Coloração de Gram e Prova da Catalase

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AULA PRÁTICA DE MICROBIOLOGIA
COLORAÇÃO DE BACTÉRIAS PELO MÉTODO DE GRAM
Material:
- Esfregaço bucal
- Lâminas bem limpas
- Swab 
- Solução fisiológica
- Bateria de Gram: cristal violeta, lugol, álcool-acetona, fucsina.
Técnica:
1. Com o auxílio do swab, fazer esfregaços bem finos sobre a lâmina de microscopia. Esperar secar.
2. Fixar os esfregaços, passando a lâmina três vezes sobre a chama do bico de Bunsen.
3. Deixar a lâmina esfriar e cobrir os esfregaços com a solução de cristal violeta. Esperar 1 minuto.
4. Escorrer a violeta genciana e cobrir os esfregaços com lugol. Esperar 1 minuto.
5. Escorrer o lugol e descorar os esfregaços pelo álcool-acetona. Para isto, deixe o álcool cair, gota a gota, sobre a lâmina, mantendo-a inclinada.
6. Lavar a lâmina em água corrente.
7. Cobrir os esfregaços com a solução de fucsina, esperar de 30 segundos a 1 minuto.
8. Lavar a lâmina em água corrente. Secar com auxílio de papel de filtro.
9. Observar ao microscópio. 
Lâmina
Forma:________________
Gram:_________________
Lâmina
Forma:________________
Gram:_________________
PROVA PARA IDENTIFICAÇÃO DE BACTÉRIAS – PROVA DA CATALASE
PRINCÍPIO 
A catalase é uma enzima que decompõe o peróxido de hidrogênio (H2O2) em água e oxigênio.
UTILIDADE 
Para Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria, Corynebacterium, Micrococcus, Bacillus, Moraxella catarrhalis.
INOCULAÇÃO
Colocar uma gota de peróxido de hidrogênio (água oxigenada) 3% sobre uma lâmina; 
Com auxílio de uma alça, agregar a colônia em estudo na gota de peróxido de hidrogênio.
INTERPRETAÇÃO 
+ Positivo: Presença imediata de bolhas - a produção de efervescência indica a conversão do H2O2 em água e oxigênio gasoso.  
- Negativo: Ausência de bolhas ou efervescência.