Aula microbiologia Clínica Enterococcus e Mycobacterium

Prévia do material em texto

Tatiana Elias Colombo 
2013 
Enterococcus 
• “Cocos entéricos” 
• Cocos Gram positivos dispostos aos pares e cadeias 
curtas (Similaridade com Streptoccus pneumoniae) 
Enterococcus – Características gerais 
• Anaeróbios facultativos 
• Crescimento ideal a 35ºC 
• Meio ágar sangue de carneiro enriquecido possibilita o 
crescimento de Enterococos, com grandes colônias 
colônias aparecendo após 24 horas de incubação 
Enterococcus – Características gerais 
• Bactérias entéricas, habitualmente isoladas de fezes 
coletadas de humanos e diversos animais 
• Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium: 
encontrados no intestino grosso e no trato genitourinário 
• Os enterococos não são geralmente isolados à partir do 
trato respiratório ou da pele 
• Muitas infecções humanas por enterococos se originam 
da microbiota intestinal do paciente (consumo de água e 
alimento contaminado) 
Enterococcus – Características gerais 
• Resistentes a muitos dos antibióticos comumente 
utilizados 
* Patógenos hospitalares mais temidos nos anos 90 
• Em pacientes tratados com antibióticos de amplo 
espectro, os enterococos que fazem parte da microbiota 
são capaze de proliferar e causar doença 
(septicemia/endocardite) 
 
Enterococcus – Características gerais 
• Crescimento rápido em meios não-seletivos (ágar sangue) 
• Apesar de poderem se assimilar a S. pneumoniae em amostras 
coradas por Gram (cocos Gram positivos dispostos em pares), os 
organismos podem ser facilmente diferenciados com base em 
reações bioquímicas: resistência à optoquina 
Enterococcus – Diagnóstico laboratorial 
• Diferenciação entre Enterococcus faecalis e 
Enterococcus faecium 
Enterococcus – Diagnóstico laboratorial 
• Tratamento difícil!!! 
• A resistência nestas cepas aos aminoglicosídeos e à 
vancomicina é particularmente problemática, porque é 
mediada por plasmídeos e pode ser transferida a outras 
bactérias 
Enterococcus – Tratamento 
• Antimicrobianos de uma nova geração foram 
especificamente desenvolvidos para tratar enterococos 
resistentes à ampicilina e vancomicina: Linezolida e 
Fluoroquilonas 
 
*A eficácia a longo prazo destas drogas ainda não está 
determinada! 
Enterococcus – Tratamento 
Tatiana Elias Colombo 
2013 
Mycobacterium 
• Bactérias ácido-álcool resistentes 
• Parede celular complexa, rica em lipídeos (ácido 
micólico) – responsável por muitas das propriedades 
características destas bactérias 
Mycobacterium – Considerações gerais 
• Patógeno intracelular capaz de estabelecer uma 
infecção por toda a vida do hospedeiro 
• Agente etiológico da Tuberculose 
• A doença se dissemina pelo contato próximo pessoa-a-
pessoa através da inalação de aerossóis infecciosos 
(bacilo da tuberculose nos espaços alveolares 
estabelecendo a infecção) 
Mycobacterium tuberculosis 
Mycobacterium tuberculosis – Diagnóstico 
laboratorial 
Teste da tuberculina 
Microscopia 
Cultura 
Identificação bioquímica 
Sondas de DNA 
• Pequena quantidade de derivado proteico purificado (PPD) é 
aplicada por via intradérmica. A substância é purificada para 
prevenir o desenvolvimento da tuberculose no paciente em que se 
está fazendo o teste, mas ainda pode reagir no paciente que tem a 
doença. 
 
Avaliação da imunidade celular: Teste da tuberculina 
• Após 72-96 horas: se o local da aplicação tornar-se vermelho e 
inchado com um nódulo (pápula) duro é muito provável que o 
paciente tenha tuberculose 
• Esse teste serve apenas de triagem, pois caso positivo serão 
necessários vários outros exames como radiografia torácica, cultura 
e exame direto (BAAR) e exames imunológicos, para confirmar o 
diagnóstico 
• Pacientes que tomaram a vacina BCG podem apresentar 
resultado positivo, por isso é importante a confirmação por 
outros métodos. 
 
Teste da tuberculina 
• Detecção microscópica de bactérias ácido resistentes em espécime 
clínicos é a forma mais rápida de confirmar a doença por 
micobactérias. 
• Coloração de Ziehl-Neelsen 
a. Preparar um esfregaço homogêneo, delgado 
b. Deixar secar a temperatura ambiente 
c. Fixar o material do esfregaço passando 3 a 4 vezes pela chama do 
bico de Bunsen 
d. Cobrir a totalidade da superfície do esfregaço com solução de 
fucsina de Ziehl concentrada 
Microscopia 
e. Deixar agir por cerca de 5 minutos, aquecendo brandamente 
utilizando a chama do bico de Bunsen, passando lentamente por baixo 
da lâmina, até que se produza emissão de vapores e, quando estes 
são visíveis, cessar o aquecimento (3 emissões sucessivas) 
f. Lavar em água corrente para eliminar a Fucsina 
g. Cobrir toda a superfície do esfregaço com a solução de Álcool-ácido 
h. Lavar em água corrente 
i. Cobrir toda a superfície do esfregaço com solução de Azul de 
metileno durante 30 segundos a 1 minuto 
j. Lavar em água corrente e secar a lâmina em TA ou na estufa a 37ºC 
 
Coloração de Ziehl-Neelsen 
Coloração de Ziehl-Neelsen 
Manual de Bacteriologia da Tuberculose – Ministério da 
Saúde / FNS / CENEPI / CNPS / Centro de Referência Prof. 
Hélio Fraga – 2ª Edição Revisada e Ampliada – 1994. 
• Observar ao microscópio com objetiva de imersão (100x) 
• Amostras respiratórias coletadas no início da manhã (3 dias 
consecutivos) 
• Crescimento in vitro de micobactérias é lento – pode ser 
obscurecida por bactérias de crescimento rápido que normalmente 
colonizam as pessoas 
• Amostras como escarro são tratadas inicialmente com um reagente 
descontaminante (NaOH 2%) para remover os organismos que 
poderiam confundir os resultados 
*Cuidado! A descontaminação estendida a amostra destrói as 
micobactérias. 
 
Cultura 
• Meios de cultura com gema de ovo em sua composição (Lowestein-
Jensen) 
• Detecção de Mycobacterium tuberculosis é demorada 
*Introdução de caldos de cultura formulados para contribuir com o 
rápido crescimento da maioria das micobactérias 
*Assim o tempo médio para o cultivo de micobactérias foi reduzido de 
3 a 4 semanas para 10 a 14 dias 
Cultura 
• Micobactérias de crescimento lento são resistentes à 
maioria dos antibióticos usados para tratar outras 
infecções bacterianas 
• Em geral, os pacientes devem tomar múltiplos 
antibióticos por um longo período (6 – 9 meses). 
Mycobacterium tuberculosis – Tratamento