Relatório de aula prática - Manobras assépticas em microbiologia

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1.INTRODUÇÃO 
 
Quando se trata de experimentos microbiológicos ou qualquer tipo de 
procedimento o qual possa ocorrer contaminação por meio de 
microrganismos, é estritamente necessária a prática de manobras 
assépticas, que são uma série de procedimentos que têm como função 
principal evitar a contaminação tanto do manipulador quanto da mostra 
dos equipamentos em questão. Esses procedimentos são de grande 
importância para a análise de alimentos, para verificar quais e quantos 
microrganismos estão presentes e para se reconhecer as condições de 
higiene em que o alimento foi preparado. Neste experimento foram 
realizadas práticas para o aprendizado de manobras assépticas na 
manipulação e também para verificar a presença de microrganismos no 
ambiente. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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2.OBJETIVOS 
 
Realizar manobras assépticas em laboratório para conhecer 
procedimentos necessários para esterilizar e manter tanto o ambiente de 
trabalho quanto o instrumentos utilizados livres o máximo de 
microrganismos indesejáveis a fim de reconhecer a importância de sua 
utilização na manipulação de microrganismos, no preparo do meio de 
cultura para o crescimento dos mesmos. 
 
 
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3.INSTRUMENTOS 
 
 
Instrumentos apresentados e/ou utilizados nas práticas: 
1. 1 Estante. 
2. 1 Placa de Petri com meio de cultura ágar EMB; 
3. 2 Placas de Petri com meio de cultura ágar Nutrientes; 
4. 2 Tubos de ensaio com tampa de rosca vazios e estéreis; 
5. 2 Tubos de ensaio com tampa de encaixe contendo água peptonada 
estéril; 
6. 1 Tubo de ensaio contendo ágar inclinado; 
7. 1 Tubo de ensaio contendo Escherichia coli cultivada; 
8. 2 Swab; 
9. 1 Agulha de Platina; 
10. 1 Alça de platina; 
11. 1 Bico de Bulsen; 
12. 1 Pipeta de Pasteur; 
13. 1 Pipetador; 
14. 1 Caneta permanente preta. 
 
 
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4.PRÁTICA 1 
 
 Instrumentos utilizados na prática 1: 
 
1. 1 Pipetador; 
2. 1 Pipeta de Pasteur; 
3. 2 Tubos de ensaio com tampa de rosca vazios e estéreis; 
4. 2 Tubos de ensaio com tampa de encaixe contendo água peptonada 
estéril; 
5. 1 Estante. 
6. 1 Bico de Bulsen; 
 
 
 Procedimento: 
 
Foi acesso o Bico de Bunsen, e pego a pepita de Pasteur acoplada ao 
pepitador para ser introduzida no tubo de ensaio previamente 
flambado que continha a água peptonada, pepitou-se uma quantidade 
5 ml e se inseriu no outro tubo de ensaio previamente flambado vazio 
e estéril. O tubo de ensaio foi fechado e identificado. Todo o 
procedimento foi realizado próximo ao campo aonde foi acesso o Bico 
de Bunsen. Foi realizado este procedimento duas vezes. 
 
 
 
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5.PRÁTICA 2 
 
 Instrumentos utilizados na prática 2: 
 
1. 1 Alça de platina; 
2. 1 Bico de Bulsen; 
3. 1 Tubo de ensaio contendo Escherichia coli cultivada; 
4. 1 Placa de Petri com meio de cultura ágar EMB; 
5. 1 Estante. 
 
 
 Procedimento: 
 
Foi acesso o Bico de Bunsen, e pego a Alça de platina e foi exposta a 
chama por alguns minutos, depois foi retirado a Alça de platina da 
chama e esperado alguns segundos para que ela esfriasse. Quando a 
Alça de platina esfriou ela foi introduzida no Tubo de ensaio que 
continha Escherichia coli cultivada, foi pego alguma quantidade da 
cultura com a alça e foi introduzida na Placa de Petri com meio de 
cultura ágar EMB, depois a placa foi fechada e identificada e alça foi 
novamente flambada. Todo o procedimento foi realizado próximo ao 
campo aonde foi acesso o Bico de Bunsen. 
 
 
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6.PRÁTICA 3 
 
 Instrumentos utilizados na prática 3: 
 
1. 1 Bico de Bulsen; 
2. 1 Alça de platina; 
3. 1 Tubo de ensaio contendo ágar inclinado; 
4. 1 Tubo de ensaio contendo Escherichia coli cultivada; 
5. 1 Estante. 
 
 
 Procedimento: 
 
Foi acesso o Bico de Bunsen, e pego a Alça de platina e foi exposta a 
chama por alguns minutos, depois foi retirado a Alça de platina da 
chama e esperado alguns segundos para que ela esfriasse. Quando a 
Alça de platina esfriou ela foi introduzida no Tubo de ensaio que 
continha Escherichia coli cultivada, foi pego alguma quantidade da 
cultura com a alça e foi introduzida no Tubo de ensaio previamente 
flambado que continha Escherichia coli cultivada, depois o tubo foi 
fechado e identificado e alça foi novamente flambada. Todo o 
procedimento foi realizado próximo ao campo aonde foi acesso o Bico 
de Bunsen. 
 
 
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7.PRÁTICA 4 
 
 Instrumentos utilizados na prática 4: 
 
1. 2 Placas de petri com meio de cultura ágar Nutrientes; 
2. 1 Swab; 
3. 1 Caneta permanente preta. 
 
 
 Procedimento: 
 
Foi aberto uma placa de petri com meio de cultura ágar nutrientes e 
exposta no ambiente por alguns segundos, depois a placa foi fechada e 
identificada. Depois foi aberta outra placa de petri com meio de cultura 
ágar nutrientes que foi dividida ao meio com um caneta permanente 
preta na parte de baixo da placa (base), foi pego um swab e passado na 
tela de um celular e depois passado em um dos lados da placa dividida, 
depois foi passado os dedos de um dos integrantes do grupo no outro 
lado da placa dividida. A placa foi fechada e identificada. 
 
 
 
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8.RESULTADOS & DISCUSSÕES 
 
 Prática 1: 
Após observar os tubos contendo água peptonada que foi transferida, 
foi constatado que os mesmos encontravam-se límpidos de acordo 
com o esperado, confirmado que foram seguidas as manobras 
assépticas. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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 Prática 2: 
Após observar a placa de petri com meio de cultura EMB em que foi 
introduzida a Escherichia coli, foi constatado que houve pouco 
crescimento de E. coli e pode ter ocorrido crescimento de outros 
microrganismos na placa como por exemplo bacilos entéricos e 
gêneros da família Enterobacteriaceae, visto que o meio também 
favorece seu crescimento, as manobras assépticas não foram seguidas 
corretamente por essa razão o resultado não foi o esperado. Isto revela 
que é muito importante a atenção no manuseio dos utensílios no 
momento do experimento, para que não tenhamos resultados falsos. 
 
 
 Prática 3: 
Após observar o tubo de ensaio com meio de cultura ágar nutrientes 
inclinado, foi constado que houve crescimento de Escherichia Coli 
como esperado, confirmado que foram seguidas as manobras 
assépticas. 
 
 
 
 
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 Prática 4: 
Após observar a placa de petri com meio ágar nutrientes aberta e 
exposta ao ambiente, observou-se crescimento de microrganismo em 
grande quantidade, tamanhos diversos e colorações esbranquiçadas e 
amareladas. Após observar a outra placa de petri com meio ágar 
nutrientes que foi dividida ao meio, observou-se no lado em que o 
swab foi passado no celular crescimento de colônias arredondadas, 
muito esbranquiçadas e em grande quantidade, já no outro lado em 
que foi passado a mão de um dos integrantes foi observado 
crescimento de colônias de formato irregular, coloração turva 
amarelada e esbranquiçada. Pode ter ocorrido crescimento do 
Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, visto que o meio também 
favorece seu crescimento. Isto revela o quão grande número de 
microrganismos estão ao nosso redor, e o quão necessário é ter 
práticas de higiene tanto de utensílios pessoais como no caso do 
aparelho celular, que é manuseado diversas vezes durante todo dia, e 
também nas mãos para que assim evitemos contaminações. O meio 
onde estamos também pode propiciar o crescimento dos 
microrganismos, levando em conta a temperatura do ambiente,a 
umidade e a sua composição, fatores que juntos podem propiciar o 
crescimento de diferentes tipos de microrganismos, como foi 
observado. 
 
 
 
 
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9.CONCLUSÕES 
 
 Com os resultados obtidos, pode-se concluir que estamos 
cercados por microrganismos que podem vir a afetar, 
negativamente, nossos experimentos e materiais. E, essa 
contaminação, se não previamente diagnosticada, poderá 
causar, uma falsa análise, um falso laudo. Por isso, também, é 
necessário obedecer todas aquelas manobras assépticas citadas. 
Foi obtido sucesso na maioria das práticas, mas as falhas nos 
processos também foram importantes para que pudéssemos 
entender a importância da realização de manobras assépticas, e 
o cuidado no manuseio dos utensílios. Concluímos também o 
quão fácil é a contaminação, e por isso criar e obedecer a 
métodos que previnam ou eliminem a contaminação dos 
alimentos se faz muito necessário no âmbito da nutrição. 
 
 
 
 
 
 
 
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10. REFERÊNCIAS 
BIBLIOGRÁFICAS 
 
Franco, Bernadette Dora Gombossy de Melo. Microbiologia dos 
alimentos, Atheneu 2004. 
http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/microbiologia/mod_4_2004.p
df 
http://www.bioexpress.com.br/cont.php?id=74&secao=8&sub=22