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Profa. Dra Daniele Castilho Processos Biológicos Aula 18 Estrutura do gene e mecanismos de transcrição C G A T U C G A T U Estrutura do gene e transcrição Como ocorre o fluxo da informação genética?! Dogma central da biologia molecular Estrutura do gene e transcrição A TRANSCRIÇÃO e a TRADUÇÃO são as maneiras pelas quais as células leem, ou expressam, as instruções genéticas em seus genes Estrutura do gene e transcrição O primeiro passo executado pela célula para ler a informação contida no DNA é copiar a sequência de nucleotídeos correspondente a um determinado gene sob a forma de uma sequência de nucleotídeos de RNA TRANSCRIÇÃO DNA RNA Estrutura do gene e transcrição DNA vs. RNA Estrutura do gene e transcrição DNA vs. RNA RNA é fita simples e pode dobrar-se de diversas formas tridimensionais Estrutura do gene e transcrição Todo RNA de uma célula é produzido por TRANSCRIÇÃO do DNA A síntese de RNA ocorre dentro do núcleo Estrutura do gene e transcrição O processo de transcrição começa com a abertura e desenrolamento de um trecho de DNA para expor as bases de ambas as fitas do DNA. Uma das fitas da dupla hélice funciona como molde para síntese de uma molécula de RNA. O RNA produzido pela transcrição – o transcrito – possui uma sequência exatamente complementar à fita molde de DNA. Imediatamente após a síntese a cadeia de RNA é deslocada e a dupla fita de DNA se reassocia. O RNA será posteriormente processado Estrutura do gene e transcrição As enzimas que realizam a transcrição são chamadas de RNA polimerase, as quais catalisam as ligações fosfodiéster que ligam os nucleotídeos entre si para formar uma cadeia linear de RNA. A RNA polimerase move-se ao longo do DNA desespiralizando a dupla hélice e promovendo a síntese de uma nova fita simples de RNA no sentido 5’-3’. Os substratos para a síntese de uma nova fita de RNA são os nucleotídeos (A, C, U, G) Estrutura do gene e transcrição Estrutura do gene e transcrição O transcrito de RNA é quase idêntico à fita de DNA não-molde. Contudo, as fitas de RNA têm a uracila (U) em vez de timina (T), assim como uma ribose Estrutura do gene e transcrição CODIFICANTES RNA mensageiro (mRNA): transcrito de DNA com informação que dará origem a uma proteína NÃO CODIFICANTES Não codificam para uma proteína, mas são importantes no processo de transcrição RNA transportador (tRNA) RNA ribossomal (rRNA) Estrutura do gene e transcrição PROMOTOR é uma sequência especial de nucleotídeos que indica o ponto inicial para a síntese de RNA. Cada gene tem seu próprio promotor A RNA polimerase deve reconhecer onde começa e onde termina o processo de transcrição As sequências posicionam a polimerase no ponto certo para iniciar a transcrição Estrutura do gene e transcrição A RNA polimerase deve reconhecer onde começa e onde termina o processo de transcrição TERMINADOR é uma sequência que indica para a enzima ponto final da síntese de RNA Estrutura do gene e transcrição Em eucariotos a síntese de uma molécula de RNA é muito mais elaborada!!! Em eucariotos temos 3 tipos de RNA polimerase denominadas RNA polimerase I, RNA polimerase II e RNA polimerase II. A RNA polimerase I e III transcrevem genes que codificam RNAt, RNAr e smallRNA e a RNA polimerase II transcreve a grande maioria de genes que viram proteínas Para iniciar a transcrição a RNA polimerase II necessita da ajuda de uma ampla gama de proteínas chamadas de fatores de transcrição A iniciação da transcrição eucariótica precisa lidar com o DNA empacotado em nucleossomos! Estrutura do gene e transcrição Os fatores de transcrição ajudam a posicionar a RNA polimerase II corretamente no promotor e auxiliam na separação das fitas Estrutura do gene e transcrição Gene - procarioto Estrutura do gene e transcrição Gene - eucarioto Estrutura do gene e transcrição O RNA em eucariotos precisa ser processado. Quais são as etapas de processamento do RNA? PROCESSAMENTO PÓS-TRANSCRICIONAL CAPEAMENTO: A cap é uma guanina (G) modificada que é adicionada a extremidade 5’ A “capa” sinaliza a extremidade 5’ do RNA mensageiro em eucariotos. Reação de capeamento é realizada por 3 enzimas diferentes que estão ligadas a RNA polimerase II Estrutura do gene e transcrição O RNA em eucariotos precisa ser processado. Quais são as etapas de processamento do RNA? PROCESSAMENTO PÓS-TRANSCRICIONAL POLIADENILAÇÃO: uma enzima específica cliva o RNA, descarta a porção final e adiciona à extremidade 3' um número variável de adeninas (de 15 a 300). CAUDA POLI-A. A cauda poli-A auxilia e direciona a síntese de uma proteína no ribossomo Estrutura do gene e transcrição O RNA em eucariotos precisa ser processado. Quais são as etapas de processamento do RNA? PROCESSAMENTO PÓS- TRANSCRICIONAL Os genes dos eucariotos são caracteristicamente interrompidas por sequências que não-codificam para proteínas chamadas de ÍNTRONS Todas as sequências de ÉXONS e ÍNTRONS são codificadas no RNAm. Os íntrons são removidos do RNAm recém- sintetizado por meio de um processo chamado de SPLICING Estrutura do gene e transcrição SPLICING O splicing é realizado por pequenos RNAs nucleares (snRNAs) complexados com subunidades proteicas formando os snRNPs. Os snRNPs formam o chamado SPLICEOSSOMO Estrutura do gene e transcrição Alguns genes podem sofrer SPLICING ALTERNATIVO, levando à produção de diferentes moléculas de RNAm a partir de um mesmo gene Estrutura do gene e transcrição Estrutura do gene e transcrição O transporte do RNAm maduro para o citoplasma é extremamente seletivo, sendo fortemente associado ao processamento correto do RNA. Para estar ‘pronto para a exportação’ um mRNA deve estar ligado a um grupo apropriado de proteínas, inclusive aquelas que vão guiar o mRNA através do complexo do poro nuclear Estrutura do gene e transcrição Estrutura do gene e transcrição Estrutura do gene e transcrição ESTUDO DIRIGIDO 1) Indique e descreva as porções funcionais de um gene eucarionte. 2) Descreva quais são as modificações pós-transcricionais sofridas pelo mRNA eucarionte. 3) Explique porque a afirmação abaixo pode estar incorreta? “um gene codifica uma proteína Estrutura do gene e transcrição ESTUDO DIRIGIDO PLUS A figura abaixo mostra um mesmo trecho de DNA, só que em cada uma das situações os sítios de início e de término da transcrição se encontram em posições distintas: O que significam os termos promotor e finalizador desse esquema e quais seriam as funções dessas sequências que estão presentes nas moléculas de DNA? Determine quais serão as sequências transcritas das moléculas de RNA mensageiros (RNAm) para essas duas sequências. Não se esqueça de marcar as suas respectivas extremidades 5' e 3'. Estrutura do gene e transcrição A EXPRESSÃO GÊNICA é o processo pelo qual a informação codificada na sequência de DNA é traduzida em um produto que desencadeia um efeito determinado sobre uma célula ou organismo GENE
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