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Aula 1 Introdução a Microbiologia Prof. Fabrício Campos Agosto 2017 Universidade de Brasília Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária Disciplina de Microbiologia Veterinária - Código: 161837 1 2 Pré-requisito Não Não Não Não Não Não Não Não SIM Não SIM SIM Não Não Não SIM Pré-requisitos da disciplina de Microbiologia Veterinária Microbiologia não tranca muitas disciplinas, mas a carga horária pode tranca-las Resumo da disciplina de Microbiologia Veterinária - FAV/UnB (2017/1) • 30 aulas teóricas e 15 práticas • 2644 slides e 309 mensagens principais • 264 espécies de bactérias; 99 espécies de fungos, pseudo-fungos ou algas; e 144 espécies de vírus ou doenças causadas por príons • 1 trabalho de aula prática e 5 provas com 84 questões 3 4 Média 6,35 pontos 76% > 5,00 24% < 5,00 Notas da 1ª Prova (2017/1) 5 Média 5,23 pontos 58% > 5,00 42% < 5,00 Notas da 2ª Prova (2017/1) 6 Média 5,64 pontos 68% > 5,00 32% < 5,00 Notas da 3ª Prova (2017/1) Notas da 4ª prova (prática) (2017/1) 7 Média 4,78 pontos 69% > 4,00 31% < 4,00 Notas do trabalho + prova prática (2017/1) 8 80% > 5,00 20% < 5,00 Situação após a 4ª prova (2017/1) 9 43% aprovados 57% reprovados Resultado da 5ª Prova (2017/1) Média: 4,84 39% > 5,00 61% < 5,00 Semestre 2017/1 11 73% aprovados (19% > 7,00) 1o SS 27% reprovados Cuidem as faltas!!! Nota da prova substitutiva 12 Fonte: http://www.google.com/imghp O Jackalope, no folclore, diz-se ser um cruzamento entre uma jackrabbit (lebre) e um antílope (daí o nome jackalope) Rabbit is infected by the cottontail papilloma virus (CRPV), also known as Shope papilloma virus, which causes tumours to grow on or near the animal's 13 Fonte: http://www.google.com/imghp Nós comemos e respiramos microrganismos 14 Fonte: http://www.google.com/imghp 15 Fonte: http://www.google.com/imghp Fonte: Suttle, 2005 Biomassa Abundância Procariotos Protistas Vírus • Demonstrar a importância dos microrganismos para vida Diversidade Efeitos benéficos Como patógenos Objetivo da aula 16 • Definição • Classificação dos seres vivos • Histórico da microbiologia • Tipos de microscópios • Níveis de Biossegurança Escopo da aula 17 Definição 18 • Microrganismos: formas de vida diminuta individualmente muito pequenas para serem vistas a olho nu • Bactérias, fungos (leveduras e fungos filamentosos), protozoários, algas microscópicas e vírus Definição Bactérias Fungos Algas Vírus 19 • Seres unicelulares com capacidade de replicação, exceto os vírus Conceitos 20 • Microbioma: conjunto de microrganismo presentes em determinado habitat • Bacterioma: conjunto de bactérias presentes em determinado habitat • Viroma: conjunto de vírus presentes em determinado organismo • Não se utiliza mais: flora, micróbio, germe Viroma Fonte: Wylie et al., 2012 21 • Definição • Classificação dos seres vivos • Histórico da microbiologia • Tipos de microscópios • Níveis de Biossegurança Escopo da aula 22 Classificação dos seres vivos • Reino Animalia • Reino Plantae • Haeckel (1884) Reino Protista Reino Plantae Reino Animalia • Copeland (1956) Reino Mychota (procariontes) Reino Protista Reino Plantae Reino Animalia • Wittaker (1969) Reino Monera (procariontes) Reino Protista Reino Plantae Reino Animalia Reino Fungi 23Fonte: http://simbiotica.org/reinos.htm • Margulis (1988) -Prokarya Bacteria -Eukaria Proctotista (protozoários/algas) Fungi Plantae Animalia • Woese (1990) Domínio Bacteria Domínio Archea Domínio Eukarya • Mayr (1990) Domínio Prokariota Subdomínio Eubacteria Subdomínio Archea Domínio Eukarya Reino Plantae Reino Fungi Reino Animalia 24 Classificação dos seres vivos Três domínios: 1. Bacteria (as paredes celulares contêm peptideoglicano) 2. Archaea (as paredes celulares não possuem peptideoglicano) 3. Eukarya: • Protista (fungos gelatinosos, protozoários e algas) • Fungi (leveduras, bolores multicelulares e cogumelos) • Plantae (musgos, samambaias, coníferas e plantas) • Animalia (esponjas, vermes, insetos e vertebrados) 25 Classificação “atual” dos seres vivos A árvore da vida 26 • Onde estão vírus? • Por que eles “não fazem” parte da árvore da vida? Fonte: Flint et al., 2015 Impacto dos microrganismos sobre o ambiente • Como agente de doenças • Microrganismos e agricultura • Microrganismos e indústria de alimentos • Microrganismos e produção de energia • Microrganismos e biotecnologia 27 28 Fonte: Shutte, 2005 Vírus: catalisador do ciclo de carbono Desmatamento Queima comb. fóssil Processos biológicos e químicos Atmosfera Combustível fóssil Plâncton Termoclima Plâncton infectado por vírus Lise do plâncton por vírus Células não infectadas e detritos Oceano 1 Gt: 1 bilhão de tonelada 32 Gt/ano Vírus contribuem para a diminuição do aquecimento global 29 Fonte: www.greenclick.com.br Humanos e animais dependem dos microrganismos em seus intestinos 30 Fonte: Tortora, 2012 • Definição • Classificação dos seres vivos • Histórico da microbiologia • Tipos de microscópios • Níveis de Biossegurança Escopo da aula 31 • SÉCULO 10 AC: VARÍOLA (CHINA) • HOLANDÊS VOADOR: FEBRE AMARELA • RAIVA: DESDE OS TEMPOS DOS FARAÓS 32 Histórico da Microbiologia Ramsés V - provavelmente morreu de varíola 33 Histórico da Microbiologia • 1546 - Girolamo Fracastoro: Propôs que as doenças infecciosas fossem causadas por minúsculas partículas transferíveis, ou "esporos", que poderiam transmitir as infecções por contato direto ou indireto, ou mesmo sem contatos, através de longas distâncias. Em sua obra, os "esporos" das doenças poderiam se referir a produtos químicos e não a entidades vivas. O nome da Sífilis foi tirado do poema épico escrito em 1530 por Fracastoro: “Syphilis sive morbus gallicus” ("Sífilis ou a Doença Francesa"). Treponema pallidum Image provided by Joyce Ayers. Courtesy of the Centers for Disease Control and Prevention DOC KAISER'S WEB Page 34 • 1684 - Antoni van Leeuwenhoek: Construção de lentes / microscópios e descoberta dos microrganismos. 35 Histórico da Microbiologia • 1798 - Edward Jenner: Vacina contra varíola - Cowpox Fonte: web.educastur.princast.esEdward Jenner The entire book of Cow Pox (1798) is available Digitalized by Mary Parker. 36 Histórico da Microbiologia Varíola humana: erradicada em 1980 37 38 39 “Em 14/05/1796, usando material com cowpox da mão da ordenhadeira Sarah Nelmes, Edward Jenner inoculou James Phipps, um menino de 8 anos de idade. O menino contraiu cowpox e recuperou-se rapidamente. No dia 1o de Julho, o menino foi inoculado com Varíola e não desenvolveu a doença.....” 40 Edward Jenner 41 Edward Jenner Pai da vacinação (1798) 42 Cartoons sobre a vacinação 43 • 1847 - Semmelweiss: Introduz técnicas de higiene em hospital de Viena 44 Histórico da Microbiologia • 1857 - Louis Pasteur: Microbiologia da fermentação de ácidos láticos(bact anaeróbicas) • 1860 - Louis Pasteur: Fermentação alcoólica das leveduras 45 Histórico da Microbiologia • 1864 - Louis Pasteur: Controvérsia da geração espontânea 46 Histórico da Microbiologia Fonte: Tortora, 2012 Vírus da raiva Luis Pasteur (1885): desenvolve a vacina contra a raiva 47 Histórico da Microbiologia Louis Pasteur A primeira vacina contra a raiva: Suspensões de medulas de coelhos (gradualmente dessecadas a 37°C) inoculadas após a exposição (mordedura) 48 A primeira vacina contra o Bacillus anthracis (carbúnculo) Desmente a teoria da geração espontânea 49 • 1867 - Robert Lister: Assepsia em cirurgia Operation using Lister's carbolic spray invented in 1869. Fonte: web.ukonline.co.uk 50 Histórico da Microbiologia • 1881 - Robert Koch: Estudo de bactérias em cultura pura • 1882 - Robert Koch: Descoberta da tuberculose • 1884 - Robert Koch: Postulados de Koch e descoberta da causa da cólera (Vibrio cholerea) • 1884 - Christian Gram: Métodos de coloração de Gram • 1889 - Martinus Beijerinck: Conceito de vírus Bacteriologist Robert Koch Fonte: general-anaesthesia.com In the late 1800's, Danish bacteriologist, Christian Gram, Fonte: sites.google.com 51 Histórico da Microbiologia • 1892 - Dimitri Ivanowsky: Vírus do mosaico do tabaco • 1905 – Calmette & Guerin Vacina BCG • 1918 - Alice C. Evans “Bacillus abortus” causando Brucelose em animais e humanos - pasteurização do leite • 1929 - Alexander Fleming Descoberta da Penicilina 52 Histórico da Microbiologia • 1944 - Selman Waskman: Estreptomicina • 1946 - Mary (Polly) Bunting: Genética em Serratia marcescens • 1949 - Brown, R. & Házen, E.: Nistatina (antifúngico) • 1950 - Rosalind Franklin – Difração de Raios X para o estudo do DNA - primeira imagem do próprio. 53 Histórico da Microbiologia This portrait of Franklin was taken during her second visit to the United States. (Fonte: National Library of Medicine NIH) • Em 1947 começou a trabalhar como poliovírus, descobrindo 3 tipos distintos • Vacina deveria incluir os 3 tipos para ser eficaz • Problema 1: produzir vírus suficiente para preparar a vacina • Em 1948: Enders, J.F.; Weller, T.H., Robbins, F.C. multiplicaram o vírus em pedaços de tecidos • Problema 2: bactérias contaminavam os tecidos (usaram a penicilina) Jonas Salk e a vacina contra a poliomielite (1952) Fonte: http://www.pbs.org/wgbh/aso/databank/entries/dm52sa.html • A partir daí vírus como o do sarampo e da polio puderam ser multiplicados em grandes quantidades • Esta equipe ganhou o Prêmio Nobel de 1954 de fisiologia/medicina 54 Poliomielite: a ser declarada erradicada pela OMS • 1953 - Watson e Crick: Estrutura do DNA • 1959 - Rodney Porter: Imunoglobulina • 1977 - Frederick Sanger: Sequenciamento • 1983 - Luc Montagnier Descoberta do HIV (AIDS) • 1997 – Tsien et al. NGS 56 Histórico da Microbiologia “Next generation sequencing” ou NGS • Sequenciamento em altíssima escala • Gera milhões de sequências em uma única corrida • Utiliza técnicas como biologia molecular, genômica e bioinformática 57 Fragmentação do genoma 58 Custo por megabase Fonte: http://www.genome.gov/images/content/costpermegabase_apr2015.jpg 59 Biologia Molecular Genômica Bioinformática NGS 60 Fonte: Neoprospecta Paleomicrobiologia Vilnus: Armada de Napoleão morreu de Tifo: Rickettsia prowazekii 61 Conceito: estuda fósseis antigos visando detectar vestígios da infecção por microrganismos Fonte: Ribas Turon et al., 2013. Postulados de Koch 1. O microrganismo deve estar presente em animais doentes e ausente nos saudáveis 2. O microrganismo deve ser cultivado em cultura pura originada do corpo do animal 3. Essa cultura quando inoculada em animais susceptíveis deve reproduzir a doença 4. O microrganismo deve ser re-isolado dos animais inoculados e novamente cultivado 62 • Definição • Classificação dos seres vivos • Histórico da microbiologia • Tipos de microscópios • Níveis de Biossegurança Escopo da aula 63 64 O 1º microscópio • Possuia somente uma lente • Silimar a uma lupa • Melhor polidor de lentes no mundo em sua época • Suas lentes eram polidas com tal precisão que podia ampliar em até 300 vezes Leeuwenhoek, ~1600 Microscópio de Galileu 65 Fonte: http://lensonleeuwenhoek.net/content/galileos-microscope Microscópio de Galileu 1624: 3 lentes biconvexas com aumento final de 30X Examinava insetos 66 Microscópio óptico 67 Microscópio invertido Adenovírus em células 293A Fonte: Knak et al., in prep Efeito citopático (ECP) 68 Resultado positivo Resultado negativo IPX 69 70 Microscópio de fluorescência Imunofluorescência direta Fonte: http://www.utmb.edu/virusimages/ Cérebro de raposa positivo para o vírus da raiva (CDC, 1958) 71 Epi-fluorescência Fonte: http://www.sebbm.es/web/images/images_tinymce/figura_doloresmorales.jpg 72 73 Microscópio de contraste de fase • Aumento útil de até 1 milhão de vezes da amostra • Possível a visualização de moléculas orgânicas como o DNA, RNA e algumas proteínas Microscópio eletrônico Vírus da poliometilte (30 nm) Fonte: http://deolhomicro.blogspot.com.br/2012/10/omicroscopio-eletronico-de-transmissao.html 74 • Definição • Classificação dos seres vivos • Histórico da microbiologia • Tipos de microscópios • Níveis de Biossegurança Escopo da aula 75 Laboratórios e Níveis de Segurança 76 NB1 77Fonte: https://biosafety-level.wikispaces.com/file/view/NB1.jpg/104545763/616x412/NB1.jpg 78 Laboratórios e Níveis de Segurança NB2 79Fonte: https://biosafety-level.wikispaces.com/file/view/NB2.jpg/104546259/495x330/NB2.jpg 80 Fluxo ou cabine de biossegurança 81 Laboratórios e Níveis de Segurança NB3 82Fonte: https://biosafety-level.wikispaces.com/file/view/NB3.jpg/104546409/NB3.jpg 83 NB4 Vírus Ebola 84 Fonte: WHO In this Oct. 2007 photo provided by the Hamburg University hospital (UKE) on March 17, 2009 a quarantine unit at the hospital is shown during a disaster control exercise 85 Laboratórios e Níveis de Segurança Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+ 86 87 Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+ 88 Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+ 89 Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+ 90 Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+ 91 Laboratório Pedro Leopoldo, MG: NB3+ Mensagens principais • Microrganismos são seres unicelulares com capacidade de replicação, exceto os vírus • A maioria dos microrganismos são benéficos • Microrganismos patogênicos: causam danos a animais e humanos • Quais são os 3 domínios na classificação das espécies: – Eukarya, Bacteria e Archaea 92 Mensagens principais • Cite uma contribuição de Pauster a Microbiologia? • Quem foi Edward Jenner? • Quais são os postulados de Koch? • Que revolução causou a invenção do microscópio? • Qual a importância da biossegurança nos laboratórios 93 Sugestões de leitura 94 Fonte: http://www.google.com/imghp 95 • Livros: – FLINT, J., RACANIELLO, V.R., RALL, G.F., SKALKA, A.M., ENQUIST, L.W. Principles of Virology, 4th Edition (2 Volume Set) ASM Press, 2015, 1.060 p. – MADIGAN, M.T.; MARTINKO, J.M.; PARKER, J. 2004. Microbiologia de Brook, 10a ed. São Paulo, Brasil: Prentice Hall, 608p. – TORTORA, G.J. FUNKE, B.R., CASE.C.L. Microbiologia,10ºed. 2012. • Artigos: – SUTTLE, C.A. 2005. Viruses in the sea. Nature 437:356-361. – RIBAS TURON C., CHIMENOS KÜSTNER E., ADSERIAS GARRIGA M.J., HOSPITAL RIBAS A. 2013. Paleomicrobiología: Revisión Bibliográfica. Actas del XI Congreso Nacional de Paleopatología, ISBN: 978-84-940187-5-6. p 635-650. – WYLIE, K.M.; WEINSTOCK, G.M.; STORCH, G.A. 2012. Emerging view of the human virome. Translational Research, 160:283–290. • Sites: – Virology blog (http://www.virology.ws/). – WHO - World Health Organization (http://www.who.int/ en/). – Wikipédia (https://pt.wikipedia.org/) Sugestões de leitura camposvet@unb.br Grato pela atenção!!! 96
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