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Genética Bacteriana Francine Padilha – LBMAT 8824-2575 Bruno Humia – LBMAT 9191-0680 Genética Bacteriana É o processo de evolução biológica de todo organismo vivo, é produto de alteração em seu material genético. Material genético: o DNA; o RNA (vírus). Genética Bacteriana As bactérias possuem material genético, o qual é transmitido aos descendentes no momento da divisão celular. Este material genético não está contido dentro de um núcleo, portanto o genoma destes microrganismos está disperso no citoplasma. Organização do Genoma Bacteriano o O genoma bacteriano está condensado e organizado em uma estrutura denominada Nucleóide. o Nucleóide ou Cromossomo Bacteriano: constituído a maioria das vezes por uma única molécula de DNA fita dupla, circular, não delimitado por membrana nuclear, e é capaz de autoduplicação. Seus genes contém todas as informações necessárias à sobrevivência da célula. Vibrio cholerae Brucella melitensis EX: Algumas exceções - DNA linear (Ex: Borrelia burgdorferi e Streptomyces coelicolor). Genética Bacteriana Genoma: Informação genética contida em uma célula; Organizado em cromossomos; É o conjunto de genes de um organismo; Cromossomos: Estruturas contendo DNA, que transportam fisicamente a informação hereditária; Contêm os genes; Genes: Toda sequência nucleotídica necessária e suficiente para a síntese de um polipeptídeo ou de uma molécula de RNA estável. Genótipo X Fenótipo Genótipo: o Composição genética de um organismo; o Propriedades potenciais; Fenótipo: o Manifestação do genótipo; o Propriedades reais, expressas; Flagelo Ribossomos Nucleoide (DNA compactado) Envelope celular (membrana) Pili Célula procariótica (bactérias): Cromossomo único, circular fechado (na maioria das bactérias, ex: Escherichia coli) D N A B ac te ri an o Genética Bacteriana O DNA bacteriano é uma macromolécula em forma de dupla fita e circular; Apresenta a propriedade de replicação e transmissão das moléculas hereditárias durante a divisão celular; A replicação é semiconservativa. DNA – seus monômeros são os nucleotídeos Nucleotídeo Grupo Fosfato + Pentose + Base Nitrogenada Genética Bacteriana Genética Bacteriana DNA bacteriano se divide em: Cromossomal o Fita dupla circular; o 4.500 kb; o Informações essenciais; Extra-cromossomal (elementos móveis): o Plasmídeos; o Transposons; Cromossomo Plasmídeos 1KB = 1000 pb Estrutura do gene procarioto promotor Região codificadora Terminador promotor Terminador Regiões codificadoras OPERON Cistrons Opéron Triptofano Opéron Lactose (lac) Opéron lac x trp Gene eucarioto x Gene procarioto promotor Região codificadora Terminador OPERON promotor Terminador Regiões codificadoras Região codificadora promotor Sítio poliA X Intron Exon - Aproximadamente 20 a 30% dos genes estão em operons Características o Ausência de um complemento diploide de genes (mutações); o Uso de quase todo o genoma na codificação e na regulação; o Colinearidade dos genes e seus produtos proteicos; o Tendência de apresentar genes codificando funções relacionadas agrupados (operons); o Existência de elementos genéticos móveis (plasmídios e transposons); Colinearidade dos genes e seus produtos proteicos Uso de quase todo o genoma na codificação e regulação Elementos genéticos extracromossomais: Plasmídeos: Segmentos de DNA fita dupla, circulares ou linear; auto-duplicam independentemente do cromossomo. Carregam informação genética não essencial a célula, mas podem prover uma vantagem seletiva para as bactérias que os possuem. Ex.: genes de resistência múltipla a antibióticos; bacteriocinas; toxinas. o Fita dupla circular ou linear; o 2 a 200 kb; Plasmídeos Informações adicionais (não essenciais): o Fertilidade; o Resistência a antimicrobianos, íons e metais pesados; o Produção de bacteriocinas; o Produção de toxinas; o Utilização de carboidratos; Tamanho de 1 a 1000Kb Replicons Epissomos Elementos genéticos extracromossomais: Transposons: também chamados genes saltadores ou sequências de inserção (IS), são elementos genéticos móveis que podem transferir DNA dentro de uma célula, de uma posição para outra no genoma ou entre diferentes moléculas de DNA (plasmídio-plasmídio ou plasmídeo-cromossomo). Não se auto-duplicam. Transposons simples contém pares repetidos em sua extremidades e informações genéticas necessária para sua transferencia (ex: transposase). Transposons mais complexos carregam outros genes a mais. Alguns podem se inserir em regiões e inativar genes, outros podem proporcionar vantagens. Replicação do DNA Bacteriano Replicação do DNA Bacteriano As bactérias replicam por fissão binária, as células-filhas são geneticamente idênticas; Durante a replicação, a sequência dos nucleotídeos purina e pirimidina no DNA é copiada em duas moléculas-filhas de fita dupla; Cada uma delas é composta de uma fita da molécula-mãe e de uma fita complementar recém-sintetizada por um processo chamado replicação semiconservativa. Biologia do DNA Bacteriano Transcrição Durante a transcrição, é usada uma fita de DNA, a fita positiva para RNA mensageiro (RNAm) ; A enzima RNA-polimerase DNA-dependente liga- se à região promotora, uma sequência especial de nucletídeos na fita positiva; Transcrição As duas fitas de DNA são separadas, e uma fita de RNAm complementar é sintetizada; A transcrição para RNAm cessa quando a enzima alcança a sequência terminadora do gene. Os operóns podem ser indutíveis ou repressíveis. Uma abundancia dos produtos finais (proteínas ou RNA) de uma via pode sinalizar que a via deve ser interrompida ou reprimida por redução da síntese de suas enzimas. Biologia do DNA Bacteriano Tradução A informação codificada no RNAm é traduzida em proteínas no ribossomo pelo envolvimento de RNA transportador (RNAt); Cada molécula do RNAt tem uma trinca bases, o anticódon, que é complementar ao códon do RNAm. Biologia do DNA Bacteriano Tradução Cada trinca de RNAt transporta um aminoácido específico para o RNAm no ribossomo, onde os aminoácidos são ligados continuamente para formar uma cadeia polipeptídica; Após a ligação de dois aminoácidos, o RNAt do primeiro aminoácido é liberado do ribossomo; A síntese da cadeia de proteína para quando um códon sem sentido (nonsense) é encontrado pelo ribossomo. Biologia do DNA Bacteriano Resumindo... Variabilidade Genética em Bactérias As bactérias podem apresentar variações que conduzem à formação de clones com propriedades distintas do clone “selvagem” original. A variação se dá através de mutação ou recombinação. Mutação Alteração na sequência de nucleotídeos do DNA; Espontânea: erro da replicação do DNA ou pela exposição do microrganismos a fatores ambientais extracelulares – radiações; Induzida: produto de uma ação deliberada na qual o organismo é exposto à ação de um agente genotóxico. Mutações o Variações Fenotípicas Resultam das adaptações das bactérias ao ambiente. São reversíveis, sem comprometimento genético o Variações Genotípicas Alterações na sequência de nucleotídeos. São irreversíveis (através dos processos de mutaçãoe recombinação). Reprodução bacteriana A reprodução bacteriana pode ser classificada em dois grupos, quanto a ocorrência ou não de variabilidade genética. Na reprodução assexuada, não ocorre troca de material genético e por isso não há variabilidade. Já na reprodução sexuada ocorre troca de material genético e por consequência há variabilidade genética. Tipos de reprodução: a) Assexuada I. Bipartição (Divisão Binária Simples) b) Sexuada (recombinação) I. Conjugação II. Transformação III. Transdução Células filhas idênticas a célula mãe Não ocorre variabilidade genética RECOMBINAÇÃO Processo de variabilidade genética que envolve transferência de material genético entre duas células. MUTAÇÃO X RECOMBINAÇÃO Ocorre durante a replicação do cromossomo bacteriano Ocorre durante os processos de conjugação, transformação ou transdução Conjugação É o mecanismo de transferência de informações genéticas que requer contato entre as células. Esse intercâmbio implica na transferência de moléculas de DNA Extracromossômicas – Plasmídio. Divide-se em 04 estágios: formação de uma união específica doador-receptor (contato efetivo); preparação para transferência do DNA (mobilização); transferência do DNA; formação de um plasmídio funcional replicativo no receptor. Conjugação Ocorre quando duas ou até três bactérias se unem, normalmente, por uma ponte formada através das pili sexuais, sendo os plasmídeos passados de uma bactéria para outra. Transdução É o processo no qual o DNA bacteriano é transferido entre células mediadas por um vírus, podendo ser: - Transdução Generalizada - Transdução Especializada Transdução Figura 2: Trandução Transformação Processo no qual o DNA livre no meio é tomado pela célula bacteriana, resultando em alterações genotípicas. A transformação tem sido observada tanto em bactérias Gram-positivas quanto em Gram- negativas. Uma bactéria pode absorver DNA livre no meio ambiente, proveniente de outra bactéria morta, e inseri-lo ao seu material genético. Tamanho estimado dos genomas DNA Recombinante Engenharia genética; As metas primárias deste ramo são: o Isolamento de um gene particular; o Prudução de um RNA particular; o Melhoramento na produção; o Produção de plantas com características desejáveis; o Produção de organismos com características economicas; o Produção de vacinas; o Geneterapia. DNA Recombinante
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