Espectroscopia e Espectrofotometria

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1.INTRODUÇÃO 
A espectroscopia é um campo de estudo que tem como objeto a interação da radiação com a matéria (SKOOG et al.). Em termos gerais a espectroscopia é definida como a relação de qualquer tipo de radiação eletromagnética com a matéria. Assim, toda manifestação perceptíveis aos olhos é um tipo de espectroscopia, do mesmo modo que outros fenômenos naturais que relacionam luz e matéria (OLIVEIRA,2001).
Os métodos espectroscópicos de análise tem como base o número de radiação emitida ou absorvida pelas espécies atômicas ou moléculas de interesse (SKOOG et al.). O que quer dizer que o arranjo molecular dos átomos para compor a forma geométrica da molécula influencia, tanto para a averiguação dos efeitos das transições dos elétrons, como também dos núcleos dos átomos componentes da estrutura molecular (OLIVEIRA,2001).
Os tipos de interação em espectroscopia envolvem transições entre diferentes níveis energéticos das espécies químicas. Outros tipos de interações, como a reflexão, refração, espalhamento elástico, interferência e difração são frequentemente relacionados com alterações das propriedades globais dos materiais do que com níveis energéticos de moléculas ou átomos específicos (SKOOG et al.).
Em análises fotométricas, é utilizado uma fonte de energia que incide radiação na faixa do UV-vísivel do espectro, ou seja num comprimento de onda entre 400 nm e 700 nm ((MENDHAM, 2002, apud OLIVEIRA, 2016). Os fotômetros são instrumentos de análise constituídos basicamente de uma fonte de energia radiante, luz, um monocromador ou seletor de comprimento de onda incidente sobre a amostra, em alguns casos, filtros de interferência são usados para isolar um comprimento de onda específico, um compartimento onde é colocado a amostra e um dispositivo para medir a atenuação da radiação incidente (Holler; Skoog; Crouch, 2009 apud OLIVEIRA,2016).
Através do espectro é possível ter a informação sobre a identidade da amostra, uma vez que cada composto difere de outro em função da composição química, ou seja, de diferentes átomos que o formam, além da geometria molecular. Deste modo pode-se analisar qualitativamente e quantitativamente a presença de um determinado composto químico, seja ele qual for ou o lugar onde se encontra (OLIVEIRA,2001).
A espectrofotometria visa determinar a concentração de uma substância, em condições bem definidas, pela medida da absorção de luz, tomando como referência a absorção da substância numa concentração conhecida. A principal vantagem desse método é de proporcionar um meio simples para determinar pequenas quantidades de substâncias (SAGIO et al., 2007 apud SILVA; SANTOS; BATISTUTI 2013).
Deste modo a espectroscopia possibilitou a descoberta de inúmeros elementos químicos, entre eles muitos dos elementos que correspondiam ás lacunas presentes na tabela periódica publicada por Dmitri Mendeleiev em 1869. Além dos lantanídeos que possuem uma separação extremamente difícil, foram identificados pela espectroscopia (FILGUEIRAS,1996).
O método por espectrofotometria na região do ultravioleta é muitos utilizado em ensaios de quantificação de fármacos. Na área de alimentos, métodos espectrofotométricos validados foram apresentados para a análise do teor de betacaroteno na cenoura; carotenoides totais em cereais e na margarina; teor de nitritos e nitratos em produtos cárneos e para a quantificação de amido em produtos cárneos (SILVA;SANTOS; BASTITUTI,2013).
2.OBJETIVO
Construção do espectro de absorção do Alaranjado de Metila e do Azul de Bromofenol e determinação da concentração desses compostos em uma amostra desconhecida através da Lei de Lambert-Beer. 
3.MATERIAL E MÉTODOS
3.1.Equipamentos e vidrarias
Espectrômetro com cubetas.
Pipetas graduadas de 5 mL.
Estande com tubos de ensaio.
3.2.Reagentes
Alaranjado de Metila 10 microgramas/mL
Azul de Bromofenol 10 microgramas/mL
3.3.Procedimento
A- Coleta de dados para a construção do espectro de absorção do Alaranjado de Metila e do Azul de Bromofenol.
Utilizou-se água destilada como referência, fez-se a leitura de absorbância do Alaranjado de Metila, nos seguintes comprimentos de onda: 400,420,440,460,480,500,520,550,600,650 e 700 nm. Posteriormente fez-se a leitura de absorbância do Azul de Bromofenol, nos seguintes comprimentos de onda: 400,440,490,520,540,565,580,590,620,660 e 700 nm.
B- Demonstração da lei de Lambert-Beer.
Preparou-se 6 tubos de ensaio, enumerados de 0 a 5, de acordo com a tabela 3.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os resultados recolhidos sobre o corante alaranjado de metila encontra-se na tabela 1. 
Tabela 1-Comprimento de onda, transmitância e absorbância do Alaranjado de metila. 
	ƛ (nm)
	Transmitância
	Absorbância 
	400
	0,127
	0,897
	420
	0,067
	1,176
	440
	0,041
	1,387
	460
	0,029
	1,535
	480
	0,037
	1,426
	500
	0,095
	1,024
	520
	0,312
	0,506
	550
	0,803
	0,095
	600
	0,968
	0,014
	650
	0,975
	0,011
	700
	0,977
	0,010
Tabela 2- Comprimento de onda, transmitância e absorbância do Azul de Bromofenol.
	ƛ (nm)
	Transmitância
	Absorbância
	400
	0,736
	0,133
	440
	0,895
	0,048
	490
	0,635
	0,197
	520
	0,356
	0,449
	540
	0,177
	0,752
	565
	0,059
	1,226
	580
	0,018
	1,740
	590
	
	2,010
	620
	0,326
	0,486
	660
	0,968
	0,014
	700
	0,953
	0,021
GRAFICO
Tabela 3- 
	Tubo (n°)
	Água (mL)
	Alaranjado 
de Metila
	Concentração obtida (µg/mL)
	Transmitância(T)
	Absorbância
(Abs)
	0
	5
	0
	0
	1
	0,000
	1
	4
	1
	2
	0,267
	0,573
	2
	3
	2
	4
	0,146
	0,834
	3
	2
	3
	6
	0,057
	1,242
	4
	1
	4
	8
	
	2,071
	5
	0
	5
	10
	
	2,035
	6
	5
	mL
	
	0,450
	0,347
REFERÊNCIAS 
FILGUEIRAS,C.A.L. A Espectroscopia e a Química da Descoberta de Novos Elementos ao Limiar da Teoria Quântica. Química Nova na Escola. N° 3 maio-1996.
Disponível em: http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc03/historia.pdf
OLIVEIRA,L.F.C. Espectroscopia Molecular. Cadernos Temáticos de Química Nova na Escola, N°4, p.24-30.maio,2001.
Disponível em: http://qnesc.sbq.org.br/online/cadernos/04/espect.pdf
OLIVEIRA,P.C.C;LEITE,M.A.P. Espectrofotometria no Ensino Médio: Construção de um Fotômetro de Baixo Custo e Fácil Aquisição. Experimentação no Ensino de Química, São Paulo-SP.BR,Vol 38, N° 2, p.181-184,maio 2016. 
Disponível em: http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc38_2/13-EEQ-58-14.pdf
SILVA,W.M;SANTOS,F.R;BATISTUTI,J.P. Válidação de um Novo Método Analítico para a Quantificação de Ácido Fólico por Espectrofotometria-UV. Alim.Nutr.=Braz.J. Food Nutr. Araraquara-São Paulo,vol.24,n.3, p 275-282, jul.set-2013.
Disponível em: http://serv-bib.fcfar.unesp.br/seer/index.php/alimentos/article/view/283/2758
SKOOG;WEST;HOLLER;CROUCH.Fundamentos de Química Analítica. Tradução da 8° edição norte-americana. Thomson, p.1-1026.