Aumentar a durabilidade; - Proteção contra agressões externas; 2ª onda de transformação genética dos alimentos - Composição do alimento modificado; Ex: óleos vegetais + ricos em ácido oleico (silenciamento gênico); 3ª onda de transformação genética dos alimentos - Alimentos ricos em proteínas ou micronutrientes de importância médica; 9 Nutrigenômica: Revolução nos Alimentos Nutrigenômica: Genômica Funcional Identificação dos efeitos provocados pelos componentes bioativos (Benéficos ou maléficos) e se esses variam com a idade, sexo, estilo de vida e demais características externas; Utilidades da Genômica Funcional na Nutrigenômica: 10 Quantidade de Nutrientes necessária a dieta; QTL’s explica a diferença da resposta de diferentes organismos, a mesma dietoterapia; Utilização de marcadores moleculares, para identificar genes responsáveis pela produção de nutrientes; Interferência dos SNP’s nas respostas a dietoterapia; Transformar plantas para proteção contra substâncias tóxicas e estudar o efeitos desses tóxicos na expressão gênica; Pesquisar o papel da gordura nos níveis de colesterol; 11 METABOLÔMICA Conceito: Subárea da Nutrigenômica que estuda o comportamento metabólico das células, tecidos e fluidos orgânicos. Ela procura as moléculas representativas dos substratos, compostos e produtos intermediários do metabolismo (pathways) nos quais as proteínas agem; 12 Favorece a compreensão das funções e dos mecanismos orgânicos que são controlados por alimentos ou por medicamentos; Aplicações da Metabolômica Distribuição de metabólitos no homem Quantificação do plasma 13 Investiga a concentração e alterações nos organismos na forma saudável e doente; Grupos de substâncias metabólicas, avaliando o perfil nutricional do paciente; Explica o motivo dessas alterações ocorrem baseada na alteração bioquímica dos metabólitos, otimizando a escolha de melhor terapia; Microarray: Caracteriza milhares de oligonucleotídeos individuais 14 Técnicas para o estudo da Metabolômica Promove uma medição Metabolômica, realizando uma comparação entre bancos de dados, através de ferramentas de bioinformática Tecnologias da Genômica para Análise de Transcriptomas MICROARRANJO DE DNA 15 Tecnologias da Genômica para Análise de Transcriptomas APLICAÇÕES DOS MICROARRANJO DE DNA 16 Mecanismos de resistência de bactérias a determinadas drogas; Ciclo celular de células de mamíferos e bactérias; Desenvolvimento embrionário da mosca das frutas (Drosophila melanogaster); Resistência adquirida pela Arabidopsis thaliana Estudos de progressão de neoplasias; Resposta a Infecção; Tecnologias da Genômica para Análise de Transcriptomas APLICAÇÕES DOS MICROARRANJO DE DNA 17 Caracterização de alvos de drogas; Expressão gênica associada ao ciclo celular; Genomatipagem; Respostas a estresses ambientais; Microarranjo no Estudo de Patologias Humanas - As variações são detectadas antes da doença aparecer 18 Indicam patologias Distrofia Muscular Doenças degenerativas da retina Câncer Hepatite Microarranjo no Estudo do Câncer - Estudo Molecular do Câncer; - Possibilita a classificação de tumores; - Identificação de padrões distintos de expressão gênica; - Confiabilidade de 96% segundo Takahashi e colaboradores; Desvantagem: Variabilidade de tumores 19 Tumor agressivo X Tumor não agressivo Tumores de tecidos moles, tem padrões de expressão diferentes HPLC 20 Técnicas para o estudo da Metabolômica HPLC (High Performance Liquid Chromatography) - Cromatografia a Líquido de Alto Desempenho 21 Técnicas para o estudo da Metabolômica 1- A amostra é dissolvida em solvente e introduzida na coluna cromatográfica preenchida com fase estacionária (FE); 2- O solvente (FM) é bombeado em vazão constante e desloca os componentes da mistura através da coluna, que se distribuem em duas fases de acordo com suas afinidades; 3- As substâncias com maior afinidade com FE se movem mais lentamente, já as com afinidade maior por FM se movem com mais rapidez; 4- Ao sair da coluna, os componentes passam por um detector que emite um sinal elétrico o qual é registrado, produzindo o cromatograma; HPLC (High Performance Liquid Chromatography) - Cromatografia a Líquido de Alto Desempenho 22 Técnicas para o estudo da Metabolômica APLICAÇÕES - HPLC é utilizada em análises de compostos não voláteis ou instáveis termicamente onde a cromatografia a gás não pode ser utilizada. Como cerca de 80% dos compostos apresentam essas características, o campo de aplicação de HPLC é extremamente vasto. 23 HPLC (High Performance Liquid Chromatography) Alimentos (Açúcares, vitaminas, proteínas, aminoácidos) Clínicas (Metabólitos, proteínas, peptídeos, aminoácidos) Tintas (Resinas, bioativos e tensoativos) Química (Polímeros) Farmacêuticas (Princípios ativos)
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