Aula parasitologia Toxoplasmose

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Toxoplasmose:Diagnóstico e Tratamento
Toxoplasma gondii
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Diagnóstico clínico
Muito difícil, pois a infecção humana pelo coccídeo é, na maioria das vezes, benigna, assintomática. 
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Diagnóstico clínico
Toxoplasmose ganglionar
Toxoplasmose em imunodeprimidos
Toxoplasmose ocular
Toxoplasmose em gestantes
Toxoplasmose congênitas
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Diagnóstico laboratorial
Diagnóstico parasitológico
Observação do coccídeo em amostras de sangue, líquido cefalorraquidiano, saliva, escarro, medula óssea, cortes de placenta e infiltrados (cutâneos, do baço, fígado músculos e especialmente de gânglios linfáticos)
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Diagnóstico laboratorial: parasitológico
Punção da amostra, 
Injetar intraperitonialmente em camundongos albinos (grupos de 4 a 6)
Analisar o exsudato peritoneal dos animais (6 a 10 dias depois)
Reinoculações
Exame negativo: animais se mantém vivos após 6 semanas
 
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Diagnóstico laboratorial: parasitológico
Exame histopatológico (músculo, fígado gânglios)
Semeadura do material infeccioso em cultura de tecido. (embrião de galinha, fibroblastos humanos)
Após 4 dias, coloração(Leishman e Giemsa) e observação
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Reação de Neutralização de Sabin
Inoculação do parasita na pele dorsal de coelhos 
Zona eritemapapular ou papulonecrótica neutralizada por Ac presentes no soro do paciente
Não é usada atualmente pois não distingue toxoplasmose-doença de infecção sem atividade
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Reação de Sabin-Feldman
Teste do corante ou dye test
Pesquisa de Ac no sangue, através da incubação do sangue do paciente em meio contendo toxoplasmas do exsudato peritoneal de camundongos, corados com azul de metileno em meio alcalino (pH11)
Sem o Ac o parasita fica intensamente corado, arredondados e ovóides 
Com Ac, apenas o núcleo se cora e ficam delgados, falciformes
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Reação de Fixação de Complemento
Utiliza-se Ag diversos (suspensão de cérebro de coelho, ovos embrionados, exsudato peritoneal de camundongo ou cultura de tecidos)
Reação positiva=não hemólise das hemácias de carneiro conjugadas com Ac preparados em coelhos (hemolisina) frente ao soro humano
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Reação de Hemaglutinação Indireta
Placas de microtitulador de Takatsy, com orifícios em forma de V.
Teste positivo tapete de hemácias de aves aglutinadas (presença do Ac com as hemácias sensibilizadas)
Teste negativo(ausência de Ac) hemácia sedimentadas, botão de hemácias
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Provas de imunofluorescência
Ag taquizoítos + soro=incubação +antianticorpo (anti-IgG ou Anti-IgM) fluorescente (isotiocionato de fluoresceína), aspecto esverdeado, na ausência de Ac o Ag aparece vermelho. 
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Reação indireta em placas de plástico contendo Ag adsorvidos + Soro problema (Anti-Ig marcadas com uma peroxidase forma um polímero intensamente colorido)
Leitura visual ou no espectofotômetro 
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Todos os métodos podem detectar IgG. A permanência de cistozoítos produz um estímulo antigênico durante a vida toda. 
A coleta de duas amostras deve ser realizada, principalmente em gestantes. 
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Diagnóstico laboratorial
Imunológico
Métodos de ELISA e imunofluorêscencia são os mais utilizados
IgM – infecção aguda positivo de 8 a 12 dias após a contaminação, pico em 1 mês, negativando-se em 2 a 8 meses.