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Bactérias Endofíticas como vetores de genes de resistência a insetos Bactérias Endofíticas como vetores de genes de resistência a insetos Dr. Alexandro Cagliari Professor adjunto de Biotecnologia GENÉTICA DE MICRORGANISMOS Santa Cruz do Sul, 23 de Outubro de 2014. David Gabriel dos Santos Fagundes Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia UERGS – Unidade Santa Cruz do Sul Unidade Santa Cruz do Sul INTRODUÇÃO ENDON PHYTON ENDÓFITO “Flora micótica que habita o interior dos tecidos das plantas.” DE BARY (IN STONE), 1986. “[...] fungos endófitos são apenas os colonizadores assintomáticos, ou seja, aqueles que não causam danos nem benefícios à planta. […] alguns desses fungos podem ser considerados mutualistas, já que eles conferem à planta algum grau de proteção contra herbívoros.” CARROLL, 1988 “Fungos ou bactérias que, por todo ou parte de seu ciclo de vida, invade os tecidos de plantas vivas e produz infecções assintomáticas e não visíveis dentro de todo o tecido da planta, não causando doença.” WILSON, 1995 “[...] todos os microrganismos que, habitando a superfície da planta fossem capazes de colonizar, pelo menos por algum período de seu ciclo de vida, os tecidos internos da planta, sem causar dano aparente ao hospedeiro.” PETRINI, 1991 Conceituação RELAÇÃO ENDOFÍTICA INTRODUÇÃO Bactérias endofíticas são aquelas que habitam os tecidos internos das plantas sem causar danos ou receber benefícios, que não seja a própria residência na planta. Conceituação Podem ser endossimbiontes Bactéria Hospedeiro INTERAÇÃO NA QUAL FUNGOS E BACTÉRIAS SÃO ENCONTRADOS NO INTERIOR DA PLANTA HOSPEDEIRA, NÃO INCITANDO SINTOMAS VISÍVEIS DE DOENÇA ENDÓFITOS NA PLANTA Instalação de um endófito no hospedeiro ✔Aberturas naturais e feridas; ✔Raízes; ✔Estômatos; ✔Aberturas causadas por insetos ou fungos; ✔Local de frutificação; ✔Podem entrar de forma ativa produzindo enzimas ou estruturas que facilitem essa penetração. SE DESLOCAM POR TODOS OS TECIDOS E PODEM SER TRANSMITIDOS POR SEMENTE OU PROPAGAÇÃO VEGETATIVA Ocorrência de microrganismos endofíticos Provavelmente todas as plantas possuem Uma mesma planta pode abrigar vários, incluindo bactérias e fungos Existem espécies bastante frequentes em determinado hospedeiro Já outras se apresentam em um amplo espectro de hospedeiro ENDÓFITOS NA PLANTA EFEITOS DOS ENDÓFITOS NA PLANTA Endófitos e controle biológico COMPETIÇÃO POR ESPAÇO E NUTRIENTES PRODUÇÃO DE TOXINASINDUÇÃO DE RESISTÊNCIA SISTÊMICA A necessidade da redução do consumo de agroquímicos tem aumentado o interesse por estratégias de biocontrole, que se utiliza de microrganismos com propriedades antagônicas aos patógenos e/ou com potencial de parasitar as pragas, características que são encontradas nos microrganismos endofíticos. EFEITOS DOS ENDÓFITOS NA PLANTA Endófitos e controle biológico de insetos Rhabdocline parkery infecta galhas formadas pelos insetos-praga em pinheiros pentencentes ao gênero Contarina matando suas larvas possívelmente através da produção de toxina. Beauveria bassiana protege plantas de milho contra o ataque de insetos. BING & LEWIS, 1993 Em algumas gramíneas a presença de fungos endofíticos reduz o ataque de insetos, como Spodoptera frugiperda e S. eridana. BREEN, 1993 Colmeiros são protegidos do ataque de coleópteros transmissores de doenças, através da presença do fungo endofítico Phomopsis oblonga. Endófitos e controle fitopatogênico Acremonium coenophialum, um endófito comumente encontrado em gramíneas tem efeitos inibitórios sobre vários patógenos; WHITE & COLE, 1985 Já o fungo endofítico Acremonium kilense esta relacionado com a proteção do tomateiro contra patógenos como Fusarium oxysporum, e Clavibacter michiganense; Bactérias do gênero Erwinia protegem plantas de soja contra a “queima bacteriana da soja”; O patógeno de Pinus Gremmeniella abietina é controlado por endófitos; Fusarium oxysporum atuando como endófito pode controlar nematóides. HALLMAN & SIKORA, 1996 Pelo menos 15 gêneros de bactérias endofíticas são capazes de controlar doenças fúngicas e bacterianas em culturas de interesse. EFEITOS DOS ENDÓFITOS NA PLANTA Endófitos e efeitos sobre herbívoros Miicrorganismos endofíticos, principalmente fungos podem causar toxicoses em herbívoros; Gado alimentando-se de certas gramíneas contendo endófitos desenvolvem sintomas como: ➔Diminuição do peso ➔Aumento da temperatura corporal ➔Gangrena ➔Morte Na Nova Zelândia, carneiros alimentados com Lolium perenne contendo fungos endofíticos, produtores de alcalóides, tiveram espasmos musculares e perderam a capacidade de manter-se de pé; A produção de alcalóides por A. coenophialum protege seu hospedeiro contra herbivoria. EFEITOS DOS ENDÓFITOS NA PLANTA ENDÓFITOS E BIOTECNOLOGIA Estratégias potenciais para o uso de endófitos Uso de bactérias entomopatogênicas naturais Microrganismos endofíticos como vetores de genes de interesse para o controle biológico de pragas Endófitos transgênicos para o controle biológico de pragas Possibilidade de combater patógenos que atacam o interior dos tecidos Baixa sobrevivência no solo Facilidade de introdução na planta Menor competição com outros microrganismos Facilidade de substituir o vetor de expressão mais rápido Propagação por sementes e/ou vegetativa ENDÓFITOS E BIOTECNOLOGIA Mercado crescente ENDÓFITOS E BIOTECNOLOGIA O uso de endófitos para a produção de produtos biotecnológicos de interesse é um mercado emergente, destacando-se alguns exemplos: INCIDE – Crop Genetics International ENDOPHYTE ENDOSAFE - Agricom EXEMPLO - cry Controle biológico utilizando cry ✔1 bilhão de dólares (2003) ✔95% do mercado mundial de biopesticidas; ✔Utilizado em plantas e microrganismos ✔Podem estar presentes em microrganismos da rizosfera de plantas DESVANTAGEM: COMPETIÇÃO COM OUTROS MICRORGANISMOS NA RIZOSFERA Bactérias endofíticas como vetores de expressão de cry RESULTADOS DAS PRIMEIRAS EXPERIÊNCIAS Gene cry1Ac em Clavibacter xyli subsp. Cynodontis injetadas no meristema de plantas de milho, diminuiram os danos causados por Ostrinia Nubilalis de 6,2 túneis e 19 cm por planta controle, para 2,8 túneis e 6,1 cm nas plantas inoculadas. LAMPEL et al., 1994 O mesmo experimento foi realizado em campo, e os resultados demonstraram uma queda de 65% à 79% no número de túneis por planta no segundo e terceiro ano do experimento. TOMASINO et al., 1995 Apesar da diminuição dos danos causados por O. Nubilalis, não houve diferenças significativas na produção de grãos entre as plantas inoculadas e não-inoculadas. Indicando possível estresse fisiológico das plantas devido a presença de Clavibacter xyli subsp. Cynodontis IMPORTÂNCIA DA UTILIZAÇÃO DE BACTÉRIAS ENDOFÍTICAS DE OCORRÊNCIA NATURAL EXEMPLO - cry A aplicação prática desses microrganismos tende a ampliar, à medida que os aspectos dessas interações forem sendo melhor compreendidos. Além disso, há também uma grande expectativa para o número de espécies de endófitos ainda desconhecidas presentes nas plantas, nos mais variados ambientes. CONCLUSÕES Slide 1 Slide 2 Slide 3 Slide 4 Slide 5 Slide 7 Slide 8 Slide 9 Slide 10 Slide 11 Slide 12 Slide 13 Slide 14 Slide 15
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