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MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO UNIVERSIDADE FEDERAL DOS VALES DO JEQUITINHONHA E MUCURI Disciplina: Citologia Estudo Dirigido 1- Descreva sobre a estrutura das células eucarióticas e procarióticas destacando suas diferenças. As células procariotas são envolvidas por um envelope celular constituído por cápsula, parede celular e membrana citoplasmática. No citoplasma as únicas organelas presentes são os ribossomo. Essas células também possuem flagelos e estruturas chamada de pili. As células eucariotas, por sua vez, possuem uma organização interna complexa, com o citoplasma repleto de organelas, material genético separado por membrana nuclear, mas não possuem parede celular como envoltório, apenas a membrana citoplasmática. 2- Cite a função principal dos diferentes componentes das células eucarióticas e procarióticas. Citosol: Formado por água, íons, sais minerais, prercursores dos ácidos nucleicos e enzimas. É o local onde fica o citoplasma. Núcleo: Local isolado do citoplasma pela membrana nuclear e onde estão os ácidos nucléicos. Nos organismos procariotos se encontra na forma de nucleóide por não ser individualizado do restante do conteúdo do citoplasma por alguma membrana. Retículo endoplasmático: Constituído por uma rede de túbulos e pode ser dividido em retículo endoplasmático rugoso e liso. No primeiro há ribossomos que participam da síntese de proteínas, já o segundo participa da síntese de lipídeos. Complexo de Golgi: Formado por sacos achatados e vesículas, é responsável pelo processamento, armazenamento, empacotamento e distribuição das proteínas. Está presente em maior quantidade em células de órgãos responsáveis pela secreção de alguma substância. Lisossomos: Promove a digestão intracelular. Ribossomos: Responsáveis pela síntese proteica. Mitocôndrias: Unidades básicas na produção de energia na forma de adenosina trifosfato através da respiração celular, na qual utiliza-se glicose e oxigênio. Cloroplastos: Presente apenas nas plantas, é a organela que armazena a clorofila (pigmento responsável pela fotossíntese). Peroxissomos: Transforma compostos tóxicos em menos tóxicos para as células. Centríolos: Conjunto de microtúbulos em formato padrão sendo importantes durante a mitose e meiose e na formação de cílios e flagelos. Flagelos: Responsáveis pelo deslocamento celular. Pili: Permite a adesão celular dos procariotos. Membrana plasmática: Formada por uma bi-camada fosfolipídica, tem a função de delimitar todas as células vivas e também permitir a passagem de certas substâncias do seu interior para o meio externo e vice-versa. Parede celular: Constituída de carboidrato e proteína, dá forma a célula procariota e protege a membrana plasmática. Citoesqueleto: Fornece suporte e mantem a forma celular. 3- Cite as características das células vegetais que as distinguem das células animais. A ausência de parede celular, plastídeos, vacúolos e amido como reserva energética nas células animais e a presença dessas estruturas nas células vegetais. As células vegetais também apresentam uma estrutura comunicante entre si, que é ausente nas células animais: Os plasmodesmos, que são espécies de nanotubos que permitem o trânsito de moléculas entre uma célula e outra. 4- Descreva sobre a teoria da origem endossimbiótica das mitocôndrias. Essa teoria postula que as mitocôndrias surgiram de um procarionte autotrófico que viveu em simbiose dentro de outro organismo, também unicelular e com maiores dimensões, obtendo proteção e fornecendo energia gerada pela fotossíntese. 5- Descreva todos os componentes de um microscópico ótico padrão com suas respectivas funções. Ocular: Lente que amplia a imagem e projeta para a retina. Objetiva: Lente que projeta uma imagem ampliada para a ocular. Revólver: Peça giratória portadora de lentes objetivas com diferentes ampliações. Diafragma: Permite a regulação da intensidade de luz que atravessa o condensador. Condensador: Conjunto de lentes convergentes que orientam e projetam a luz sobre a lâmina. Platina: Plataforma onde é colocada a lâmina para microscopia. Botão macrométrico: Promove o deslocamento vertical da platina permitindo um foco “grosseiro”. Botão micrométrico: Promove um deslocamento vertical e sutil da platina permitindo um ajuste perfeito do foco. Charriot: Promove o deslocamento horizontal da platina. 6- Descreva sobre os princípios da microscopia de contraste de fase e da microscopia de fluorescência. A microscopia de contraste depende da densidade do corpo analisado, pois os raios luminosos que atravessam o corpo analisado são refletidos em tempos distintos, devido a quantidade de matéria presente em cada estrutura, causando sensações diferentes na retina. Essa microscopia é empregada principalmente na análise de células vivas. Na microscopia de fluorescência são utilizados corantes fluorescentes para corar as células fixadas. Esse tipo de microscópio possui filtros que permitem a passagem apenas dos comprimentos de onda que excitam os agentes fluorescentes. Existem filtros também que permitem a emergência apenas de comprimentos de onda emitidos quando o agente fluorescente emite fluorescência. 7- Discuta sobre microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. O microscópio eletrônico é semelhante ao microscópio ótico, mas a invés de usar um feixe de luz e lentes para focar o feixe, utiliza-se um feixe de elétrons e bobinas magnéticas para a focalização do feixe, o que permite um maior limite de resolução. O espécime colocado no vácuo para análise deve ser muito fino e corado com metais pesados eletrodensos. Na microscopia de varredura, um feixe de laser varre a amostra revelando apenas sua superfície que é projetada em preto e branco num monitor. 8- Descreva resumidamente as etapas para obtenção de lâminas permanentes. A primeira etapa é a fixação, na qual é necessário evitar a autólise ou a proliferação do espécime e aumentar a afinidade com o corante. Entre os agentes fixadores pode-se citar o formol, o glutaraldeído e os sais de urânio e chumbo no caso da microscopia eletrônica. Logo após, realiza-se a microtomia, na qual ocorre o corte do espécime em fatias finas e depois a inclusão do mesmo em resinas plásticas ou parafina. Por último ocorrem a coloração, para diferenciar alguns componentes celulares e teciduais, e a citoquímica para identificação e localização das moléculas que constituem as células. 9- Quais são os corantes mais comumente utilizados no preparo de amostras. Quais estruturas celulares são coradas por eles? Corantes ácidos como a eosina e corantes básicos como a hematoxilina. Os corantes ácidos possuem afinidade por estruturas básicas, sendo então responsáveis por corar o citoplasma e as mitocôndrias, por exemplo. Os básicos, por sua vez, têm afinidade com estruturas ácidas, corando então estruturas como os ácidos nucléicos. 10- Descreva sobre a técnica de imunocitoquímica direta. É realizada através da marcação de um anticorpo com corante fluorescente (microscopia de fluorescência) ou por átomos radioativos (radioautografia), visando a determinar a localização de uma proteína baseada na reação antígeno-anticorpo. 11- Quais são as macromoléculas presentes nas células vivas? Quais são os monômeros de cada uma das macromoléculas poliméricas? As macromoléculas não poliméricas são água e lipídeos. As poliméricas são carboidratos (formados por monossacarídeos), proteínas (formadas por aminoácidos) e ácidos nucléicos (formados por nucleotídeos). 12- Quais são as principais funções dos carboidratos nas células dos organismos vivos? Principal fonte de energia, reserva energética, constituinte do ATP e dos ácidos nucléicos e elemento estrutural nas paredes celulares das plantas e bactérias e no exoesqueleto dos insetos. 13- Descreva a classificação dos monossacarídeos quanto à natureza química e o número de carbonos. Dê exemplos. Natureza química: Aldose (presença de grupo aldeído na molécula) e Cetose (presença de grupo cetona na molécula) Númerode carbonos: Trioses, tetroses, pentoses, hexoses, heptoses... 14- Descreva sobre a estrutura dos polissacarídeos de reserva vegetal e animal dos seres vivos. O polissacarídeo de reserva vegetal é o amido que por sua vez, é constituído por dois polímeros: amilose e amilopectina. O de reserva animal é o glicogênio que é formado por um polímero de glicoses. 15- Quais são as principais funções dos lipídeos? Reserva energética, elementos estruturais da membrana celular e combustível celular. 16- Descreva sobre as propriedades dos ácidos graxos saturados e insaturados. Os ácidos graxos saturados só possuem ligações simples entre os carbonos e uma maior interação entre eles. Nos insaturados existe pelo menos uma ligação dupla entre os carbonos e a interação entre as moléculas é menor. 17- Descreva sobre a constituição e a principal função dos triacilgliceróis. São lipídeos de reserva energética constituídos por um tri-éster oriundo da combinação do glicerol (triálcool) com ácidos graxos. 18- Os lipídeos de membrana desempenham função estrutural nas células. Quais são eles e qual a sua constituição básica? Os lipídeos de membrana são anfipáticos, ou seja, uma das extremidadas é hidrofóbica e a outra hidrofílica sendo divididos em: ●Fosfolipídeos: -Glicerofosfolipídeos: uma molécula de glicerol, duas de ácido graxo, um grupo fosfato e um álcool. -Esfingolipídeos: uma molécula de esfingosina, uma de ácido graxo, um grupo fosfato e uma de colina. ●Glicolipídeos: -Esfingolipídeos: uma molécula de esfingosina, uma de ácido graxo e um mono ou oligossacarídeo. ●Esteróis: lipídeos estruturais constituídos por um núcleo esferoide formado por 4 aneis fundidos entre si. Três deles possuem 6 carbonos e o outro 5 carbonos. 19- Descreva os componentes característicos dos nucleotídeos de DNA e RNA diferenciando-os. Qual o tipo de ligação covalente ocorre entre dois nucleotídeos? Os nucleotídeos dos ácidos nucléicos possuem um grupo fosfato, uma pentose e uma base nitrogenada. No DNA a pentose é uma desoxirribose e no RNA uma ribose. As bases nitrogenadas tanto no DNA quanto no RNA são divididas em: púricas (adenina ou guanina) e pirimídicas (citosina ou timina no DNA e uracila ao invés de timina no RNA). A ligação covalente que existe entre dois nucleotídeos é do tipo fosfodiéster ligando o grupo 5’ fosfato com o 3’ OH do nucleotídeo adjacente. 20- Cite pelo menos três características do modelo proposto para a estrutura tridimensional do DNA. Quais as forças mantêm sua estrutura? De acordo com esse modelo, o DNA é formado por duas fitas helicoidais que se unem em uma dupla hélice. É proposto também que o esqueleto hidrofílico dos fosfatos e das desoxirriboses estão na parte exterior e que as fitas possuem orientação anti-paralela. A manutenção dessa estrutura é possível pelas interações de empilhamento entre dois nucleotídeos adjacentes e pelas ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas complementares. Há duas ligações de hidrogênio entre as bases adenina e timina e três ligações de hidrogênio entre as bases citosina e guanina. 21- Os aminoácidos estão divididos em cinco grupos de acordo com seus radicais. Quais são? Grupos dos radicais aromáticos, radicais não polares e alifáticos, radicais não carregados mas polares, radicais carregados postivivamente e radicais carregados negativamente. 22- Cite pelo menos quatro funções das proteínas nas células vivas e dê exemplos. Estrutural (colágeno, elastina e queratina), regulação (insulina, glucagon, somatostatina e grelina), transporte (hemoglobina), catálise (tripsina) e contrátil (actina e miosina). 23- Descreva sobre os níveis estruturais das proteínas. Estrutura primária- Ligações covalentes que unem resíduos de aminoácidos de uma proteína. Estrutura secundária- Arranjos estáveis de resíduos de aminoácidos criando padrões estruturais. Estrutura terciária- Arranjo tridimensional de todos os átomos de uma proteína. Estrutura quaternária- Arranjo especial de duas ou mais cadeias polipeptídicas. 24- Quais são as interações que mantêm a estrutura nativa de uma proteína? Em que regiões da proteína essas interações podem ocorrer? São as ligações peptídicas regidas pelas forças de Van Der Waals que une o carbono do grupo carboxílico de um aminoácido ao nitrogênio do grupo amino do aminoácido adjacente, numa reação que libera uma molécula de água. 25- Como são distribuídos os radicais dos aminoácidos no interior da proteína já dobrada. Apolares: Interior das proteínas. Polares carregados: Na superfície da proteína, em sua maior parte. Quando no interior, geralmente estão associados a uma função especial, como ligação de íons metálicos. Polares não carregados: Superfíce e interior (ligação de hidrogênio entre eles). 26- Qual é a constituição básica do envelope nuclear das células eucarióticas? Qual a sua principal função? Estrutura complexa formada por duas membranas lipoproteicas justapostas que possuem poros para troca de substâncias entre o núcleo e o citoplasma. Moléculas apolares possuem passagem livre através desses poros, mas quando são substâncias polares como RNA e proteínas, é exigido gasto de energia. A membrana externa tem continuidade com as membranas do retículo endoplasmático, possuindo ribossomos aderidos. Esse envelope permite que o conteúdo nuclear seja quimicamente diferenciado do conteúdo citoplasmático. 27- Como acontece o transporte de uma proteína do citoplasma para o núcleo e vice versa? A passagem através por poros nucleares só ocorre com gasto de energia. Nesses poros existe uma estrutura proteica chamada complexo do poro que reconhece a sequência sinal de proteínas que atuam no núcleo e no citoplasma e de receptores especializados em importação ou exportação nuclear de proteínas. 28- O que são os chamados “cromossomos organizadores do nucléolo”? Cromossomos responsáveis pela síntese de RNA ribossômico. 29- Quais os principais eventos acontecem durante a intérfase? Síntese proteica, duplicação dos centríolos e do DNA. 30- Os cromossomos são classificados em quatro tipos, com base na posição do centrômero. Quais são eles? Metacêntrico, submetacêntrico, acrocêntrico e telocêntrico. Estão listados na ordem dos que possuem centrômero mais próximo do centro para os que possuem o centrômero mais próximo da extremidade. 31- Os genes que estão sendo expressos estão em qual região da cromatina? Como se caracteriza esta região? Na eucromatina, que é a região da cromatina interfásica que possui o menor grau de condensação. 32- Defina: - Nucléolo Massas densas e arredondadas presentes no núcleo sendo constituídas por ribossomos em amadurecimento. - Lâmina nuclear Lâmina de filamentos proteicos aderida internamente à carioteca dando suporte a ela, mantendo sua forma e fornecendo pontos de ancoragem aos cromossomos. - Nucleoplasma Solução aquosa que envolve a carioteca e os nucléolos. Nela estão contindos diversos íons, aminoácidos e enzimas. - Gene Sequências de nucleotídeos do DNA que determinam a formação de uma proteína. - Genoma Conjunto de todas as moléculas de DNA com genes e bases nitrogenadas que não possuem informação codificada. - Nucleossomo Unidades básicas da cromatina. São constituídos por uma longa molécula de DNA enovelada num grão formado por um octâmero de histonas. - Eucromatina Forma menos condensada da cromatina interfásica na qual estão inseridos os genes que se expressam. - Heterocromatina Forma mais condensada da cromatina interfásica na qual estão inseridos poucos genes e estes não conseguem se expressar devido ao grau de condensação dessa estrutura.
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