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CENTRO UNIVERSITARIO REDENTOR Graduação em Medicina Gabriela Braga Salete de Oliveira Pereira Maria Cândida Aula Pratica de Citologia: Noções Básicas de Microscopia Itaperuna 2017 Gabriela Braga Salete de Oliveira Pereira Maria Cândida Citologia: Noções Básicas de Microscopia Relatório de aulas pratica de Citologia realizadas no laboratório Do Centro Universitário Redentor. Disciplina: Citologia. Professor: Wagner Amado Itaperuna 2017 Introdução Para o estudo de Citologia, é de fundamental importância o uso do microscópio. Para adquirir conhecimento sobre células, sistema, tecidos, dessa forma é de extrema importância que o aluno conheça os fundamentos da microscopia, uma vez que o procedimento mais utilizado no estudo da Citologia é a preparação de laminas que serão analisados em microscópio. Para nossos estudos iremos utilizar o microscópio óptico que será descrito detalhadamente nos tópicos a seguir. Porém não é apenas o microscópio óptico que e utilizados para fins de pesquisas, temos outros tipos de microscópios. Microscópio de Fluorescência: Nesse tipo de microscópio, a luz ultravioleta e utilizada para iluminar as secreções de tecidos brilhantes sobre um fundo escuro. Esse tipo de microscópio é muito utilizado para se visualizar organelas. Microscópio Eletrônico de Transmissão: Seu funcionamento e baseado no principio que elétrons podem ser desviados por campos eletromagnéticos de uma maneira semelhante à refração produzida pela luz por lentes de vidro. Nesse tipo de microscópio não e necessário a utilização de corantes. A imagem resultante e sempre em preto e branco. Microscópio Eletrônico de Varredura: Consiste em um feixe muito pequeno de elétrons que são movidos de modo a varrer a secção do tecido. As fotografias resultantes desse microscópio são de fácil interpretação, pois possuem uma resolução tridimensional, fornecendo imagens em 3D das superfícies das células, tecidos e órgãos. Objetivos Mostrar aos alunos os tipos de Microscópio Funcionamento de um Microscópio Como manusear um Microscópio Ensinar ao aluno como se chama cada parte do Microscópio Ópitico Material e Métodos Primeiramente fomos apresentados ao Microscópio óptico, já que e ele que iremos utilizar durantes as aulas de Citologia. O Microscópio óptico utiliza a luz para a formação da imagem. A amostra utilizada deve ser antes preparada a partir da utilização de corantes que irão facilitar na visão. Esse tipo de microscópio nos da a ferramenta necessária para fazer diagnostico através da interpretação da amostra. A imagem e aumentada 100 vezes. Na Universidade Redentor os laboratórios constam com o Microscópio Óptico composto, que tem uma serie de lentes que fornecem um aumento muito maior. O microscópio óptico é formado por dois sistemas: o sistemas óptico e o sistema mecânico. Sistema Óptico Lentes Oculares: conjunto de lentes de aumento. Ampliam a imagem formada pela Lente Objetiva (será abordada a seguir). O aumento final da imagem é dado pela multiplicação do aumento da Lente Ocular (será abordada a seguir) pelo aumento da Lente Objetiva Lentes Objetivas: Captam a luz oriunda do condensador e formam uma imagem ampliada do abjeto, sendo fundamental para a distinção de detalhes durante a observação. São em número de quatro: panorâmica, pequeno aumento, médio aumento e maior aumento que pode também ser chamado de imersão. Esses aumentos são indicados por anéis coloridos: Vermelho: 4x Laranja: 10x Amarelo: 40X Azul: 100x A lente objetiva de 100x é também chamada objetiva de imersão e é somente utilizada com óleo especial, o qual permite maior refração da luz para dentro da lente objetiva, corrigindo a pouca luminosidade nas observações feitas em grandes aumentos. Condensador: Combinação de lentes que projeta a luz sobre o objeto. Situa-se entre a platina e a base. Diafragma ou Íris: Controla a passagem de raios luminosos. Fica acima do receptáculo do filtro e se liga a uma alavanca que permite sua abertura ou fechamento, levando ao controle da passagem total ou parcial da luz. Espelho: Reflete os raios emanados da fonte de luz Fonte de Luz: Se trata de uma lâmpada halogênica de intensidade graduada, situada aos pés do microscópio. Sistema Mecânico Parafuso macrométrico e micrométrico: Este situado na parte lateral do braço nele existe dois parafusos encaixados um no outro. O parafuso maior e chamado de Macrométrico, que permite grandes avanços ou recuo da platina em direção à lente objetiva. O parafuso menor e chamado de micrométrico e permite pequenos avanços ou recuos. Esse movimento da platina leva à focalização do material observado em diferentes aumentos. Base ou Pé: Estabiliza o microscópio sobre a bancada. E a peça que sustenta todas as outras. Braço ou Coluna: É a peça que liga a base até a parte superior do microscópio e onde se deve segurar o microscópio para ser transportado. Mesa ou Platina: Local onde se coloca a lâmina para observação. E composta por uma placa de metal com um orifício no centro, por onde passam os raios luminosos. O objeto que vai ser observado é colocado sobre uma lâmina de vidro e esta sobre a platina, exatamente em cima do orifício. Charriot: Movimenta a lâmina sobre a platina no plano horizontal (da frente para trás e da esquerda para direita, ou vice-versa) permitindo assim a observação de toda área da lâmina. E formado por uma presilha, dois botões giratórios e dois trilhos. Canhão ou Tubo: Cilindro que suporta os sistemas de lentes, localizando-se na extremidade superior a lente ocular e inferior ao revolver com as lentes objetivas. A distancia Interpupilar, ou seja, a distancia entre as lentes oculares pode ser regulado por um mecanismo existente no canhão. Revólver: E uma peça encontrada abaixo do canhão no qual se inserem varias lentes objetivas. É dotado de um movimento de rotação que permite posicionar a lente objetiva desejada. Lâmpada: fonte de luz. Manuseio do Microscópio Óptico Acender a Lâmpada do sistema de iluminação. Abrir totalmente o diafragma e colocar o sistema condensador e diafragma na posição mais aberta, pois e nessa posição que encontramos uma melhor iluminação. Girar o revólver, colocando em posição a lente objetiva de menos aumento. Por a lâmina em cima da platina e prenda-a com a presilha. Girar o revólver, colocando em posição á lente objetiva de 4x pois e a que tem menor aumento. Movimentar o Charriot, fazendo com que a lâmina fique em baixo da lente objetiva. Com o parafuso macrométrico, eleve a platina no máximo, observando que a lente objetiva não toque na lâmina. Focalize a preparação para a obtenção de uma imagem nítida, movimentando o parafuso macrométrico e abaixando a platina até que se possa visualizar a imagem. Para melhorar o foco basta regular apenas com o parafuso micrométrico. Coloque a região da lâmina que você precisa visualizar com maior aumento bem no centro do campo visual da lente. Gire o revólver, colocando em posição a lente objetiva de 40X que tem um aumento médio. Quando finalizar o uso do microscópio óptico deve-se seguir os seguintes passos: Diminuir ao máximo a intensidade da lâmpada e em seguida desligar a iluminação. Girar o revolver e deixar na lente objetiva de menor aumento Abaixar a platina e o condensador Retirar a lâmina da platina ou mesa Cubra o microscópio óptico com sua capa Deixar a mesa em ordem Conclusão A pratica foi muito importante para que possamos aprender a como utilizar o microscópio óptico, pois ele será um instrumento muito utilizado em nossas aulas. Referências JUNQUEIRA C.LUIZ,CARNEIRO JOSÉ. Histologia Básica. 11ª Ed Editora: Guanabara Koogan - Rio de Janeiro, RJ, 2008.
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