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Aula 2 - Ótica Microscópio 2 Slide Citologia

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Ótica do microscópio e 
qualidade da observação 
Citologia– aula 2 
Thaís Furtado Nani 
Universidade Federal de Lavras 
2012 
I. RESOLUÇÃO 
 Nitidez da imagem - riqueza de detalhes: 
 
 
1. Limite de Resolução (LR): pode ser determinada 
numericamente. Corresponde à distância entre os dois 
pontos, situados em um dado objeto observado para 
que eles apareçam individualizados em uma imagem 
formada; 
Limite de Resolução 
 
– LR = K .  
 AN 
 
– K é uma constante 0,612 
 
–  é o comprimento de onda luz, luz branca (verde-amarelo) 
550nm= 0,55 m 
 
– AN é a abertura numérica da lente objetiva 
 
– Cada objetiva possui um limite de resolução? 
 
Limite de Resolução 
 
• Ex: 
 
– Objetiva 100x: LR = K .  = 0,612. 0,55 = 0,27µm 
 AN 1,25 
 
 
 
– Objetiva 40x LR = K .  = 0,612. 0,55 = 0,52µm 
 AN 0,65 
 
 
1mm= 1000µm; 
1µm= 1000nm; 
1nm= 10°A (angstron) 
Limite de Resolução 
 
• Ex: O grão de pólen tem 50 µm 
Olho humano 
LR: 0,1mm 
ou 100 µm 
Microscópio de luz 
LR:0,2 µm 
Obj 100x 
Microscópio eletrônico 
LR:1-3 nm 
 
Olho humano 
LR: 0,1mm 
ou 100 µm 
Microscópio de luz 
LR:0,2 µm 
Obj 100x 
Microscópio eletrônico 
LR:1-3 nm 
 
 RELAÇÃO ENTRE PODER DE RESOLUÇÃO E 
LIMITE DE RESOLUÇÃO 
  LR  PR 
I. RESOLUÇÃO 
 Nitidez da imagem - riqueza de detalhes: 
 
 
1. Limite de Resolução (LR): pode ser determinada 
numericamente. Corresponde à distância entre os dois 
pontos, situados em um dado objeto observado para 
que eles apareçam individualizados em uma imagem 
formada; 
 
2. Poder de Resolução (PR): capacidade de distinguir o que 
existe entre dois pontos muito pequenos e muito 
próximos no objeto observado. 
 
Exercício 
 
Tamanho do pólen: 0,40 µm 
Condições: Objetiva 40x 
 Ocular de 10x 
 Luz branca 
 
LR: 0,52 
0,52 
Exercício 
 
Tamanho do pólen: 0,40 µm 
Condições: Objetiva 100x 
 Ocular de 10x 
 Luz branca 
 
LR: 0,27 
0,52 
0,27 
Ultra violeta 
LR = K .  
 AN 
LR = 0,61 x 0,55 nm = 0,51 m 
 0,65 
 
 
LR = 0,61 x 0,20 nm = 0,19 m 
 0,65 
 
 
Ultra violeta 
• Limite de Resolução 
 
 
 
 
 
 O limite e resolução é diretamente proporcional ao 
comprimento de onda e inversamente proporcional a 
abertura numérica. 
 
LR = K .  
 AN 
Aumento vazio 
Microscópio Ocular Objetiva AN AT $$ 
A 10x 100x 1,25 1000 Y 
B 25x 100x 1,25 2500 Y+R$1000,00 
Qual microscópio você compraria? 
Aumento vazio 
Microscópio Ocular Objetiva AN AT $$ 
A 10x 100x 1,25 1000 Y 
B 25x 100x 1,25 2500 Y+R$1000,00 
AT≤1000xAN 
oc x obj ≤1000x1,25 
oc x 100 ≤ 1000x1,25 
oc ≤ 12,5 
Aumento vazio 
• Quando é utilizada uma ocular com um 
aumento maior que o recomendado. Ela amplia 
tanto a imagem que rouba luz do sistema, 
sendo a observação prejudicada pela falta de 
luz. 
 PROFUNDIDADE DE CAMPO 
 Incapacidade das lentes de mostrar todos os 
planos da imagem 
DISTÂNCIA DE TRABALHO OU FOCAL 
 
 OBJ  DT

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