aula 4. Amostragem e preparo da amostra

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Amostragem e preparo de 
amostra 
Biomedicina_2015.2 
Denise Sande 
24/08/2015 
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Conceitos 
• Amostragem: 
• A obtenção da porção, amostra, que é representativa do todo. 
• Deve ser uma estimativa exata e precisa do todo; 
 
• Obtidos com métodos corretos de amostragem. 
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Porque não trabalhar com o todo? 
• Impossível: população infinita ou muito grande: 
• Ex. areia da praia, população mundial. 
 
• Para reduzir custos e número de pessoal; 
 
• Para aumentar a velocidade dos resultados; 
 
• Minimizar perdas por medidas destrutivas: 
• Ex. dosagem de proteínas totais do chocolate requer digestão com 
ácido. 
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Conceitos 
 
 
 
• Amostragem são sucessivas etapas operacionais especificadas 
para assegurar que a amostra seja obtida com a condição de 
representatividade. 
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Plano de amostragem (P.A.) 
• Procedimento predeterminado para seleção, retirada, 
preservação, transporte e preparação de porções a serem 
removidas de um lote como amostras representativas 
 
• Plano de amostragem variam entre diferentes empresas e orgãos. 
 
• Considera os critérios de aprovação aplicados a um lote. 
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Plano de Amostragem 
• Categorias microbianos: 
• 3 CLASSES: 
• A = apenas deterioram o produto; 
• B = indicadores da possível presença de patógenos; 
• C = patógenos-doenças leves e são de difusão restrita. 
 
 
• 2 CLASSES: 
• A = patógenos-doenças leves, e difusão extensa; 
• B = patógenos-doenças graves. 
 
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Plano de Amostragem 
• 2 classes (2 cl): 
• Aceitável ou Inaceitável; 
• n, c, m; 
 
• 3 classes (3 cl ): 
• Aceitáveis, marginalmente aceitáveis e inaceitáveis; 
• n, c, m, M 
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Plano de Amostragem 
• Onde: 
• n= número de amostras/análises; 
 
• c= número máximo aceitável. Número de amostras que podem exceder 
o critério m 
 
• m=número máximo ou nível de relevância de bactérias por g. valores 
acima de m podem estar inaceitáveis (2 cl) ou marginalmente aceitáveis 
(3 cl); 
 
• M = separa alimentos de qualidade aceitável e inaceitável 
 
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Plano de Amostragem 
• Exemplo_ 2 classes: 
• Plano 1 – para pesquisa de Salmonella visando aceitação ou rejeição de 
lotes de alimentos: 
 n=5; c=0; m= 0 ufc/25g 
 
• Caso 1 – em 5 análises – todas são negativas = 
 
• Caso 2 - em 5 análises – pelo menos uma têm acima de “m” (0 ufc/25g) 
= 
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Plano de Amostragem 
• Exemplo_ 2 classes: 
• Plano 2 – para pesquisa de coliformes visando aceitação ou rejeição de 
lotes de alimentos: 
 n=5; c=2; m= 102ufc/g 
• Caso 1 – em 5 análises – 1 ou 2 têm até 102ufc/g = 
 
• Caso 2 - em 5 análises – acima de 3 têm acima de “m” (102ufc/g) = 
 
• Caso 3 - em 5 análises – pelo menos uma têm acima de “m” (102ufc/g) = 
 
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Plano de Amostragem 
• Exemplo_ 3 classes: 
• Plano 1 – para pesquisa de contagem total em placas, visando 
classificação da qualidade dos lotes em aceitável, marginalmente 
aceitável e inaceitável: 
 n=5; c=2; m= 105/g M= 106/g 
 
• Caso 1 – em 5 análises – até 2 amostras têm no máximo “m” (105/g) = 
 
• Caso 2 - em 5 análises – pelo menos uma têm acima de “M” (106/g) = 
 
• Caso 3 - em 5 análises – 1 ou 2 têm valor entre “m” e “M” = 
 
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Marginalmente aceitável 
Critérios para amostragem/ P.A. 
• Depende da finalidade da inspeção: 
• Aceitação/ rejeição; 
• Avaliação da qualidade; 
• Determinação de uniformidade. 
 
• Natureza do lote: 
• Tamanho; Sublotes; A granel; Embalado. 
 
• Natureza do material em teste: 
• Homogeneidade; 
• Tamanho unitário; 
• História prévia e custos. 
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Critérios para amostragem 
• Natureza do procedimento do teste: 
• Significância; 
• Procedimento destrutivo/ não destrutivo; 
• Tempo e custo de análises. 
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Características gerais da amostragem 
• A amostragem possui grande variância, aumentando o desvio 
padrão da análise; 
 
• Para melhorar a reprodutibilidade da análise, aumentar a 
precisão, deve-se melhorar a reprodutibilidade dos passos com 
maior variância AMOSTRAGEM. 
 
• A variância da amostragem relaciona-se com o tamanho da 
amostra: 
• Qt>a amostra; >a reprodutibilidade< a variância. 
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Características gerais da amostragem 
• Entretanto, o tamanho da amostra é limitado por: 
 
• Tempo; 
• Custo; 
• Método de amostragem; 
• Logística da manipulação; 
• Análise; 
• Processamento de dados. 
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Etapas de amostragem 
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Lote 
recipientes 
Amostra 
Bruta (AB) 
 
Amostra de 
laboratório 
 
Amostra de 
laboratório 
 
 p/ análise 
 
Etapas de amostragem 
• Coleta da amostra bruta: 
• Coleta no lote ou nos lotes do material. 
 
• Preparação da amostra de laboratório: 
• Redução da amostra bruta a um tamanho adequado ao trabalho do 
laboratório. 
 
• Preparação da amostra para análise: 
• Homogeneização, tomada de alíquotas e tratamento. 
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Coleta da amostra bruta 
 Réplica reduzida do universo considerado 
 
• Para amostras fluidas (homogêneas): 
• Coleta do alto, meio e fundo, após homogeneização. 
 
 
 
 
 
 
 
Agitar/ 
homogenizar 
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Amostra 
Bruta 
Coleta da amostra bruta 
• Para amostras sólidas (heterogêneas): 
 
• ≠ textura entre ingredientes/componentes; 
• ≠ densidade 
• ≠ Tamanho de partículas 
 
• Amostrados de vários pontos, devem ser moídos e misturados. 
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Quanto amostrar? 
• Quantidade suficiente para a realização de todas as 
determinações desejadas, após homogeneização e redução. 
 
 
• Depende de: 
• Precisão requerida no trabalho, 
• Tempo disponível; 
• Custo da amostragem. 
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tamanho da amostra bruta 
•A granel, caixa, lata ou outro recipiente: 
 
• Embalagens únicas ou pequenos lotes = todo o 
material deve ser tomado como amostra bruta. 
 
• Embalagens maiores (ex. saca de farinha): 
• 10 a 20% no nº de embalagens ou 5 a10% do peso total do 
alimento. 
 
• Lotes muito grandes: 
• N = c. √ n onde: 
 
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N= nº de unidades a serem coletadas; 
 
C= fator de homogeneidade 
 (c<1 homo/ c>1 heterogêneo) 
 
n=população total 
Coleta da amostra bruta - fiscal 
• Amostras para análises fiscais são coletadas em triplicata por 
FISCAIS; 
 
• Uma réplica fica em posse do detentor do produto para eventual 
contraprova.(CONTRAPROVA) 
 
• Duas vão para o laboratório para análise e perícia.(PROVA E 
TESTEMUNHA) 
 
 
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Legislação para coleta da amostra bruta 
• Recomendada pelo Codex alimentarius: 
• ISO 2859 
• ISO 3951 
• Brasileiras: 
• NBR 5426: 1985 
• NBR 5427: 1985 
 
 
 
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Amostra de laboratório 
• Redução da amostra bruta: 
 
• Alimentos secos : homogeneizar e retirar porção: 
• Processo manual (quarteamento) ou automatizado. 
 
• Alimentos líquidos: homogeneizados por agitação, inversão ou trocas 
repetidas de recipientes. Porções retirados do alto, meio e fundo. 
 
• Alimentos líquidos com gás são agitados para a retirada do mesmo 
 
 
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Amostra de laboratório 
• Alimentos semi-sólidos (chocolate e queijos duros): 
• Ralados, misturados ou quarteados. 
 
• Alimentos úmidos (carne e vegetais): 
• Picados ou moídos e misturados ou quarteados. 
 
• Alimentos pastosos (pudim, molhos) ou líquidos contendo sólidos 
(compotas, enlatados):• são picados em liquidificador. (cuidado com separação de fases – 
molhos). 
 
 
 
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Amostra de laboratório 
•Alimentos como emulsão (Manteiga e 
margarina): 
• Aquecidos à 35 C para posterior homogeneização. 
 
•Frutas: 
• Grandes: cortadas longitudinal e transversalmente 
(4 partes iguais – para “quarteamento”), em 
seguida as partes são homogeneizadas em 
liquidificador. 
 
• Pequenas: são homogeneizadas inteiras em 
liquidificador. 
 
 
 
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Amostra para análise 
•Desintegração: 
 
• Mecânica: moinhos (alimentos secos); 
processadores/liquidificadores (alimentos úmidos). 
 
• Química: dispersão e solubilização de componentes do 
alimento. 
 
• Enzimática: celulases (vegetais); proteases (solubilizar 
proteínas em alimentos). 
 
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Amostra para análise 
•Preservação: 
• Inativação enzimática – secagem, refrigeração / 
congelamento. 
 
• Controle do ataque microbiológico: congelamento, 
secagem, uso de conservantes químicos. 
 
• Controle contra oxidação lipídicas: adição de agentes 
antioxidantes, estocagem em baixa temperatura. 
 
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Problemas em amostragem 
• Obtenção de alíquotas representativas; 
 
• Perda de material; 
 
• Remoção de contaminantes da amostra sem remoção dos 
constituintes da amostra; 
 
• Modificações enzimáticas (antes e durante a amostragem); 
 
• Mudança na composição durante a moagem (componentes 
instáveis) 
 
• Contaminação. 
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Cuidados gerais 
• Acondicionamento imediato e adequado; 
 
• Lacres para evitar alterações deliberadas; 
 
• Rotulagem com identificação clara. 
 
• Transporte, armazenamento e manuseio em condições 
que evitem a adulteração. 
 
 
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Cuidados gerais 
•Uso do correto recipiente de amostragem: 
 
• Análise de metais – não pode ser de vidro; 
 
• Análise de pesticidas – não são usados frascos de 
plástico; 
 
• Alimentos higroscópicos, frituras, óleos – recipiente de 
vidro. 
• Frascos opacos – amostras sensíveis à luz; 
 
• Frascos hermeticamente fechados – amostras 
sensíveis à o2. 24/08/2015 31 
Obrigada! 
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