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insolúveis (FI). A fibra alimentar solúvel apresentam pectinas, beta-glicanas, gomas, e algumas hemiceluloses enquanto a fibra alimentar insolúvel apresentam lignina, pectinas insolúveis, celuloses e hemiceluloses. As duas classificações despertam interesse de profissionais nas áreas de nutrição e saúde, pois as fibras solúveis retardam o esvaziamento gástrico, a absorção de glicose e reduz o colesterol enquanto as fibras alimentares insolúveis aceleram o trânsito intestinal, aumentando o peso das fezes, contribuindo para a redução de risco de doenças no intestino (MATTOS; MARTINS, 2000; SAYDELLES et al., 2010). A composição e as propriedades físico-químicas das fibras são importantes, pois podem explicar a sua função nos alimentos. Essas informações podem ser aplicadas para a compreensão e melhoramento dos efeitos fisiológicos das fibras. Portanto, é importante que se tenha conhecimento do teor destes constituintes nos alimentos. Para isso pode-se efetuar algumas análises, como as utilizadas neste relatório. 3 2 OBJETIVOS 2.1 Objetivo Geral Conhecer e aplicar os métodos analíticos utilizados para determinação de carboidratos em biscoito tipo amanteigado de coco. 2.2 Objetivos Específicos Determinar as concentrações de açúcares redutores e totais, amido e fibra bruta em amostras de biscoito tipo amanteigado de coco, de uma marca comercial; Comparar os resultados obtidos com os dados fornecidos na embalagem do produto, na literatura e na legislação vigente; Analisar a variabilidade dos resultados obtidos entre os grupos e intra-grupo. 4 3 MATERIAL E MÉTODOS 3.1 Obtenção da Amostra A amostra bruta obtida foi o biscoito tipo amanteigado de coco, da marca Bauducco, em embalagem multipack de 355 g, cujos ingredientes de sua formulação são: farinha de trigo enriquecida com ferro e ácido fólico, açúcar, gordura vegetal, coco ralado, soro de leite, açúcar invertido, sal, fermentos químicos (bicarbonato de sódio (INS 500ii), bicarbonato de amônio (INS 503ii) e pirofosfato dissódico (INS 450i)), estabilizante (lecitina de soja (INS 322)) e aromatizante. Os valores nutricionais apresentados na embalagem do produto são mostrados na Tabela 1. Tabela 1. Informação nutricional do biscoito tipo amanteigado de coco, da marca Bauducco Informação Nutricional – Porção: 30 g (4 ½ unidades) Quantidade por porção %VD(*) Valor energético Carboidratos Proteínas Gorduras totais Gorduras saturadas Gorduras trans Gorduras monoinsaturadas Gorduras poliinsaturadas Colesterol Fibra alimentar Sódio 131 kcal = 550 kJ 20 g 2,8 g 4,5 g 1,7 g 0 g 0,7 g 0,8 g 0,6 mg 0,8 g 115 mg 6% 7% 4% 8% 8% ** ** ** 0%* 3% 5% * % Valores Diários de referência com base em uma dieta de 2000 kcal ou 8400 kJ. Seus valores diários podem ser maiores ou menores dependendo de suas necessidades energéticas. ** Valor Diário não estabelecido. A amostra de laboratório foi obtida triturando-se o biscoito e foi mantida em recipiente fechado e local fresco, seco e a temperatura ambiente até a realização das análises. 5 3.2 Determinação de Açucares Redutores e Totais 3.2.1 Material e Equipamentos Frascos erlenmeyer de 250 e 125 mL; Balões volumétricos de 250 e 100 mL; Pipetas de 5, 10 e 25 mL; Chapas aquecedoras; Buretas de 25 mL e suporte; Banho-maria a 68-70 ºC; Funil de buchner; Papel de filtro; Bomba de vácuo; Kitasato; Pipeta de Pasteur; pHmetro; Papel vermelho congo; Balança analítica; Espátula. 3.2.2 Reagentes Solução de Fehling A [Sulfato cúprico (CuSO4) + Ácido Sulfúrico (H2SO4)]; Solução de Fehling B [Tartarato duplo de sódio e potássio decahidratado + Hidróxido de sódio (NaOH); Solução de acetato de zinco 1 M; Solução de ferrocianeto de potássio 0,25 M; Solução de glicose a 1%; Solução de azul de metileno 1%; Ácido clorídrico (HCl) concentrado a 0,1 N; Hidróxido de sódio (NaOH) a 40% e 0,1 N. 6 3.2.3 Métodos 3.2.3.1 Padronização da Solução de Fehling Transferiu-se a solução de glicose a 1% para uma bureta de 25 mL. Preparou-se o licor de Fehling, em um erlenmeyer de 250 mL, adicionando-se alíquotas de 5 mL de cada uma das soluções de Fehling e 40 mL de água destilada. Agitou-se bem. Posteriormente, aqueceu-se o licor de Fehling até a fervura, quando, então, o mesmo foi titulado com 2 mL da solução de glicose a 1% presente na bureta. Deixou-se ferver novamente e adicionou-se 3 gotas da solução de azul de metileno. Reiniciou-se a titulação, gota a gota, até o ponto final ser atingido e anotou-se o volume gasto. O ponto de viragem é determinado quando a cor azul de metileno desaparece e a solução sobrenadante fica incolor, deixando ver mais claramente o precipitado vermelho tijolo do óxido cuproso. A análise foi realizada em triplicata e sempre sob aquecimento, não ultrapassando o tempo máximo de 3 minutos. 3.2.3.2 Açúcares Redutores (AR) em Glicose Pesou-se 5 g da amostra previamente homogeneizada em um béquer de 150 mL e transferiu-se para um balão volumétrico de 250 mL, completando o volume com água destilada. Filtrou-se a solução, com papel de filtro, para um frasco seco e neutralizou-se o filtrado com solução de NaOH ou HCl 0,1 N, gota a gota, usando para tanto um pHmetro. A fim de eliminar possíveis interferentes, clarificou-se a amostra com 5 mL de acetato de zinco 1 M e, em seguida, retirou-se o excesso com 5 mL de ferrocianeto de potássio 0,25 M. Filtrou-se a vácuo e o filtrado foi denominado de solução A. Transferiu-se a solução A para uma bureta de 25 mL. Então, prepararam-se 2 licores de Fehling: um com 5 mL de cada uma das soluções de Fehling e outro com 2 mL. Em ambos adicionou-se 40 mL de água destilada. Agitou-se bem. O licor foi titulado sob aquecimento conforme descrito no item 3.2.3. A análise foi realizada em quadruplicata para o licor com 5 mL de cada uma das soluções de Fehling e uma única vez para o licor de 2 mL. 7 3.2.3.3 Inversão da Sacarose para Determinação de Açúcares Totais (ART) e Açúcares não Redutores (ANR) em Sacarose Pipetou-se 10 mL da solução A, preparada no item 3.2.4, passando para um balão volumétrico de 100 mL. Adicionou-se 5 mL de HCl concentrado (para realização da hidrólise ácida), e levou-se em banho-maria (68-70ºC) durante 10 minutos. Decorrido esse tempo, esfriou-se rapidamente em banho de gelo. Adicionou-se um pedaço de papel indicador vermelho congo ao balão e neutralizou- se com solução de NaOH a 40% até que a coloração do papel mudasse de violeta para vermelho. Então, completou-se o balão com água destilada e a solução foi denominada de solução B. Transferiu-se a solução B para uma bureta de 25 mL, preparou-se o licor de Fehling com 2 mL de cada uma das soluções de Fehling e 40 mL de água destilada e, portanto, o mesmo foi titulado sob aquecimento conforme descrito no item 3.2.3. A análise foi realizada em triplicata. 3.3 Determinação de Amido 3.3.1 Material e Equipamentos Cápsulas de porcelana; Provetas de 20 e 100 ml; Balões volumétricos de 100 e 500 ml; Béquer de 400 ml; Balão de titulação; Bureta de 25 ml, pipetas de ml; Frasco erlenmeyer de 500 ml; Autoclave; Banho-maria; Funil de vidro. 8 3.3.2 Reagentes Éter; Álcool a 70% e