RELATÓRIO 4 QBA BLIGH E DYER

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS
FACULDADE DE FARMÁCIA
9,0
EXTRAÇÃO E DETERMINAÇÃO DE LIPÍDIOS POR BLIGH E DYER
Merita Pereira Gonçalves 
Profra. Dra. Virginia Farias Alves 
Turma A01
Trabalho No 4 como exigência da disciplina de Química e Bioquímica de Alimentos. 
GOIÂNIA, GOIÁS
JUNHO DE 2018
SUMÁRIO
	
1. 	REVISÂO…………………………………………………………………………….3
	
2. 	MATERIAIS E MÉTODOS………………………………………………………….4
	
	2.1. Materiais...................................................................................................4 		
		2.1.1. 	Reagente....................................................................................4 
	 	 2.1.2. Equipamentos............................................................................4	
		2.1.2. Amostra......................................................................................4
	
	2.2. Procedimentos.....................................................................................4
	
3. 	RESULTADOS……………………………………………………………………….5	
4. 	DISCUSSÃO	………………………………………………………………………....5
	
5. 	CONCLUSÃO………………………………………………………………………..6
	
6. 	REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………..….....7
	
	
REVISÃO
O gergelim (Sesamum indicum L.) é uma das dez principais oleaginosas do mundo e uma das primeiras espécies domesticadas pelo homem, tendo como principal produto a semente, com elevado valor nutricional para alimentação humana e propriedades medicinais. As sementes do gergelim são fontes de vitaminas (complexo B), ricas em minerais (cálcio, fósforo, magnésio, sódio, zinco e selênio), óleo (50%) composto por ácidos graxos insaturados (40% de oléico e 41% de linoleico) e substâncias antioxidantes como a sesamina, a sesamolina e o tocoferol que conferem resistência à rancificação (QUEIROGA et al., 2009). Diversos estudos recentes mostraram que o óleo de gergelim como responsável por numerosos benefícios á saúde humana. Destacamos o retardamento do envelhecimento celular, eliminando radicais livres e interrompendo assim processos de oxidação celular, inibindo em muitos casos o desenvolvimento de células cancerígenas, além da redução dos níveis de colesterol no sangue e da hipertensão o que consequentemente leva ao melhoramento do funcionamento do sistema cardiovascular (BURTON; TRABER, 1990; MIYAHARA et al., 2001; SANKAR et al., 2004). E Ainda segundo WERE et al. (2006), os efeitos observados na saúde têm sido atribuídos a composição química do óleo, caracterizado por nível baixo de ácidos graxos saturados e a presença de antioxidantes. E com o conhecimento crescente dos benefícios a saúde, a demanda de mercado do gergelim e do óleo provavelmente irá aumentar. Conforme LAGO et al. (2001), FRANCO (1970) e WEIS (1983) citado por MILANI & GODIM (2005) e EMBRAPA (2006), o óleo de gergelim possui grande resistência a rancificação por oxidação, devido à presença de substâncias antioxidantes naturais como sesamol, sesamolina e gama tocoferol. 
O gergelim contém um potente antioxidante denominado sesamol, que conforme estudo de SHARMA et al. (2012) melhorou uma série de parâmetros inflamatórios de ratos que receberam dieta para indução de síndrome metabólica, quando estes receberam 8mg/kg de sesamol. Os efeitos obtidos foram reduções dos níveis de Substâncias Reativas ao Ácido Tiobarbitúrico (TBARS), nitrotirosina, resistência à insulina, hiperinsulinemia, hiperglicemia, dislipidemia, fator de necrose tumoral-alfa (TNF-alfa), interleucina-6 (IL-6), leptina, resistina, sensibilidade à proteína C-reativa, transaminases hepáticas e fosfatase alcalina. Além de normalizar os níveis de adiponectina, óxido nítrico, pressão arterial, enzimas antioxidantes, esteatose hepática e deterioração dos hepatócitos. Além disso, o óleo das sementes é rico em ácidos graxos insaturados: oleico e linoleico (CARVALHO, et al., 2012). Seu óleo possui diversas funções fisiológicas, como a redução dos lipídios plasmáticos e melhorias da atividade antioxidante e biodisponibilidade de gama tocoferol, além de promover função anti-inflamatória e potencial ação estrogênica (SEDIGHEB et al., 2013).
A composição de lipídios da gergelim é favorecida pelo alto teor de ácidos graxos insaturados, dentre eles o linoléico que é considerado essencial para a nutrição humana, sendo também o mais abundante. Apesar dos efeitos benéficos dos lipídios, estes estão envolvidos na instabilidade do produto durante o armazenamento, devido a presença de enzimas hidrolíticas. (RUPOLLO et al., 2005). O presente experimento tem por objetivo a determinação de lipídios totais presentes na amostra de gergelim , através da utilização do método de Bligh & Dyer.
MATERIAL E MÉTODOS
2.1. MATERIAL 
 2.1.1. Reagentes
Clorofórmio p.a
Metanol p.a
Solução de sulfato de sódio 1,5% (1,5g de sulfato diluído em 100mL de água destilada)
Sulfato de sódio p.a (Na2SO4)
 2.1.2. Vidrarias e Equipamentos
Pipetas
Tubos de vidro de 250 x 25 mm, com tampa de rosca com teflon ou PVC (70 mL)
Proveta de 25 mL
Funil
Papel de filtro qualitativo
Agitador rotativo para tubos
Cadinho
Estufa a 105°C
Dessecador
 2.1.3. Amostra
Gergelim
2.2. Procedimento 
Pesou-se no tubo de rosca 2,5012 g de amostra (gergelim) finamente moída e homogeneizada e anotou-se o peso.
Adicionou-se exatamente 10 mL de clorofórmio, 20 mL de metanol e 8 mL de água destilada
Agitou-se no agitador rotativo por 30 minutos (lentamente).
Adicionou-se exatamente 10 mL de clorofórmio e 10 mL de solução de sulfato de sódio 1,5%.
Agitou-se vigorosamente por 2 minutos.
Deixou-se separar as camadas naturalmente por 1 hora e 30 minutos
 Succionou-se a camada metanólica superior e descartar. 
Adicionou-se ao papel de filtro 1g de Na2SO4 e filtrar a camada inferior (a solução deve ficar límpida) para uma proveta.
Mediu-se exatamente 5 mL do filtrado e transferiu-se para um cadinho (este deve ter sido seco anteriormente ao se colocou em estufa a 105ºC por 30 minutos, esfriar em dessecador, por 20 minutos e pesar o cadinho vazio). ATENÇÃO: não tocar o cadinho com as mãos após seco.
Evaporou-se o solvente em estufa a 105ºC por 45 minutos, esfriar o cadinho com amostra em dessecador por 20 minutos e pesar.
Anotou-se os pesos do cadinho vazio e do cadinho com a amostra. 
RESULTADOS
 3.1. Cálculos para a determinação da % de lipídios totais na amostra.
O peso dos lipídios foi calculado subtraindo-se o valor do béquer contendo a amostra do valor do Béquer vazio. Sendo assim:
Substituindo este valor na fórmula tem-se:
	Dessa forma, na amostra analisada estão presentes 56,165% de lipídios totais.
DISCUSSÃO
A extração de óleo com solvente é um processo utilizado para transferência de constituintes solúveis, como óleos de um material inerte para um solvente com o qual a matriz entra em contato. Os procedimentos clássicos idealizados por Soxhlet em 1879, onde a extração é realizada em solvente a quente e por muitas horas, favorece as reações de peroxidação e de hidrólise, podendo comprometer resultados analíticos posteriores, como a quantificação de certos componentes lipídicos (BRUM et al., 2009). 
O método de Bligh & Dyer utilizado no experimento é uma versão simplificada do procedimento clássico utilizando-se clorofórmio-metanol, um dos procedimentos de extração mais versáteis e efetivos, que supera as dificuldades do método de Soxhlet. A mistura de solventes oferece como vantagem a capacidade de extração de todas as classes de lipídios. Dependendo do tipo de tecido que será analisado, a escolha do método de extração influencia significativamente no resultado final (BRUM et al, 2009). 
O valor encontrada neste aula prática foi menor ao encontrado por ELLEUCH et al. (2007), para sementes de gergelim oriundas do Sudão valor para teor de óleo (52,24%) e foi superior ao encontrado por EPSTEIN (2000), avaliando a composição média de sementes da Bahia, encontrou valores de óleo de 49,1%.De acordo com ELIZANGELA et al., 2011, avaliando capacidade antioxidante e composição química de grãos integrais de gergelim creme e preto, encontrou valores de lipídio para gergelim creme (56,455%) e Gergelim preto (48,92%). 
Enquanto o valor (Antoniassi et al., 2013) determinou um teor de 55,98% (Barbalha), 49,64% (base úmida) utilizando o método de extração por soxhlet para extração com éter de petróleo.
CONCLUSÃO
gergelim recebido grande atenção por parte de médicos, nutricionistas, consumidores e entidades reguladoras devido às suas características nutricionais. Seu emprego na indústria alimentícia é amplo, o que exige qualidade na determinação de seus constituintes nutricionais.
Neste sentido, o estudo e o entendimento de métodos de extração e determinação não só de lipídios, mas também dos demais nutrientes, é de suma importância para avaliações nutricionais e de processamento.
A aula visa proporcionar o conhecimento necessário para análise de determinado produto, neste caso em específico gergelim, fazendo com que os alunos estejam preparados para enfrentar o mercado de trabalho, principalmente aqueles que desejam ingressar na vasta área de alimentos.
Dessa forma a realização da aula agregou muito no meu aprendizado, fato reforçado pela realização da mesma de maneira individual, fazendo com que fosse possível a detecção dos meus próprios pontos falhos e a consequente busca pelo aperfeiçoamento.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
ANTONIASSI, R.; ARRIEL, N.H.C.; GONÇALVES, E.B.; FREITAS, S.D.; ZONOTTO, D.L.; BIZZO, H.B. Influência das condições de cultivo na composição da semente e do óleo de gergelim. Revista Ceres, Viçosa, n° 3, 301-310, 2013.
AKBULUT M, ÇOKLAR H. Physicochemical and rheological properties of sesame pastes (tahin) processed from hulled and unhulled roasted sesame seeds and their blends at various levels. J Food Process Eng. 2008; 31: 488-02.
BURTON, G. W.; TRABER, M.G. Vitamin E: antioxidant activity, biokinetics, and bioavailability. annual Review of Nutrition. 10, 357-382,1990.
BRUM, A. A. S.; ARRUDA, L. F.; REGITANO-D’ARCE, M. A. B. Métodos de extração e qualidade da fração lipídica de matérias-primas de origem vegetal e animal. Quim. Nova, v. 32, n. 4, p.849-854, 2009.
CARVALHO, R.H.R.; GALVÃO, E.L.; BARROS, J.A.C.; CONCEIÇÃO, M.M.; SOUSA, E.M.B.D. Extraction, fatty acid profile and antioxidant activity of sesame extract (Sesamum indicum L.). Brazilian Journal of Chemical Engineering, v. 29, n.2, p. 409-420, abr./jun. 2012.
ELLEUCH, M; BESBES, S.; ROISEUX, O.; BLECKER, C.; ATTIA, H. Quality characteristics of sesame seeds and by-products. Food Chemistry, v. 103, p. 641-650, 2007. 
EPSTEIN, L. Cultura – Gergelim. SDA / DDA – SEAGRI – SALVADOR, Ago. 2000. Disponível em: < http://bahia.ba.gov.br/seagril/gergelim.htm#O%20óleo> Acesso em: 06/06/2018.
EMBRAPA. Gergelim - Apresentação do Produto. 2000. Disponível em:
<http://www.embrapa.br/produtos/gergelim > Acesso em: 06/06/2018.
LAGO, A. A.; CAMARGO, O. B. de A., SAVY FILHO, A. et al. Maturação e
produção de sementes de gergelim cultivar IAC-China. Pesquisa
agropecuária brasileira, Brasília, v. 36, n. 2, p. 363-369, fev. 2001.
MILANI, M.; GONDIM, T. M. Cultura do Gergelim, 2005. Disponível em:
<http://www.embrapa.br/produtos/gergelim> Acesso em: 06/06/2018.
MIYAHARA, Y., HIBASAMI, H., KATSUZAKI, H., IMAI, K., KOMIYA, T. Sesamolin
from sesame seed inhibits proliferation by inducing apoptosis in human
lymphoid leukemia Molt 4B cells. International Journal of Molecular Medicine,
v. 7, p. 369-371, 2001.
QUEIROGA, V.P.; GONDIM, T.M.S.; QUEIROGA, D.A.N. Tecnologias sobre operações de semeadura e colheita para a cultura do gergelim (Sesamum indicum L.). Revista Agroambiente, Boa Vista, v.3, n.2, p.106-121, 2009.
RUPOLLO, G. et al. Efeito da umidade e do período de armazenamento hermético na contaminação natural por fungos e a produção de micotoxinas em grãos de aveia. Ciênc. Agrotéc., v.30, n.1, p.118-125, 2006.
SHARMA, A. K. et al. Sesamol alleviates diet-induced cardiometabolic in rats via upregulating PPARγ, PPAR a and e-NOS. Journal of Nutritional Biochemistry, v. 23, n. 11, 2012, p.1482-1489, nov. 2012.
SEDIGHEH, A. et al. Antihyperlipidemic Effects of Sesamum indicum L. in Rabbits Fed a High-Fat Diet. The Scientific World Journal, v.2013, p. 5, 2013
SILVA, J. C. A.; FERNANDES, P. D.; BEZERRA, J. R. C.; ARRIEL, N. H. C.; CARDOSO, G. D. Crescimento e produção de genótipos de gergelim em função de lâminas de irrigação. Revista Brasileira de Engenharia Agrícola e Ambiental, v.18, n.4, p. 408–416, 2014.
YASUMOTO SS, KATSUTA M, OKUYAMA Y, TAKAHASHI Y, IDE T. Effect of sesame seeds rich in sesamin and sesamolin on fatty acid oxidation in rat liver. J Agric Food Chem. 2001; 49: 2647-51.
WERE, A. A.; ONKWARE, A., WELANDER, S. G. M.; CARLSSON, A. S. Seed oil
content and fatty acid composition in East African sesame (Sesamum
indicum L.) accessions evaluated over 3 years. Field Crops Research, v. 97, p.254–260, 2006.
	
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