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Análises Químicas e Bioquímicas em Plantas Egídio Bezerra Neto Levy Paes Barreto UFRPE 2011 Ministério da Educação UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO Reitor: Prof. Valmar Corrêa de Andrade Diretor da Editora Universitária da UFRPE: Antão Marcelo Freitas Athayde Cavalcanti Av. Dom Manoel de Medeiros, s/n Dois Irmãos – Recife / PE CEP: 52171-900 Autores: Prof. Egídio Bezerra Neto e Prof. Levy Paes Barreto Projeto Gráfico e Capa: Bruno de Souza Leão Departamento de Química Tel.: (81)3320-6367 egidio@dq.ufrpe.br levy@dq.ufrpe.br Catalogação na Fonte Setor de Processos Técnicos da Biblioteca Central – UFRPE B574m Bezerra Neto, Egídio Análises químicas e bioquímicas em plantas / Egídio Bezerra Neto, Levy Paes Barreto. -- Recife: UFRPE, Editora Universitária da UFRPE, 2011. 261p. : il. 1. ANÁLISE QUÍMICA 2. QUÍMICA VEGETAL 3. NUTRIÇÃO MINERAL I. Barreto, Levy Paes II. Título CDD 581.19 ISBN: XXXXXXXXXXXXXX Apresentação 1 | Coleta e Preparo de Amostra Vegetal para Análise Química 2 | Determinação de Umidade 3 | Determinação de Resíduo Mineral (R.M.) 4 | Determinação de Açúcares Redutores em Caldo de Cana 5 | Determinação de Sacarose em Caldo de Cana 6 | Determinação de Amido 7 | Determinação de Carboidratos Solúveis Totais 8 | Determinação de Sacarose 9 | Determinação de Açúcares Redutores 10 | Determinação de Carboidratos Totais Não Estruturais 11 | Determinação de Óleo em Sementes de Oleaginosas 12 | Determinação de Fibra Bruta 13 | Determinação de Nitrogênio Total e Estimativa do Teor de Proteína Bruta 14 | Determinação de Proteína Solúvel 15 | Determinação de Aminoácidos Livres Totais 16 | Determinação de Prolina Livre em Tecido Foliar Fresco 7 Su m ár io 9 13 16 20 27 35 41 48 53 59 64 69 73 79 84 90 17 | Determinação de Glicinabetaina 18 | Determinação de Nitrato em Tecido Vegetal 19 | Determinação da Atividade de Nitrato Redutase (E.C.1.6.6.1) em Tecido Vegetal 20 | Determinação da Atividade da Peroxidase (EC 1.11.1.7) 21 | Atividade da Fenilalanina Amônia Liase (EC. 4.3.1.5) 22 | Determinação da Atividade da Beta Glucanase (EC 3.2.1.39) 23 | Separação de Pigmentos Fotossintéticos por Cromatografia em Papel 24 | Determinação de Clorofila em Tecido Foliar 25 | Derminação da Acidez em Suco de Frutas 26 | Determinação do pH em Suco de Frutas 27 | Determinação de SST em Suco de Frutas 28 | Determinação de Vitamina C em Suco de Frutas 29 | Determinação de Fenóis Totais 30 | Determinação de Fenóis Totais e Taninos 93 99 103 110 115 119 123 127 130 136 138 141 146 150 31 | Determinação de Carbono Orgânico Total em Tecido Vegetal 32 | Digestão Nitro-Perclórica para Análise de Elementos Minerais 33 | Determinação de Fósforo 34 | Determinação de Enxofre 35 | Determinação de Cloreto 36 | Determinação de Boro 37 | Determinação de Silício 38 | Determinação de Sódio e Potássio em Tecidos Vegetais por Fotometria de Chama 39 | Determinação de Nutrientes Minerais por Espectrofotometria de Absorção Atômica Anexo 1 | Conselhos Úteis para Trabalhos em Laboratório Anexo 2 | Instruções para Elaboração de Relatórios de Análises Químicas Anexo 3 | Transformações de Resultados de Análises Químicas Anexo 4 | Exercícios Propostos Anexo 5 | Padronização de Soluções 156 161 165 170 173 177 182 188 192 203 205 207 209 240 Anexo 6 | Composição Bromatológica Aproximada de Algumas Hortaliças, Frutas e Culturas de Larga Escala Anexo 7 | Princípios Básicos de Análises Espectrofotométrica Anexo 8 | Tabela de Eynon-Lane para Análise de Açúcares, Titulando 10 mL da Solução de Soxhlet Anexo 9 | Concentração de Alguns Ácidos Comuns em Laboratórios Anexo 10 | Teores Adequados de Nutrientes Minerais nas Folhas para Diversas Culturas Anexo 11 | Tabela Períódica dos elementos químicos 254 256 257 260 246 248 Egídio Bezerra Neto • Levy Paes Barretos | 7 ApresentAção O livro “Análises Químicas e Bioquímicas em Plan- tas” é direcionado à área agrária, mais especificamente à nas Universidades e Centros de Ensino. Foi concebido com base no interesse dos professores-autores Dr. Egídio Bezerra Neto e Levy Paes Barreto (que lecionam no Departamento de Quí- mica da Universidade Federal Rural de Pernambuco) de favo- recer o processo de aprendizado ao trazer para os estudantes valiosas recomendações sobre trabalhar num laboratório, a sequência usada na elaboração de relatórios de aulas práticas (que tanto os confunde) e representações de tabelas. Os que desejarem aprender vão encontrar nesse livro uma ferramen- ta útil para responder aos seus questionamentos no que con- cerne a essas análises. A estrutura de cada prática traz esclarecimentos importan- tes que se traduzem logo na introdução, seguida pelos métodos e técnicas utilizados. Para sedimentar o aprendizado, o livro conta com exercícios propostos nos anexos. Tais ações desen- volvem sobremaneira o lado cognitivo e fazem aflorar o interes- se por um tema que pertence à realidade do mundo acadêmico e que no futuro, fará parte do dia a dia dos profissionais que a Universidade assume a missão de formar. Considero meus queridos colegas Egídio e Levy pesquisa- dores competentes, que com muita dedicação nos presenteiam esta obra: ao mesmo tempo um material rico, que norteia as análises de natureza Química e Bioquímica. Agradeço o convite para apresentar esse trabalho, o que me honrou. Expresso também a minha alegria pela homenagem (veja contra-capa) ao meu também querido colega Prof. Emano- el Lopes de Albuquerque. Sêneca nos disse que “Ensinando, aprende-se”. Este livro é uma prova do trabalho responsável dos professores que divi- dem agora com os seus alunos um pouco do que aprenderam ensinando e os convidam a aprender mais, para que um dia possam ensinar outros. Esse é o pensamento coletivo da nossa Universidade, comprometida na busca do conhecimento cien- tífico. E é na difusão desse conhecimento que encontramos no meio acadêmico a contribuição maior que podemos deixar para a sociedade. Rosangela Ma S. Lucena Profa. do Departamento de Química da UFRPE Recife, maio de 2011 Egídio Bezerra Neto • Levy Paes Barretos | 9 ColetA e prepAro de AmostrA VegetAl pArA Análise QuímiCA i. introdução O sucesso de qualquer método analítico que visa a caracte- rização do estado fisiológico da planta, dos processos bioquími- cos, e dos produtos dela obtidos, baseia-se fundamentalmente em dois fatores: a. Correto estabelecimento dos métodos para coleta, conserva- ção e preparo das amostras de órgãos ou de tecidos a anali- sar. b. Interpretação correta dos resultados em função de um siste- ma referencial. Na amostragem de uma população a ser analisada deve-se estabelecer a representatividade da amostra, isto é, tomar um número de amostras individuais ou compostas que realmente espelhem a população dentro da variabilidade natural. Os tecidos frescos são altamente perecíveis, assim como, após a coleta continuam a funcionar os processos fisiológicos e 1 10 | Análises Químicas e Bioquímicas em Plantas começa a se estabelecer a senescência com o aumento da respira- ção, hidrólise de proteínas, etc. Para a realização de testes bioquí- micos, os quais simulam as condições
