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CARACTERIZAÇÃO DAS PROTEÍNAS

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REITORIA DE GRADUAÇÃO 
ENFERMAGEM 
 
 
ELIZABETH DE ARAÚJO PRAXEDES 
HELOÍSA HELENA DE MEDEIROS SILVA 
JACIARA MELO DO NASCIMENTO NUNES 
ZORILDE ADRIANA RODRIGUES ALBUQUERQUE 
 
 
 
CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS 
Prática 1 - Caracterização de ovo albumina 
Prática 2- Precipitação salina do ovo-albumina 
Prática3- Precipitação por ácido 
 
 
 
 
 
NATAL 
2010 
 
 
 
 
 
 ELIZABETH DE ARAÚJO PRAXEDES 
HELOÍSA HELENA DE MEDEIROS SILVA 
JACIARA MELO DO NASCIMENTO NUNES 
ZORILDE ADRIANA RODRIGUES ALBUQUERQUE 
 
 
 
CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS 
Prática 1 - Caracterização de ovo albumina 
Prática 2- Precipitação salina do ovo-albumina 
 Prática3- Precipitação por ácido 
 
 
 
 
Relatório solicitado pelo curso de enfermagem da 
.......................sobre a caracterização de 
proteínas, para nota na disciplina de processos 
biológicos. 
 
ORIENTADOR: 
 
NATAL 
2010 
 
 
 
 
 
 
 
OBJETIVOS 
 
Esse relatório tem como finalidade a caracterização de proteínas, 
através de diferentes métodos, como caracterização do ovo albumina, 
caracterização por precipitação salina e por fim, a precipitação por ácido. 
Analisando assim, as cores resultantes de cada procedimento. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
SUMÁRIO 
 
 
1 INTRODUÇÃO...........................................................................................05 
2 CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS......................................................06 
2.1 PRÁTICA 1 - CARACTERIZAÇÃO DA OVOALBUMINA..........................06. 
2.1.1 Procedimento experimental.................................................................06 
2.1.2 Resultados e discussões.....................................................................07 
2.2 PRÁTICA 2 - PRECIPITAÇÃO SALINA DA OVOALBUMINA...................08 
2.2.1 Procedimento experimental..................................................................08 
2.2.2 Resultados e discussões......................................................................09 
2.3 PRÁTICAS 3- PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDO.............................................09 
2.3.1 Procedimento experimental...................................................................09 
2.3.2 Resultados e discussões.......................................................................10 
3 CORES DOS EXPERIMENTOS....................................................................11 
4 QUETIONAMENTOS.....................................................................................12 
5 CONCLUSÃO.................................................................................................13 
6 REFERÊNCIAS..............................................................................................14 
 
 
5 
 
INTRODUÇÃO 
 
 
A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações 
especificas com determinados reativos, os quais originam substâncias 
coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação. 
Dentre os métodos utilizados, situa-se o método do biureto, que é 
baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo do biureto), 
com proteínas e peptídeos (no mínimo tripeptídeos). O nome do método 
provém do fato de que a uréia aquecida dará reação positiva, com 
desprendimento de amônia. 
O método da precipitação protéica que envolve supressão de cargas 
sobre a superfície protéica pelos íons do sal de carga oposta, a eliminação do 
invólucro de água em torno da molécula protéica. Os íons do sal altamente 
hidrofílicos passam a competir com as cargas protéicas pelas moléculas da 
água, resultando na desidratação das moléculas protéicas causando a 
precipitação. E por fim, a precipitação por ácido, onde ocorre a desnaturação e 
precipitação de proteínas positivamente carregadas. Alterando assim a 
estrutura das proteínas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
6 
 
 
 CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS 
 
 
PRÁTICA 1-CARACTERIZAÇÃO DA OVOALBUMINA 
 
Essa prática tem como objetivo identificar ligações peptídicas 
através de testes colorimétricos. 
 
1-Procedimento experimental 
 
a) Materiais utilizados: 
 
 Tubos de ensaio; 
 Água destilada; 
 Uréia; 
 Ovoalbumina; 
 Hidróxido de sódio (NaOH); 
 Sulfato de cobre (CuSo4); 
 Pipetas graduadas; 
 Aquecedor elétrico. 
 
b) Procedimentos 
Numeramos os três tubos de ensaio de 1 a 3. 
No tubo 1,colocamos 2 ml de água destilada; 
No tubo 2,colocamos uma pequena quantidade de uréia (com a 
ponta da espátula), aquecemos brandamente e adicionamos 2ml de água 
destilada; 
No tubo 3, colocamos 2ml de solução de ovoalbumina, e por fim, 
adicionamos o reativo de biureto em cada tubo (5 gotas de hidróxido de sódio e 
5 gotas de sulfato de cobre), aguardamos alguns segundos e agitamos.vale a 
pena salientar que quando colocamos as primeiras gotas de hidróxido de sódio 
7 
 
não observamos nenhuma cor, porém quando adicionamos 5 gotas de sulfato 
de cobre, foi essencial para que as cores surgissem, identificando assim as 
cores. 
 
Observamos os seguintes resultados: 
 
 
 
 
2 - Resultados e discussões 
 
Nesse experimento podemos observar que o primeiro tubo ficou azul 
pelo fato da mistura de água destilada com o reativo de biureto,como o cobre 
em suas reações desenvolve uma cor azul, aqui não seria diferente, a água 
com o cobre ficaria azul. 
O segundo tubo ficou rosa, pois dependendo da complexidade da 
proteína ou dos peptídeos em questão, a cor do produto da reação na 
presença do biureto varia substancialmente, sendo assim, proteínas dão 
colocaração violeta como no tubo 3, e os peptídeos dão coloração rosa, como 
tubo 2. 
A intensidade da cor depende exclusivamente da concentração de 
proteínas. Para que a reação de biureto seja positiva, há necessidade da 
8 
 
presença de pelo menos duas ligações peptídicas na molécula. Como por 
exemplo, o tubo de ensaio 3. 
 
PRÁTICA 2 - PRECIPITAÇÃO SALINA DA OVOALBUMINA 
 
Essa pratica tem como objetivo caracterizar a proteína por saturação salina. 
 
1 - Procedimento experimental 
 
a) Materiais utilizados: 
 Ovoalbumina; 
 Sulfato de amônia (75%); 
 Hidróxido de sódio (2,5N); 
 Sulfato de cobre; 
 Tubos de ensaio; 
 Pipetas graduadas; 
 Funil; 
 Papel filtro; 
 Garra de madeira. 
 
b) Procedimentos: 
Utilizamos um tubo de ensaio e colocamos 5ml de solução de 
ovoalbumina lentamente.Adicionamos 10 ml de solução de sulfato de amônia a 
75%, também de forma lenta, até que todo o conteúdo estivesse no tubo. 
Misturamos por inversão suavemente. 
Aguardamos 10 minutos, e filtramos para um novo tubo de ensaio. 
Com o filtrado obtido, fizemos a reação de biureto: Pipetamos 2 ml 
do filtrado para um outro tudo de ensaio e adicionamos o reativo de biureto 
(5 gotas de hidróxido de sódio e 5 gotas de sulfato de cobre). 
 
9 
 
2-Resultados e discussões: 
 
 
Na precipitação salina, o tubo ficou azul negativa: Azul por causa do 
sulfato de cobre e negativa por não conter duas ligações peptídicas, pois houve 
o filtramento da proteína. 
 
 
PRÁTICA 3 - PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDO 
 
Essa pratica, tem como objetivo caracterizar a proteína por 
desnaturação. 
 
1- Procedimento experimental 
a) Materiais utilizados: 
 
 Ovoalbumina; 
 Solução ácida (HCl)10 
 
 Tubos de ensaio; 
 Pipetas graduadas. 
 
 
 
b) Procedimentos: 
Utilizamos um tubo de ensaio e colocamos 5 ml de solução 
ovoalbumina lentamente. Adicionamos 3 gotas de ácido lentamente e já 
pudermos observar a mudança na estrutura da proteína. 
 
2- Resultados e discussões: 
 
 
11 
 
As proteínas são compostas por 4 estruturas especificas:Estrutura 
primária, secundaria terciária e quartenária. A desnaturação da proteína ocorre 
quando se rompe sua estrutura terciária. Quando a proteína foi submetida ao 
ácido clorídrico, ocorreu o rompimento das ligações peptídicas e ou a perda da 
estruturas terciária. Dessa maneira ocorreu uma alteração na estrutura, 
tornando sua função praticamente inerte. Ficando assim, com esse aspecto 
branco. 
 
CORES DOS EXPERIMENTOS 
 
 
 
Prática 1: 
Tudo 1:Azul 
Tubo 2: Rosa 
Tubo 3:Violeta 
 
Prática 2:Tubo 4: Azul 
 
12 
 
 
Prática 3: 
Tubo 5:Branco 
 
QUESTIONAMENTOS 
 
 
1) Qual o objetivo de realizar a reação do biureto com a uréia 
aquecida e com a ovoalbumina? 
 
Resposta: O objetivo de realizarmos a reação de biureto com a 
uréia aquecida é o fato de o biureto ser um composto que se forma pela 
condensação de moléculas de uréia com liberação de uma molécula de 
amônia. Esta condensação ocorre pelo aquecimento. Esse composto em 
contato com o sulfato de cobre em meio alcalino desenvolve uma coloração 
violeta. Sendo fundamental para a visualização das proteínas. Usamos o 
ovoalbumina para identificarmos as proteínas presentes, através da sua 
coloração, pois este alimento é rico em proteínas, sendo fácil a visualização. 
 
2) Explique o que você observou na experiência 2. O que ficou retido 
no papel filtro? 
 
Resposta: Observamos que ao filtrar o ovoalbumina com o sulfato 
de amônia a 75%, o experimento ficou uma cor clara opaca, porém ao 
adicionarmos a reação de biureto, ele mudou de cor, para um azul negativo. 
O componente retido no papel foi o ovoalbumina. 
 
3) Por que a reação de biureto foi negativa para o filtrado obtido? 
 
Resposta: Porque ao filtrar a substância, a ovoalbumina ficou retida 
no papel filtro, sendo assim o líquido resultante do filtrado ficou negativo, pelo 
fato de não conter as duas ligações peptídicas. 
 
13 
 
 
 
CONCLUSÃO 
 
 Com esse relatório concluímos que existem diferentes métodos para 
identificar as proteínas como pela saturação salina, reação de biureto e até 
pela precipitação por ácido, através da desnaturação, podemos fazer esse 
último método em casa de forma simples e prática, através da clara do ovo e 
algum tipo de ácido. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
14 
 
 
REFERÊNCIAS 
 
 
Reação de caracterização de proteínas. Disponível em 
http://www2.ucg.br/cbb/professores/19/Nutricao/Bioquimica/Reacao%20de%20
Biureto.pdf, acesso em 3 de setembro de 2010. 
 
Experimentos de química. Disponível em 
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/reacoes_cor
adasdois.htm acesso em 3 de setembro de 2010. 
 
WILSON, Roberto. Biologia atual. 13 º Ed.1995

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