Relatório antibiograma

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UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE-UNESC
CURSO DE FARMÁCIA
CRISPIN INACIO
CLAYTON BORGES DA SILVA
FRANCIELLI LUPINIS
GLORIA SABDER
ANTIBIOGRAMA
CRICIUMA, OUTUBRO 2018
CRISPIN INACIO
CLAYTON BORGES DA SILVA
FRANCIELLI LUPINIS
GLORIA SABDER
ADITIVOS
Trabalho solicitado pela Prof. HUGO, para cumprimento parcial da disciplina de Microbiologia basica da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC.
CRICIUMA, OUTUBRO 2018�
SUMÁRIO
1 INTRODUÇÃO..........................................................................................................4
2 OBJETIVO........................................................................................................5
3 REFERENCIAL TEORICO.................................................................................8
4 MATERIAIS E METODOS..................................................................................9
5 CONCLUSAO..........................................................................................................10
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1INTRODUÇÃO
 
	 Um antibiograma é um ensaio que mede a susceptibilidade ou resistência de uma bactéria aos antibióticos através do espectro de sensibilidade identificados na placa de cultura. Ágar Müeller Hinton é um meio de cultura em placas recomendado para a realização de antibiograma (teste de sensibilidade), é rico proteínas e carboidratos que fornece o substrato ideal para o desenvolvimento e crescimento de cepas bacterianas de interesse clínico. É recomendado pelo U.S. Food and Drug Administration (FDA) e pela Organização Mundial da Saúde (OMS) para o teste de sensibilidade/resistência a antibióticos de bactérias Gram positivas e Gram negativas, aeróbicas ou anaeróbicas facultativas, comumente encontradas em alimentos e espécimes clínicos. O teste é feito utilizando-se discos de difusão antibióticos depositados sobre a superfície do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra de uma cultura bacteriana previamente crescida em meio líquido
2-OBJETIVO
	Verificar a sensibilidade e a eficiência das bactérias aos antibióticos
3-REFERENCIAL TEORICO
	Os patógenos isolados de espécimes clínicos são identificados visando confirmar o diagnóstico médico e guiar a terapia antimicrobiana. Para muitos patógenos, o tratamento antimicrobiano adequado e eficiente baseia-se nas práticas e experiências correntes. No caso de um grupo selecionado de patógenos, as decisões acerca da terapia antimicrobiana apropriada devem ser tomadas analisando-se caso a caso. Tais patógenos incluem aqueles para os quais a resistência aos fármacos antimicrobianos é comum (MADIGAN et al., 2016).
 O procedimento-padrão de determinação da atividade antimicrobiana corresponde ao teste de difusão em discos. Placas de Petri contendo meio ágar são inoculadas pelo espalhamento homogêneo de uma suspensão de cultura pura do patógeno suspeito sobre a superfície do ágar. Discos de papel-filtro contendo uma quantidade definida de um agente antimicrobiano são então depositados sobre a superfície do ágar. Durante um período de incubação específico, o agente antimicrobiano se difunde do disco para o ágar, estabelecendo um gradiente; quanto mais o antimicrobiano se difunde para longe do papel-filtro, menor é a concentração do agente. Depois de uma determinada distância a partir do disco, a CIM eficaz é alcançada, conforme figura 1. (MADIGAN et al., 2016).
 Figura 1. Teste de sensibilidade a antibióticos. 
 Fonte: Madigan, Michael T. et al. Microbiologia de Brock. Pág. 803. 2018
Microbiologistas hospitalares que atuam no controle de infecções produzem e analisam dados de suscetibilidade para gerar relatórios periódicos denominados antibiogramas. Esses relatos definem a sensibilidade de organismos clinicamente isolados aos antibióticos de uso corrente. Os antibiogramas são utilizados no monitoramento de controle de patógenos conhecidos, para rastrear a emergência de novos patógenos e para identificar a emergência de resistência a antibióticos em nível local. (MADIGAN et al., 2016).
Na prática do antibiograma usa-se o ágar como meio de cultura, os discos de papel de filtro são depositados na placa. Quando um disco é aplicado à superfície inoculado na placa, vários fenômenos acontecem simultaneamente, inicialmente os discos secos que contém o agente antimicrobiano (antibióticos) absorvem a agua da superfície ocorrendo a dissolução da droga, então o agente microbiano difunde-se através da superfície do ágar, a reação vai acontecendo onde vai se criando um gradiente de concentração do antimicrobiano ao redor do disco de sensibilidade. As bactérias vão crescendo e onde conter o antibiótico as, vais se criando a zona de inibição, quanto maior a zona maior a sensibilidade da bactéria quanto aquele antimicrobiano, pois a bactéria não crescerá onde conter o agente. 
Quando se deseja o crescimento de bactérias em um meio sólido, um agente solidificante como o ágar é adicionado ao meio. O ágar é um polissacarídeo complexo obtido a partir de algas marinhas que já vem sendo bastante utilizado para deixar alimentos como geleias e sorvetes mais espessos (TORTORA, 2005, p.164).
As enterobactérias caracterizam se por se apresentarem como: bacilos Gram negativos, fermentadores da glicose, com ou sem produção de gás, oxidase negativas, reduzem nitrato a nitrito e que crescem bem no meio de Mc Conkey ou EMB (ANVISA, 2004, p.18).
O Ágar MacConkey, bastante utilizado para os organismos que fermentam lactose produzindo pH localizado, o qual, seguido pela absorção do vermelho neutro contido no meio, confere uma coloração vermelha ou rósea à colônia, enquanto que colônias não fermentadoras de lactose permanecem incolores ou transparentes. Bastonetes Gram-positivos têm seu crescimento inibido pelos sais biliares e pelo cristal violeta (MAGALHÃES, 2016).
O fato de que a taxa de infecção do sistema urinário em mulheres e cerca de oito vezes maior que em homens. Em ambos os sexos, a maioria dos casos e de infecção por E. coli, que pode ser identificada por cultivo em meios diferenciais como o ágar de MacConkey (TORTORA 2012, pag. 746).
O presente trabalho tem por objetivo realizar a técnica de antibiograma, com uma amostra de urina, utilizando alguns antibióticos e vendo a sensibilidades da bactéria presente, através da percepção do halo de sensibilidade. 
 
4-MATERIAIS E METODOS
Em laboratório abriu-se o registro e ascendeu-se o bico de Bunsen. Flambou-se a alça bacteriológica de 10uL e deixou-se esfriar. Próximo a chama do bico de Bunsen, retirou-se com a alça bacteriológica 3 a 4 colônias das placas com a bactéria crescida, incubou-se as colônias no tubo com solução salina e comparou-se a turbidez com solução Mac Farland turbidez 0,5. Molhou-se um swab, retirou-se o excesso e espalhou-se as colônias homogeneamente, em toda superfície sobre a placa contendo o meio de cultura Agar Mueller Hinton. Passou-se a pinça na chama do bico de Bunsen rapidamente, e com a mesma retirou-se os discos de antibióticos e colocou-se separadamente sob a superfície do meio de cultura.
Anoutou-se os antibióticos e suas devidas características, e incubou-se as placas em estufa bacteriológica à temperatura de 35ºC +/- 1ºC por um período de 24 horas. Após retirou-se e colocou-se na geladeira para conservação para verificação dos resultados obtidos. 
5-RESULTADOS E DISCUSSAO
Logo após 24 horas do procedimento, mediu-se os halos dos antibióticos para analisar a sensibilidades da bactéria com determinados antibióticos.
Os antibióticos usados foram, levofloxacino 05mcg, micacina 30mcg, ampicilina 10ug, ampicilina+sulfabactan 20mcg, ciprofloxacino 5mcg, ceftazidina 30mcg, cefoxitina 30mcg, nitrofurantoina 300ug, ceftrexona 30mcg, sulfametaxazol25mcg.
De acordo com a figura 2, pode-se observar o halo de cada antibiótico usado. 
Figura 2. Resultado procedimento Antibiograma
 Fonte: Autores, 2018. 
Os números representam o tamanho dos halos formados ao redor dos discos estéreis de antibiograma medidos em milímetros. Quanto maior o halo, maior o grau de inibição bacteriana. De acordo com a tabela a seguir, observa-se os resultados. 
	Antibiótico
	Sensibilidade
	Halo mm
	Levofloxacino 05mcg 
	 ≥ 17
	40 
	Micacina 30 mcg
	 ≥ 17
	22 
	Ampicilina 10ug
	 ≥ 17
	30 
	Ampicilina+sulfabactan 20mcg
	 ≥ 15
	29 
	Ciprofloxacino 5mcg
	 ≥ 21
	42 
	Ceftazidina 30mcg
	 ≥ 18
	30 
	Nitrofurantoina 300ug
	 ≥ 17
	22 
	Ceftrixona 30mcg
	 ≥ 21
	32 
	Sulfametaxazol+trimetropin 25mcg
	 ≥ 16
	30 
	
	
	
Tabela. Resultados antibiograma
 
 Foram obtidos bons resultados, como esperado, os antibióticos tiveram ação contra as bactérias. Formou-se um halo ao redor dos discos de cada antibiótico. 
A formação de um halo transparente sobre a superfície do meio, ao redor de um disco de antibiótico, indica uma região com ausência de crescimento bacteriano, revelando a ação inibitória do agente antimicrobiano sobre a bactéria ensaiada.
6-CONCLUSAO
 Conclui-se que todos os antibióticos possuem uma eficiência e forma de ação diferenciadas frente a fatores como: estrutura de cada microrganismo (gram positivos e negativos), concentração, volume por quantidade de microrganismo e tempo de exposição. E, com isso, cabe ao usuário analisar tais fatores e selecionar um adequado para determinada situação.
O agente antimicrobiano "ideal" será aquele que, entre outras características, tenha uma potente atividade contra o microrganismo que se pretende eliminar e, simultaneamente, não tenha qualquer ação prejudicial para as células do hospedeiro que o microrganismo referido infecto. Aplicasse-lhe o conceito de toxicidade seletiva, inicialmente proposto por Paul Ehrlich, e que pode ser alcançado quando se utilizam substâncias antimicrobianas que atuam em alvos estruturais ou metabólicos da célula.
 Um dos fatores que pode acarretar sérias implicações ecológicas e de saúde pública, devido à possibilidade de transferência de genes de resistência a patógenos humanos por meio do consumo exacerbado dos mesmos.
logo os antibióticos a serem liberados para uso ,será os mais simples, com tal efetividade relevante ,comparado com o disco no antibiograma.
	
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