Buscar

Proteomics in Practice A Laboratory Manual of Proteome Analysis Tom Naven

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes
Você viu 3, do total de 329 páginas

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes
Você viu 6, do total de 329 páginas

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes
Você viu 9, do total de 329 páginas

Faça como milhares de estudantes: teste grátis o Passei Direto

Esse e outros conteúdos desbloqueados

16 milhões de materiais de várias disciplinas

Impressão de materiais

Agora você pode testar o

Passei Direto grátis

Você também pode ser Premium ajudando estudantes

Prévia do material em texto

������ ������	����
��	 
����
���������	 �
 ��������
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
������ ������	����
 ��	 
����
��������� � ���� ��������� ������ �	��
�� 
�! "�#�$�"�"#%�# &���'(����)* "�#�$�+��,$�# &-��(�����()
������� ����� �	
� ����
����
������ ������	����
�
����������	�	 �
 ��������
����� ������
�� 
 "�#�$�"�"���+
���������	 �
 ��������
 ��
������� ������ ��
������	� 
�������
������ ������	����
��	 
����
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
������ ������	����
 ��	 
����
��������� � ���� ��������� ������ �	��
�� 
�! "�#�$�"�"#%�# &���'(����)* "�#�$�+��,$�# &-��(�����()
�	� �����	 �����	����	
�	� �
� �����
.	������ ���(���(�� -/���� �	��
0/�1����� ���2 3
$3,,, 4����/��
���	���
� ���� ���� �	� 
	��
���� �����
��� ������
�������� 	������ 	�� ��������� �� ���
�	��	�� ��� ��
���	���� 
���	���� ������� ��
�� 
��� �
 ������� ��	���� 	�� 	������ �� ����
�� ���� ��	� ��	�������� �	�	� �������	������
���
����	� ���	��� �� ����� ����� �	� ��	��
��������� �� ��	
��	���
������� �� 	�
���
 	��� ���� ������� ���
�����
� �������	��������
���
�����������
�����
�
	�	����� ��
��� 
�� ���� ���� �� 	�	��	���
��� ���������� ����	���
��� ����
��� ���������� � 	�� 	��������
��
�
�����������
 �����
� 
	�	����� ��
��� �� 	�	��	��� 
���
 �� ����
�� �����������
���������� ��������	��
�������	
 ����
.�� ������ �������' &��(�/'��� ����� �5
����������� �� ����� ����/����)2
� ���� �5 ���� ���6 	�� �� �����'/(�' ��
��� 5��	 7 �� �������������
 	�(��5��	
 ��
��� ����� 	���� 7 ��� �����	����' ��
���������' ���� � 	�(���� ����/��� 8����/�
8������ ���	������ 5��	 ��� �/�������2
���������' ��	��
 ���'�	��6�
 ��(2 /��' ��
���� ���6
 ���� 8��� ��� ���(�5�(���� 	��6�'
�� �/(�
 ��� ��� �� �� (����'���' /������(��'
�� ��82
������' �� ��� 4�'���� ���/���( �5 ���	���
������' �� �(�'�5��� �����2
	����
����
 !"�� # $���� %�
��	��
&��'� (�������
���
��
� ��
��	�� 	����	�� &��'�
 	����	��
������
��
� )� %
�*
�� &��' # +�� !&�
&�"���	��
� �� "�#�$�"�"#%�#
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
������ ������	����
 ��	 
����
��������� � ���� ��������� ������ �	��
�� 
�! "�#�$�"�"#%�# &���'(����)* "�#�$�+��,$�# &-��(�����()
�
������� ��
�	��
	�� ��
�
�������	��� ���
	��� ����� ����
��	����� 	� ����� ����
���� �� ��	��	���� �����	�	�� �
� ����	�����	� �
��� �������	�
�� 
 ��
	�
���� �
��� ������	�
� 
 	�� ��
	��� ���	���� �
��� ��	��	�
� �
��� ����� �������� �
��� ����	�
���	�
� 
 ��
	���� �
��� ������	��� �	�
� 
 ��
	���� �
��! "���	�
��� ��
	�
���� �
� !"�����	� "�	��	���� ��
��� #$
%�������
��� &���	�
��
����� ��
����� &'
��	�
� 
 	�� �%� ��	�
�
�
�� �	
����� ������ �������	�
� �
����� "���	 �������
�( ��
����	��� 
������ 	�
����� ���
�� �������
�( ���%)�*& 
�
����� ��	��	�
� 
 ��
	��� ��
	� ��
����� ����� �������� ��
��� ��
	 �������� ��
����� ��
	 ��		��� ��
����� )�
	��� ����'��� ���
��� +��� ����	�
��	�� ���
����� �
����	�
� ��	
����� �
� ������	�
� ���
#	������
�
�������� �� �
������� � ����
���
� ������ �� �
������ ��������
,����� -��	�������. #
� /�'��
�
������	 0 �11� -����%2�3 2����� *�43
��5/�( �%��!%�1���%� 63����
'��78 �%��!%�11�!%� 6&���	�
���7
��
����� #����� ���� ����	�
��	�� 6+�9+�7 �	
��� )�
	��� ����	�
���	�
� 4� ��	�4��� ��������� � 
����� )��	��� ���� 
���������	 � �
����� )��	��� ���� 
���������	��� �
�4���� $�	� �
��
��	�
�
��
���	�
� � �
����� )��	��� ���� 
���������	 �
�4���� $�	� ���	��� ��:�����
��
���	�
� � �
����� )�
���	 �
� +�9+� ��:����� ��	� �! 
����� �� �
'
 ��:������� �!
��� +�	�
�� 
 ��
	�
�� �������� �
!
����� ��%+� �
!
����� ;�%+�9+� �
�
����� <���	�	�	�'� ��
	�
���� �
�
���� �� #	���� $����� ���
 %��"����� #	�����
���� &������� �� 
'��" �� '��"�� "��"�����	� ���
� �	
�= �
��	�
�� ���
� &������� ��	
� +���
�������� ��
� )������	�	�
� ���
� 5���� ��
	���� ���
� 2��� ����
��
4�� ��
	���� ��	
! <���	�
���	�
� ��!
> ��� ������� 
� 3+- ��
	���� ������	�
� ���
'��" �� ��	�������� �	������ ���
� ,��$������ 	��� ���
� ,������	�
� �
����� ��� �&" �� �)*��
� �	��� �
����� ���
� �&" �� 	�� ��� �
����� �	��� �
���� 6�������	�
� �
���� �	����7 ��	
� ��� �
����� �&" ��!
� �	������ 
 �)* �	���� ���
'��" (� ')' �	������������ ��� �����	"�	����� ���
� ���	��� 
 ��� �
������������ ���� ���
��� �	
�= �
��	�
�� ���
��� �����		�� 
� ��4
��	
�� ���� ���� 	��
��� +��	���� *�� ���	�� 6�� 	
 �� ����7 	� 
����� 3
�
����
�� ���� 	�!
����� *������	 ���� 	��
��� *�� ���	�� 
� �� 	
 ��� ���� 	�	
� �����	��� �����%���� ���� ��	
 �����		�� 	��
� )������	�
� 
 	�� ��� ����	�
��
����� �:������	 			
��������
���
��� �	
�= �
��	�
�� 
� 	�� ������� 4�
��� 			
��� ��		��� �� 	�� ��	����	�� ����%	��
�����	 ���	�����	 		 
��� ��		��� �� 	�� ��� ��� ���	�����	 		 
� &:����4��	�
� 
 	�� �)* �	���� ��� 	����
�� 	
 	�� ��� ���� 		!
��� &:����4��	�
� 		!
��� �������	�
� 
 	�� �)* �	���� 
�	
 	�� ��� ���� 		!
��� �������	�
� 
 �
������� $����	 ���=�� ��
	���� ��� �%� ������� 		�
��� ���� 	�� �)* �	��� ��� 	�� ��� ��� 		�
� #�� ��� ����	�
��
����� ��� 		�
��� #�� ��	����	�� ����%	��
�����	 ���	�����	 		�
��� #�� ���%��� ���	�����	 $�	� �	������ �
$�� ������ 		�
'��" *� '������� 	� ��� ���� 	 
� �
��
���� �
������ 5�������	 5��� �	������ 	 
��� �
��	�
�� 	 
��� �	������ 	 !
� 3
	 �
������ 5�������	 5��� �	������ 	 !
� ���'�� �	������ 	 
� "��
�������� �	������ 	 �
� )�����'��� ��� ������ 
 ���� 	 �
'��" +� '������� 	� ���� ��� ����� �������� 	 �
� �������� 	 �
��� *��� �	����� $�	� '���4�� ���� 	 �
��� �������� 
��
������	 ���� 	!�
� ��
	 ��	��	�
� ��� 4��=��
��� ������	��� 	!�
��� ��	
��	�� ��
	 ��	��	�
� 	!�
��� ��
	 
��	����� 	!	
��� ��
	 ���	��� 	!	
��� 5��=��
��� �
����	�
� 	! 
� &'����	�
� 
 �%� ��		���� 	! 
��� ,�
������ ��� 	! 
��� ��	
��	�� ��� ��	����� 	!!
��� /
�������	�
� 	!
��� �� ��� +� ����4��	�
� 	!
��� ��
������ ���� 	!�
��� �'������ ���� 	!�
��! <���	�
���	�
� 	!�
��> ����	��� ���
�	� 	!�
��? ��
	 ���=��� 	!�
'��" ,� ���	�������� ���������� ��� ������	"�	����� 	!�
� )�������� � ���� ����	� �
���	�4�� $�	� ����� ��4������ 	
�
� ,��
��	�	�	��� 	�� �	
�= ����� �� ����	���
������� 6�+"7 	
�
� )�������� ����� �
��	�
� ���� 	
 ��4�� ��
	���� 	
	
��������
����
'��" -� '"	� �!����	� 	
'��" .� '��"�� ���������� 	
�
'��" /� ��0��� �������	� 	��
'��" �1� $���	����� ��������� ��� �	���������	� 	� ���"�� 	� 
'��" ��� #������� ������������	� 	� ��� "�"���� ������ 	�
'��" ��� $' �������� 	��
'��" �(� #���
����	� 	� ��� $�2)�0�	� $' 	� 
'��" �*� ���"����� �	� � ����
��� ������ 	��
'��" �+� �$� ����
��� ������ ������������ 	��
� ��	�
�� ��		���� 	� 
� #$
%�������
��� &���	�
��
����� 	� 
��� ��
����	��� 
������ �� �)* �	���� 	� 
��� ��� )�*& 	�
��� �	������ 	��
��� ��*& 
��
�������� ��4������ 	��
��� ,����	� �� �%� ����	�
��
����� 	��
� +��� ����	�
��	�� 	��
&��������� 	�
����! ��
��������
��� ������	
� �� �
�����	�� 	� �
���	�� 	� �� �
�
	�� ��� 
����
 �	�� �
����
�����	
� 
���
���� ��� ������ ��	�� ��
 ��� ���������� ������
�	� �� �
���	�� �� ��� �����
����
��	� ��� ���� �����
����
�� ���
	��� ��
 ��� ���� ��� ���� �
�� ��� ����	��	�� ������� ��� ��
��
��
��� 
�������� 
���	
�� �
�� ��� ��	���	�	� ����	� ��
 ��
 �����	�� �
��
����	�� ���	��
 ��� �
���	��� ���
��� �� ��
� ���	
�
�� 	� ��� ����
����
� �������
��� ���� �	�� 	������ � ����
��	��� 	��
�����	��� ����
�����	
�
�
������ ����	�� �������� �	�� ��
��� ��������� � ��	 �� �
�������
����	�� ����	�� ���	���� �� �����
 ���� �� ��� �
� ������ �����
 ����	��� 
���
�	�� �
������ ������	� ��� � ���
���� 
���
���� �	��
�� ��	�� ��� 	���
����� 
����
 �� ��
���
 ����	��
��� ����
��	��� ����	�� �	�� 	��
����� ��� ������������ ���	�� ���
�����	 ��� ��
����� ��	�� ���� 	� �
�����	�� ����� ��� ����
	��
��� ��� �����	 ��� �
� ���� ��
 �
������ ������	��
!���
�
� ��� �
���	��� ������� �� ��� ���� �	�� ��� ���
��� ���� ��
����� �������� ��� �	�� 	������ ����� �� ��� ��	� ��
��� ����������
�� �� ��� �����
����
��	� ��� ���� �����
����
�� ��� �����
����
��	�
	� ��	�� ��� ���� ���������� ������ �� 
����
	�� � �
������ �	��
	��
���	�� 
��
����	�	�	�� ��� �������	��� "�� ������� ��
 ��� ����
������� ��
��
����� �� ��� �����
����
��	� ��� 	���� ������	� �	�� ��
���
����� 	� �
���	��� ����	�� #���� ������� ��� 	���
����� �� ����
�����
����
�� �� ����� ��������� ��� ���
�� ���	��� ��
 ����������
�
���	� 	����	�	���	�� �	�� �� �	�������� ��� �
���	��� ����	�� �� ���
���� 	� 	� �
	��	��� � ���
�� ������� ��	�� ��� ���� ���	�	$�� �
�
� �����
 �� ���
�� ��� ������� �� ��� %&����
����
��	� 	� �
���	��'
���� 
����� ��� �������
���� ���� � ���
�� ������ 	� � ������ ��	��
��
 ��	�� ��
� 	� ��� ����
���
�� ��� ����	�� �	�� ����
	�� ��� ��
���	�
� ����� 
��	���� ��� 
��
����	��� 
������ ��	�� � �	���� 	���
��
������ ������ 	������ �� �
�����	�� � �	�� ���	�� �� �����	 ��� ���
	���
������� (� ��	� ���� ���� ���������� ��� �� ������ ��	�� ��
��� ������ �	�� ��� %�	�� ���' ���������	��� ���	�
������ ����
��
�������
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
)�	��
 *����
��	�
� ��� +�
��
,���
	��� - �..� *	����/,! /�
��� 0��!
(#1+�2 3�4�5�3.346�4 7!�
���
�
89 3�4�5�:..;5�4 7&����
��	�8
�������
�	����� ��� ����
	������ �
�����
�� �
� 
���
	���� �� ��� �
�� ��
��������� ��� 
���	���� ���	�
���� ���� 
�������
��� �����
� ����
����� ��� ������ ���
��	��� ���� ��� ������	� ��
������
������	���� ���	�	���	��� ���� �� �������
����	�� ��� ��������
���	�� 	� �� 	����
�� ������ �� �
�����	��� "� ���� ��� ����
��	����
�����	��� ��� �
���	��� 	����� 	�
��
�� �	�� �� ���
����� 	� �
���
����	� 	� � ����� ���� ��	�	��� "��
������ ��
 �����	���� �
�����	��
�
� ��	�� 
�
�	�� ��� ���� �
�����
�� �
� ����
 ��
��������� �����
������� �	�� �� ����� 	� � ����
 ��	�	���
"� ��� �����	��� ��
��������� 	� ��	� �	��� �
� �
�����	�� �� �����
��� �������� �� ��� ���� ���� �� �� ������� �
�
� ��� ������� ���
����
 ��� ��
� ������ �� � �����	�� �� *(<&=�/,!2 ����2>>���3�	��
��
��	������	�������>??????� ��	�� �	�� �����	� ��� ������� �����
��
� ��� 
��	����
)�	��
 *����
��	�
��� +�
�� @����
� �..�
	
���
 ���
@�� "�������� ��� 1�
������� ��	�	��� 1���
�� @���� 1A����� B�
	�
<	�	���� ��� C������ B��
	���	��������� #������ )������� 0A���
�������	���
�
��
���������	 �	 �
 �
 �������
�
��� ������ ���	�� ���	 �	 
�� �� � �����
����
� �� ��� ���� ���� ��� ����� �
������
� �� 	����
��
� ���
����
 �
 ����� �������
� ��
���	 ��	 ������� ���
 ��������	��
�
����� ��	 ���
�
 ��� 
��� ��� ���������	 �� �����
�
� � 	����
���
��	�
 ��������� ��� ��
�
� ��� ����
 �������� �
 ���� �� �����
����
�	�	� �� �	 ���
�
� ���� ���������	 ��	 ��������
 � 	��	��
����
�������
�� ���� �
 �
���� �� �
��	�������	 �
 �� �������
����� �
�������������� �����
��	 ���� ��� ����
� �
 ������ �
����	� �
 ���
����
� �	 ���� �	 �
 �
���� �� � 
�� ��
������
 �� 	���
��	�	 �
 ����
�
��
����� �	 �
�
����� � ���		�
� 
��
 ��� ����
�
� �
 ���������	 �
���� 
��
 ��� ��������	 ���� ���������� ��� �	� �� ������
 �����
����
��� ���	 ���� ����	 � �������� ��
��������
 �� �����
�
� � ����� ����
	�
�����
 �� 	��� �� ��� ��	� ��
��� ����� �
 �����
	 �
 ���	 ����
�
��� ����
 �� ���������	 ��
 �� 
���
�
 �
 �������� �
�� ����� �����
����	! �����		��
 ���������	� ��
����
�� ���������	 �
 ��������
������
 ����
��������	� ���	 ���� ����	�	 �������� �
 �����
�����
����� �
 ��� �����		��
 ���������	� �
 �������
� �����
�
� �� ����
������	 ����� 
���	 ���� ������ ���
�������� �
���	�	 �
 �
�
�������
���
 �� ������
	 �
��
�
 �
 ��
���	 �
 �����		�
 �� � �����
 ����
�
�
 
������
� ��		��	 �
 ���� ���������
	� "����		��
 ���������	 �����	
�
 � ��� ��� �
 ��� �
� ��
� ��������� ���������	 �
 �
 ��� ������
� �����	� �� �
������ �
 ������
 �����	��� �
 ��������	��� ���
�
���� ��� ��	� �������
����� #������� ��� ���� �� ���������	 �	 ������
�
����� ������ ��� ���	� �� �	 ������ ���� 	��� ��
���
��� ����
������	
���� �����
 �
 �	� ��� ��
� ����	 �� ����� ���	 �	 ������ �� �� ���
��	� ��� ��� ����
������	 �
 �����
������	 ������
 �
 ���	 �����
����� $�% �����
	 �
 ������
 ��		 	����������� ����
����	 ���
������
 �
�
���������
� ���� ����� ��� ����
 �� ���������	 ��	 ���
������� �		������
 �
 ��� ��	� 
���
��
"��
�
���� $�% ���	 ���� ���� �
�� �		���� ������� 
�� �
 ���� ��
��� �
���� �� 
�� �
��	�������	 �� ��� ����
� ��	� �� ���� ���� 
�
���������� ���
�
�	 �����
	 $�% ���	 �
 ��
	�
�� ��� ���� �� �������
���
 �
 ��� ������
 	�
	������� �� $�% ���	 �	 ����� 
�������	� &����
��������
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
'��
�� &�	��������� ��� (���
)�������� * $++$ &�����,)- ,����� .��-
�/0(	! 1�2$3�1+124�2 5-��
�����67 1�2$3�8++93�2 5"������
��6
��������
�
�$�% ��� ��	�
 ���������	 	��� �	 ������
 ����������	 �
 ������
���
	��
�� �����
 ��	�
 	��������
	� �
 �����
� 5�	 ����	�
 �� ����
���
6 �������
� ��� ����
� 	��� �
���
	� � ����
����� ���� �	 �������
	������� �� $�% ���	 ��� ������ �������� �������
� ��	 ��� �� �������
)������� �
�	��� �	 ����� � ����	� :�
�	����� 	���
���; ��������� �����
���� �� ������� ���� ����������� ����� $�% ���	 ���� ����� ������
���������
 �� ��� ���	�
� ���� 
� 
�� �
�������� �����
�� -������ �
���� ���		�
� ��
���
 �� ��	� �
��	�������	 ��
��������
� �	�
� $�
% ���	 �	 ��� �� �������� ��� 
����������	 �
 ������
��	 
�������	��
�		������
 ���� ���	 ����
����� �
��
� ���� :���; �	 
��
�
 �� ����
��� ������� $�% ���	� ����� �
 ��� ��	� ��	 ������
 ��� 	����		���
�	� �� ���	 ����
���� �� � ���������
 ���� (������	 :�����	; 
��
 ��
�� ����
�
� ��� ����� ���	 ���� �	 ����� ��������� "������� ���� � ��		
	����������� ���
� �� ����� �������� 	���������� ������		 ��	 ���
��
� �
 ���	 ����
 ���� ��� 
��������
� �� �
	�����
�����
 ���� �	
������ ��������
� �
 ���� ���� �	�� ����
�� ���
 �
 ��� ��	��
���� 
��
	 �� �� ��	����
 ��� ��� ������� ����� ����
 �� ��		 	����
��������� ����� �����
	 ���� ������
�� �
 ������
 �
�
���������
�
����� ���	 ���� �	 �
��
�
 �� ����������� ������������ ��� ���	� �
���
��
� ��� ����
�
# �������� ��
��������
 �� ���	 ���� �	 ��� ��
�� �
 ����� ���
�����
������	 �	�
 ��� $�% ���	 �
 ��		 	����������� ���� ���
�
�������
� �� �	 ���� �� ��
 	���
��	�	 ���� �������	� �
 ��		 	����
�������� ���� ��� ��	� �
����
������ �
 ��� ��������� �	����	 �� 	���
��		����� ���
���
� ������� $�% ���	� ��� �����
�
 ��������
	 ��
��� ��� ������	 �	 �
����� 	����
 �� �����
� ���
��	 ���� � ��������
�
	��� �
 ������ ���	�
�����
 �� �����
����� ����� �
 �� 	����		�����
�����
� $�% ���	 �
 ��		 	������������ �
 �� ��
 ����������� �
���
��� ���� ���	 ���� ���� ���� � �������� ��
��������
 �� ��� �����
�
� �� ���
���� 	��
�
�	� ��	��
������� ������	 �
 ����
�����	�	
���� ��� ���
�
� ��� ����������� #	 ��� ����
 �	 ��
	��
��� ������
�� ���
���
�������
� ��
���	 ����
 �� �������� �� ���� ��� ���� �����
��
/�� -�
�	� <%� ��%
%�������
� �� ��
������	
# 2$+ </'0�
=
����	��� �� <������
#
 #���� <� 4>9+?
=/#
���
����
��� ������	
�	���
� �����
����
	��� ������	
�	���
�
��� ������	
�	���
� ��	��
����
	��� ������	
�	���
�
� ��
���
������� ����
��� ���	�
��� ����
��� ����
��
���� ��
�	����� !��"�����#	��� #��	�
��
�$% ���	�
���
� 
������� 
	�
"��
	�
�$� ���	�
�� 
�����#���
�& �!�	�!���� ��
��
�'���� ���"���
�����������(���������	�
��
���	�
��
��� �
������	��������
��
�
� )� )�����������!
��������
��
�*��� ���
� �	��� ��
������ ������ �		�
!
 ���� 
�
�
�$� ��	�	
���	� !���
��� �	+
�� ����� ��!��
�
� ��	���
�,
�� #���	� -./
�� ����
����� ���
���� #���������
	�
��0 �	�������
��� �	�
#
���
	�
��$� 1�2����	��(����
�	3�
�	
������#	�
� ��
�
��� �		����
� !�
��
��� !���
��� ��������	�
��� ��+
��
�4�$� 1�21���	���
�	
�	
��3�
���������	�
	���
�	
��� ���#	����
�� ��
����� ������	
�	���
�
�%� �	��
�
	� 
������ �
��	�
��
	�
�	�� �	����������
�0 ���!	(��������
�05 �	������ �	������� ��
��� ���,��
�	���6 �	������
���� �������
���������	�
�� !�	�
��
�� ����	�
�� ����!���
�������	
���
� 
�����
� ���
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
7�
��� 5�������
��� �	� )�+��
�	
��
��� 8 �99� 5
����:�4 :����� ��!4
%��)�; 1�<�=�191<>�< 24����	+��3? 1�<�=�'99�=�< 2������	�
�3
����������	
�� �
��	��� �
���
��0 �
�"	!��"��	(�������
��7� �
##�����
�� �
�
��� ��+���� �������
�
	�
��� �
�����	���
��
���� �
�������
�	�����
���� �������
�� ����
��� ��� ������	
�	���
�
��<��4� ��<��
����	(�!��"	
� ��
�
�
�� �
��	��
��	��
�0 �
������ #	����
��
�0�� �
���������#	(
��
�)� ���	(��
!	�����
� ��
�
�
 �	�� 
�� 
���
��� �
��
	�������
�	�
��� �
��
	����
�	�
� 
��� �������� 
� :@��
���� ���������
��
�����������
� ��
�
��% ������	�
��� 
	�
"��
	�
��� �(
������ ��A����� ���
 �� ��� ��	� !	�!�������
 ��%�7 	��
�� �����#	�� B %	� ����	��	� ���	�����
�*$ �		� ��!	���	�� 
����
��
�0$ �		� ����#�����
�� 
����
��
� 4	��
4��� ������	�>�����	(��
����
� ��
�
4�)� 4��
�� ��	�
4�$�� )�������	(������
���"
���)�������������
���#	�
� ��
�
405 4
�� 0	������� 5�
���
4$*� 4
�� $��#	������ *
A�
� ���	���	���
��
% ������� 
��� ��
%��� %�	�	
� �	��� �##
�
�� ����
%� %�	������
� #	���
��
%�� %����	��	!��
� �
%$� %��	!
�
"�� 
4 ����
����
%�$ %�	����	
�	���
�
,� C
�	!����
,�� C
�	����	��
*� *
A�
� ���	���	���
��
*05 *	� 0	������� 5�
���
*�� *
�
� 	# ������
	�
*5� *�!	���	�� �	�,#�	� ������
0 ����
�� 0
��
��
���
0�*�% 0���
( ���
���� ����� ���	�
�
	� 
	�
"��
	�
�
� 0
����
�	�@* 0	������� ���� 
�� �
���
���
����������	
�� �
��	��� �
���
�� 7����
+� ������	
�	���
� �	!
�
��
�7)� ��������� 7)�
0� 0��� �
����	�����
0�� ������ ���� �
����	����� ����� � 
� �������
���� �
0�@0� ������ ���� �
����	�����
0� �����
+� �	������� ����
��� ����@������ ���
	 2(��(
� 
� � ���� �
������3
)	�
��� )	��
	�
� ���������
)�$4�� )	� �A�
�
!�
�� 
4 ����
��� ������	
�	���
�
)4� ������	(� ����
�
�
��
)7 )	� ���������
�6�6 �
�
��� ����
��
$ $	��� 
� 5
$�� $	���������
�� ���
$��� $	���������
�� ��� ������	
�	���
�
$��%� $	���������
�� ��� 
�	������
� #	���
��
$�� $�	�
���� !�##���� ���
��
$�� $	���������� ����	�
% %�	������
� 
	
��
C +���� �
��	�
��
	� �	������
$0 $�
�
�� ���� #
����
�
��
$0� $���������������#	��� #��	�
��
$$� $
��
�
�	 
�	
	���
��
� 
���� 
�� �
��
	� 2������� 	# ���� ��������3
$�� $	�� �	���� �����
$�0 $	�����������
	��� �	�
#
���
	�
$:� $	��+
������	�
��
$:� $	��+
���
���� �
#��	�
��
D�� A�����
	�� �
���	#�#�
���
� 0	������� ���
��
7# +���� 7����
+� �
������ 	# �
����
	�
7� 7����
+� ������	
�	���
� �	!
�
��
7)� 7
!	�����
� ��
�
7$ 7�+����� $����
�
� ��+	���
	�� 
�� �
����
7��$� 7�����
�� %% ��
� 2!���	
��������	�
��
�
���#	����3
� ���	��
��� �	�
�� �	����� ���#���
�@) �
����@�	
�� ���
	
� �	��� �������
�� �	��������
	� -./
� �
��� 
� �� �
�� �
��� ��
� !�##���� ���
��
��� ��
���	�	����
� ��
�
��
����������	
�� �
��	��� �
���
��0�� )�)�)��)����������������������
��
��
�4$$ ��
�2����	(�
�	
��3
�	�
�
��
�	 �
�� 	# �
���
��
�
�� )���
�2����	(�������3������� ����
��
��
� ��
�2����	(�������3���
�	������
& :	��
: :	���� 
� *
+ �
��� 	# �
���
	� 
� �@�
+@+ :	���� 
�� +	����
5 5���
�@+ 5�
��� 
�� +	���� 2���� �	��������
	�3
���
����
���� ������	�
�
������ ���	 
������ 
��� ��� ������������� ����	���� �
 ���
������ ���� ���� �������� �������� ����� ��� ��� ��
��� ������������ ��� ���� ������ 
��� ���� ����� ���
����� ���� ��� �������� �� ��� �������
����������
�� ���������������
!������� ��� ������ �� ������� �
 "# �� "## �$�
%����� ����� �& ��������� ��� ���� �� ��� 
���� ������
�����
�����$� ���������
���$��
<2093.8>
average molecular weight
'�� ���� �
 � �������� �
 � $���� ��������� 
������
���������� ����$ ��� �����$� ������ ���$��� 
��
���� �������� �� �����$� ���� �� �������� ��
%�( )�'*+�%, ���� � ���	 �� ��� ������������
�������� -��� ������������� ��������� ���$��.�
/��	$����� ����������� '�� ������� �� ����� ��� ���	$����� -�������� ���
�������� �����. �� ����������� ������$ ��� ���	� �����
��� ����� �� ��� ���� ������
/��� ���	 '�� ���� ������� ���	 �� � ���� ��������� � ����
�������� �� ������� �������0�� �� ���� ���� ���	 ���
�� ��������� �
 "##1�
��������� � �������� ���� 
�� ��� ����������� �
 �� �������
�����
����������� � ������� ����� 	���� ������ ��� ����$��� �� �������
�� ���	�� '�� ������� �� �� ������� ��� ���� �����
���� �
 �� %, �����������
������	
 �� �
	��
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
����� 2����������� '�� �����
������$�� 3 �##� 2�����4�& 4����$ 5��&
),/��6 7�8�9�7#78:�8 -&��������.; 7�8�9�<##"9�8 -=���������.
�������� �� 	
���
���� ������	�
�
���������� ���� ���	 '�� ���������� ���� ���	 �� ������� �� ��� ���$����
������ �
 ���� �
 ��� ���
��� ���	�
��������� �������
������������ -�) .
� ������� ������� �� ��� �
 ��������� ��� ���������
���� �� ��������� ��������� ������� ��� 
��$������ ��
���������� ���� �� ����� $�� ������ ��� ���� ���������
�����
 ����� - �. ��������$ �� ��� $��������� �
 ��� ,)� ��� ��� �
 ���
���� ����� 
�� "�<<#" > "#?�9 	$ �� �� ���$�� ������
������� &������ �� �� ����� � ������� ���� �� �������
�������
 ��$���� ��� -���
������� �� 
��$���� ���.
�� ��� ��������$ 
��� �) ���
����� �� � ���������
��� �����$ � ������� ��� %,@%, ���������
 �$������ ������$� �
 ���A��� ������� �� ����������� ��0�����
��������$ ������� ��� �������������
 ���� ������� ������ ,����� ����������� ������ 
�� %�( )�'*+ %,
���������� �� ��������� ������� ��$���� ��� 
��� ���$��
���������
=����������� ����������
-=,).
�� ���������� ������B��� ����� ������� ��� 
�����
���� �
 ���� 
��� ��������� �������� 
��� ������� ��
��������� '�� ���� 
����� �� ���� ������� ��� �������
������� �������� ����$��� �������� ������� ����
��������� ������� �
 ������ ���� ������������ -%,@
%,.� )� �� ������� ������� ���� &!(� �� ��������� �����
������������
=���������������� )� �� �������� 
����� 
���� ����$�� �� ��� $�� ������ ��
�� � $���� ���
��� ��� ��������� �� ��� ��������� �
�������� ��$�� �� ���� ��� 
����� ���� ������ ��$�����
'��� ������� �� � ������������ �� ��� �������
��� �
&7*
� ���� ������� ��� ������� 
�� ��$����� �� *&?
���� ������� ��� ����� 
�� �������� ����$��� )� $����
���� �
��� �� �������� �� � ����� 
����
=��������� ���������� '�� ������� �������� ����� �
 ��$��� ������$������������� �������� ���� ��$� �����$���� ������B���
��	� �� ��������������� ��� %�( ) ����
�������������
=������� ����������� � ����������� �� ���
����� ���� � 	���� �����������
�������� '�� ��������� ����������� ��������� -
���. ���
���� ������� �� � �������� �������
+��$���� ��� -�������
�� ���$���� ���.
,�� ������� ����
�����
�������� �� 	
���
���� ������	�
�
+��$��������� � �������� ������� �
 ������������ �
 ��������� ����
��$����� �� � ���� ������������� '�� ���������
�������� �
 
��$����� �� ���B�� �� ��� �������� ��
���� +��$��������� ���� ��� �� ���� �� ��B�����
�������� ��� ����������� ������� ���� 
�� �������
������
��������
+��� ���$�� ������� �� ������ ����������� ������ �����������$ � ������� ��
��� ������ �� ��������� ������ '�� ��������� ���$�� �
����� ��� �� ���������� ���������� ���� %�( ) ���
=,) %,�
+��������� ���������� '��� �������� �� ���� �������� ���� ������������� ����
�������� ��� ��B����� ��
����� ����� ���� �� ��������
�������� ��� %�( ) %,� � ������� ������ �
 ����
����� �� �������� 
��� ��� ��$��� ������$������ ����
���� ������ ��� �������� ���� ���� ������B��� ���� ��
��� �
��� ������� ��������� ��� �����������������
�����������
)�������0��
�& $��������
!������������� $���� ����� ������� �� �������� �&
$�������� ������� �� ���������� ������������ �����
����� ������ ��� ����� ��
����$ $������ /������ ��
��������0�� �& $������� �� ���������� �����������
������ �& ��������� ��� �� ��������� ����� �����
��������� �����������
)��$�� ��$������ '�� �������� ������� �� ��� $�� �� ������� ����$
��0���� �
 	���� �����
������ ����$ ��� ��������
�������� ��� 
������ ����� ��� ��������� 
��� ��� $��
�� �����B���� ���������
)������� ����������� ����������� ����� 	���� ������ �� ���� ��������
��� ���� �� ��������� ���� ��������� 5������ ����
�������� ���� �� �������� ������������
)�� ��������� � �������� ���� �����
��� ��� �������� ���� ���� ��
���������� ��$���
)�� $��� '�������� �� ���������� ��
������ ���� ������� �������
���� �����$� �� ����� ���$�� �
 ��� ������ -����.� ��
��
����� �������� ���� ��� �
 ��� ��� �
 ��� ����� ����
$�� �
 ��� ���� ������������� �������� ���� ��
����������� ����� -!, . �������� 
�� ��� ��������� �
 �
��������� ����
)�� ������ 
�$��� �
 ��� ���� ������������ ����� $�� �����
���� ��� ���������
)�� ������������
�
�������
�
��� �� ��� 
������� �
 ��� ���� �������� �� ���
������ ��$��� ���� �������� ������� ��� ���������
)��������� '�� ������� �
 ���������$ � ������ �������� ���� ��
��� �� � ���� �������������
���
�������� �� 	
���
���� ������	�
�
)���������� ����� -�). '�� �& ����� ����� ��� ��� ����$� �
 �� ����������
��������� �� 0���� /������ ��� �C ������ �
 ��
����$
$����� ��� ���������������������� ���� �� ����� ����
�� ��� �)� '�� �) �
 � ������� ���� ��� �� ���������
)������ ����� �
 ��� ���� ������� �����$ ��
����� ����
������� ��� �� ��
������� �� ��� ������ �
 ����
������
)������ ��������� '�� �������� ������ �� ������ �
 ������� ������
���������
(��������� ���	
���
������
 ������� ��� �������� ������	 
�� ��� ����$�����
���������� �� ������� ��� ������ ���	
��� �� ���
���������� 
�������
(����� ������
�
��$��
���� ��������
,������� '*+ ��������� ���������$ �
 � 
��$�� ����
���� �� ��� ������ �� ��� ��� ��� � �������� �� ���
������
%��� �������� '�� ������� �� ����$� ��� ������ ���� �
 �� ���� '��� ��
��������� ��������� �� �� ����� ������
%��� �������� ,����� ���� �
 ��� ���� ������������� ���������$ ���
���� 
���� �� ��� ��� ������ ��������$ �� ����� ���
������ =������� �
 ���� ��������� ������� ��� �����
B���������� ������
�
��$�� ��� ��$����� �������
%��� ���$� '�� ���� �
 �������� �� �� �������� �� �� �����������
*� ��� ���������� �
 ��� ��������
%��� ������������ �� ���������� ���� �������� ��� ���� �������$�
����� -���. �
 ����0�� ����� �� ���������� ���������
����� �����6 �� ��� ������� � ���� ��������� ��� ��
��� ���������
%��� ������������
-%,.
� ������B�� 
�� ��������$ ��� ��������� ���$�� �
��������� ����� ���� ��� ������ �
 � ����$�� ������
��� �� �� �������� �� ��$����� 
�����
%��� �������� � ���� �
 ��� ��������� -������. �$����� ��������
����$� ����� -������.�
%�����������$� �����
-���.
� B������� 
����� �� �������$ ��� ���� �
 �� ��� -��
 � �����. �� ��� ������ �
 ����$�� ������� �� ���
����
%����� ��������� 
�� ��� ���������� �
 ������ ��������� ��
%�( )� � ������ ��$���� �������� ����� �������
��$�� �� ��� �������$�� �
 ��� ������
%�������������� �����
����������@)���������
-%�( ).
)��������� ������B��� �������� ���� 
�� ���
���������� �
 �����$���� ���������� ,����� �� ������
������� ���� ��� ������� ��������� �
 ��� ������ ���
���������� ���� ��� ��$�� 
��� � ������
%��������� ��� �� ��� ���� ���������� ���� 
��$���� ���� ���@��
������� �������� �����$ ��� �����$� �����$� ��� ����
�������������
��
�������� �� 	
���
���� ������	�
�
%����������� ���������
���$��
20
92
.6
monoisotopic molecular weight
'�� ���� �
 � �������� ���������$ ���� ��� ����
�������� ��������� ���������� ���� ����� ������
���$���� 2��� ������� �� ������� ��������� ��� �����
�������� ���	 �� ��� "�� ���	� ���� ��� 
���� ���	 �� ���
������� �������� ���������
%������������$�� ��� )�� ���������$ ���� ���� � ���$�� ����$�� �����������
���� �
 =,)
�������0����� ��� ���	� ��� �������� ���� ���	 ���$��� �������� ��
��� ��$���� ���	 ���$�� �� ���� �� ��� ���������
������� ���� ���� � ���� �
 %,@%, ����������� D��
�� 
�� ��� �������
���� �
 ���������� ���������� �� � ������� ��������
���������� ����� ���� '�� ����� ���� ������� �� ��� ��� �
 � �����������
����� ���������$ ��� 
��� ����� $�����
!����� ��� -��������� ���. 
�
��� �� ��� ���	 �
 �� ��� ���� ���� �� �������� 
��
��$��������� �� � ������� ��� %,@%, �� !, �����
�����
%�������� ���� -%�. '�� �������� ��������� ���� �� �������������� )�
�������� ��� �� ����������� ��� ��������� � - ���
���. �� ����� !����������� �� ��������������� ��� ����
E%�������� ���$��F �� 
��B������ �����
*������ ������ -*� �. '�� ����*� � 
�� ��� ������� ������� �� ������ ���� ��
�����$� ��� ������������ ��� �� ��
���� �� 
������6
"*� � �� ��� ������ �
 ���������� ����� ��� ��
���������� �
 " ���� ��������� ��� �������� ��
" �( �� � ������� ���� � ����	���� �
 " ���
!����������� 
��$�������
���$
'�����B�� 
�� ��������$ ������� ��������� 
�� �������
) � ,��A��� ������� �� ������� ��� ��� ��������� �����
��� ������� ������ ��� ���� 
�� � �������� �������
!��	 ���� '�� ���� ������� �� ��� ���	 ��� ��� ���� ����� ���
�� ���������� �� ����$�����$ ��� ���������� 
��� ���
���	 ����� �� ��� ���	 ����
!��	 ���$�� '�� �������� ������� ��� ���	 ������� ��� ���
���������
!��	 ���������� '�� ������ �� ����� ��� ���	� �
 ��� ����������
������� �� ��� ���������� ������� ���� +2&%�
!��	 ����� '�� ����� �
 � ���	 �� � $���� ���$���
���
�������� �� 	
���
���� ������	�
�
!�������� ��
����
������ -!/,.6
":# ���@( ����� ��9 ����@( C��� <�8 ����@(
���&!*:� "�8 ����@( C&�!*:� �& 9�:�
!���������� ����� -!, . � ������B�� ���������$ 
��$��������� �
 � ���������
��� ���� ������ �� ��� 
���� 
���� 
��� ��$��� �
 ���
'*+ ��
��� ��� ��
��������
!�����������������
����
������� -!'%.
%���
�������� �
 �������� �������$ �
��� �����$; ����
��� �������� ������� ��������������� ���
$������������� !'% �������� �� �� ����$��� ���� �
�����������
!�������� ��� -������ ���. )�� �������� �� �����$� 
��$��������� ������ ���
���� ������������ �� � ������� ��� %,@%, �� !, 
���������
!�������� ��� ���� � ���� �
 %,@%, ����������� D��
�� 
�� ��� �������
���� �
 ���������� ���������� �� � ������� ��������
!���������� �� 
���������������
!������� ��� ������ �� ��� ����� �$ ��������%�����
������ �& ��������� ��� ���� �� ��� 
���� ����������
!������ ��� -���
���$���� ���.
�� ��� ��������$ 
��� �) ���
����� �� � ���������
��� �����$ � ������� ��� %,@%, ���������
!������ ��� ���� '�� ��������� %,@%, ����������� )������� ��� ������
���� �
 � ��������� ��� �� �����$� 
��$���������
������ ��� %,�
!������ ����������0����� '�� ������
������� �
 ���������� ������� �
 � ��������
)������� ����� ���� ��B������ ��������� ���$���
����������������� ���������� ������������������ �����
�������� ��� �����$�� �������� �
 � ���������� ��������
!������ ��B������$ '�� ������������� �
 ��� ����� �
 ����� ����� �� �
���A��� ������� �� ��������
!������� '�� �������� ���
��� �
 �������� ��������� �� � $����
������� ���� �� �����$���� ������ �� � $���� �����
!��������� ,��������� �������� �
 ��� ������� ���������� �
 �����
��� ��� �������� ��������
!����� ���� �������� )������� ������
�
��$��� ��� ��������� ���������� ���
B��������� ��� ������ �� ������ ���� �������� �� ����
������ 
��� � ���$�� ����� �
 �����
G�����
������� )� ���� ������ ��� ���� EB�����������F �� �����
����� �� ���������� )� $�� ��������������� ���� ��������
B�����
������� �� ��������� ��� ��� ��A������ E��������F
�� ������� �� ���� ������ �� ���� ���A����
�
������� )������� ���������� �
 � ���� ������������ �� �����$
��� �� �� ��� ������� ����������� 
�� ��� ������������
�
 	������ ����$�� ���� �
 ��� ���� ���� ����������
�� ��� �������
����
�������� �� 	
���
���� ������	�
�
���������� '�� ������� ���� �� E�������������F� /������ ����
���� �� � ���$���������� ��� �� ���� ���� ����� 
��
��� ���������� ����������� �
 ��� 
���� ��������� ����
�������� ��� ��������� ���� E�����������F �� $��������
�����
���������
10 % valley
10 %
m∆
�
��� �� ��� ���������� �
 ��� ���� ����� �����������
H �@��� +�� � ���$�� ���	 ���� �� �
 ���$�� �����
$�� ���� �� ���� � �� � ���� ��������� ��� ����
������� ����� ��������� �� �@� ����� �� �� ���
����� �
 ��� ���	 �� � ���$�� ���� �� � �����
��� 
����
���� �
 ��� ������� ���	 ���$�� -
�� �������� 
���
����� �� ���
 ������� ���$�� ? +2&%.� � ������
��
������� 
�� ��
����$ ���������� �� "#1 �������
'�� ���	� �
 �B��� ���$�� �� � ���� �������� �� ����
��� � ��� ���� ��� ��������� �� � ������ ���� �� ���
������ ����� �� A��� "#1 �
 ��� ���$�� �
 ������ ���	�
�������$ ����� -����.
50
00
50
01
mass resolution
'�� ��������� �� ������$���� ������� ���� ��
����$
���$���� �� ������������$� ������
,����� ����������� � ������� ���$� �� ������� �
������� ������� �����������
, , ��������������� !������� ��� ��������� �� � �������������� $�� �� ��$�
������� ����$�� �������������$��� ��������� ,���������
��������� B��������� ���������� ��� ��� ����������
����$�� �
 ��� �������� ��� ���������� '�� ��$������
��������� �
 ��� ��������$ 0���� 
��� ��� ���$�� ������
���� ���$��� �� ��� ��$������ �
 ��� %� �
 ��� �������
���� ��������
�����
�������� �� 	
���
���� ������	�
�
,����� ����������������
��� %�����
� ������ ����������� ������� +����� � ���� ����� �
����� ������ �������� �� 
����� �� ��� ������ ������
'��� � ������� ���������$ ��� ������� �� ������ �� ���
�
 ���� ������ '��� �� ��
� �� ���� '�� ������� �� ������
��
��� ��� ������ ����� �� �������� ���� ��� ���� �����
��������� )� � ������ ����������� �
 ��� ����� �������
�������
,�$������������ �����
-,@�.
'�� ����� �
 ��� ��$��� ���$�� ��� ��� ����� ���$���
�� ���������� �
 ��� ����������� �
 �� ���������� ��
���������
,��� ���������0�����
%�����
� ������ ����������� ������� &���� ���$� ������ ����
����� ��� $����� '�� ������� �� ����� �� � ���������
������ ��������� %������������ ��� 
������ '�� ������
������ �� ������� ��� � ������ �
 �������� �� �����
'�� ������ �� ���� ������� �� ��� ������ ������ �������
�� ��� ��� �������� ���� ��� ���� ������������� ���
�� ���� ���� ��� ����� ������� ������ ��� 
�����
'����� ����
������������ -%,@%,.
D��� �� ��������� ��������� ������ ��� ���� �����
��������� '���� ����� �
 %,@%, ���������� ��� ��
���
������
'��� ����� ������ � ������ ����������� ������� �������$ ��� ������
���� ��� ��������� ������� � ���� ���� ����� �
 �������
� ������� �
 ��� ������� �� ���� ����� ���� ���� ������
������������ ��� ��� �� ������ ���� ��
��� ������
�����$ ��� ������ ���� ��� ���� ������������� �
������� �
 ��� ����� ������� �������
'�������� 
������� '�� ������ ����� 
������ �� ����� ������� ��� �� ���
������ �� %�( )� 
������ 
�� ������� �����������
'������� ����������
-���� ��$ 
�������$ ��
������� ����������.
)������� ���������� �� �������� 
�� � �����
��� ����
���$� �� �������$ � ���������� ����� ������� ��� 
���
������ ��� ������������� ���� ������ ������� �������
�����
'�����
�
��$�� -'*+.
��������
,�������� ���� �� ���� �� ���� ������ ���� � 
��$��
�����
'����$ '�� ������� �
 ���������$ ��� %�( ) ����������I�
����� ����� ��� ���$�� �������� �� ������ ��� ���� ����
����� ����������� ��� ��$������������ ����� 
�� � �����
��
���� �
 �����������
'��������������
���������������
'���� ��� ���� ���� ��� ����������� �� ������� ���
��
����� ��������������� ���������� ����������� )
 ���
������ �����
���� �� ��������������� ����� ��������
���� 
������$ ����� ���������$ ���������� 
�������
�� , , �������������� $�� ����������������
D��� ���������� �����$������ ������� ���� ��������� �� " ��� �����
����
���
��� �����	� �
�� �
� ���
�� �����	��	��	 ����	�	��	 �	�
��	��������	��� 
�
����� ���
�
����� ��
���� ��� ����	��� �
� �!�
"�� #���	� �
 ��
�������$� %&� ������ �!�
���'���� 	 �!� �!!
���'���� 	 	��#���#	� (�
� ���#	� (�� �)
�������' ��������$����' �� *+���,��
��
�������' ���	������� ��!
�$����	 �	����$ �!� ���
������� ��
��-��� �	��� ����� ���
��-'������ 
�
����� ��� �� ��������� �
����� ��� �	.�	��	 
!
�������� ����������	 ���
������	��� ����	�� ��
������	��� ���	���	� �
����'����� ������������ �!
��� �� ����	� ���
����������� ����� ��
�������	 
���$	 ����'��� !�
�����	 ��	�������� �
�������	 �����	� �(�
�#	��$	 $	�� ��
�#	��$	 ���� �
!
�#	��$��$ $	�� !)� !�
�
����� ��
����� �	��	� ��
� ��
���-	 $	�� 
���-$���� (�
������������ ����	����� !�
���-$���� ����������� ��(
���-��$� ���� �� $���� �
����� 	� !
����� /0� 	��	� ��
����� �0 $�� �	��� (�� �)� (!
����� ����	��� �(���� �
��
� ��!� �
�
1�� ������	 �
� �)�
�������������� �
������'������ ��
1�� �))
���	 	2����	 ��
�� ' ���� �� ����� ��
1������	��� ���	 �
� 
�
����	�
����	�������� 
(
 	��	���� ���
�	�-�$	 
�
���- 
(
����	���$ �������' ()
�
���	������ ��� �	��	� ��
+"� ��	�����' ���� ���
+"� �"*�% ���
���� ��#	� �
�
����������� �
(
��� ��� 
!� !�� ���
��� ��� 
!� !�
�����	� 
� ��)
��������' 	�	��������	��� ��
������ ��2� 	 (
�����	� ������'�	� �(� �
����	���� ���� ����	 �'��	� 
�
������$� ��� $	�� �!!
�����'��� ��
����� �� ����	� ���
�����
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
3	��	� 4	��	��	�	�� 5�� /�#	�
+��'��$�� 6 �))� 4��	'�7+0 7	���$ ���0
%�1/�8 (���
�()(���� 90�� ��#	�:; (���
��))�
�� 9��	�������:
��� �����
�������� 	�	�$	�� �(
�	�� 	.��#��	��� 
� �!
�	�� <���� �!� �(
�	������ ��
�	�	��������� ���� ��
��������	 �
����$	 ����	 ��
� �
!
��	����� �	��� � �)
��	������� .�����' ��
����������������' ��	�'������� 	 ���
+%� ���
��	����� -�� �
�
��	����$� ����� ��� 	�� �
� �!�� �!�
��������� �� ��	 ����������� 9+%�: ���
������ �� +�������	 1�������� 1��	
�������$ �((
����������� ����������� �(
����	�������$ ��	 �����	 ��(
����	���������� ����	� �
��� ����#��' ��
�������� ������ !)
��������������� -	����� �
� ��� !
���������� �������� ��
���#	������� ���	�� �	��	����� �(�
������$ 	�����	�' 
�
+����������	 �������$
������ �� 
�
��� �������$ 
)
��#	� ���� �
��#	� ���� (
���������-	� �!
���	�����#	� ��
���'���'���� 	 $	�� ��
��'������������� ��	� (�� (
��� ��� ��$ (
��)� �(� �
� �
� �!�
����	��� 	�	����� ��
���#	 ��	� �	��	����� ��)
�'����	 '	� 
�
�'���$	� ����� 	 �)
���'�������' ��2' ��������� ��� ��(�
��(� ��!
+'�'	 ��!
���	����$ �
�'��	��� 
�
�
 ������	� ��� ���$	� !�
 ������	 �	������$= �(�
 	 ��#� �	.�	����$ ���� ��
���
 	� #����	 ��
 		����		>	� ��
 	�' ������ ���
 	��'	 	2�������� �(�
 	�������$ ��� ������ ��
 	��	���� �� ��	 ����	� �
 	��#��������� �((
 	������$ �)
 	�	�$	��� ���
><���	������ �
 ���'��� �	�����	 �)
 ���	�	��	 $	� ��� 	�	��������	��� 
�
 ���	�	��	 ���� !�� ���
 ���	�	������' ���	��	 �����	� 
!
 �$	����� ���
���$	� !
���� ��' ��2'�	�>��� ��� ��(� ��(� �
)
 ������������ ����	� �
 ������	�	�� �������� �
 ��������� �!
 ��������	���� 
�
�/"�	� �����	 ��	�������� �)
 ����	 �������$ 
(� �(�
 ������$ #��#	 
�
 ��� 	�	�$	�� �(
�
�= ���� ��� �
�� ��)
� ��� �	.�	����$ �)
��5" �(
	�	����� ��� ������
%�� ��
��� $	�� 
	�	����� ��	� ()
��	� ���	�$�� �����
	�	���� 	 �� ��
	�	����	� ������� �!
	�	����	� ������� 	��	��� (�� 
�
	�	��������	��� ��� ������ !�
 	������$ �
�������' �
	�	��������' ���������� ���
	.����������� ��� 
�� ���
	���� ���	����	 �
!
��% ��(
	���������� �� �% ��
	������� 	�����	 � �������$ �(�
	��'�	�$�'��� ��
	#�������� 
��� $	�� 
	2����$	���	 �' ��$	�� �(!
	2��	��	 �	.�	��	 ��$ 9��5: ���
	2��	����� ����	����� ��
	2�	���� ����������� �
�
	2�������� ���
�
���� ���� ������ �	�� ���
����	 ����� 
!
��������
���� �	��#	� �!
������������� ��� $	�� �
������������	 $	� ������ (�
����	���$� ����� !�
��2��$ �������� ��
�����	 ��������� 
)� 
�� 
�����	��	��	 �
���$��$ !)
���	����$ ��!
�������$ �
�������$ �!�
	��	�� �
���	 �)� ��
��� ���� ������$ �
�����	� ��������� ��� �'������� 9�5�%+3:
���
���$�	������� ���	�������	 ��
��		 ���< 	�	��������	��� ��
�5�%+3 �� ��!
�
$	� ����	�� ��� �)(
$	� ����������� �!
$	� ���	� !
$	� ���$� �
$	� ��>	� ��� (�
����-�	�� 
�
$	������ �
$���� $	� �(
$����� ��� 	�' 	 
�� �)�
$�'�	��� ���
$�'���	 �
� 
$�'������	��� ���
$�'���'���	 ����	��� ��
$�'���'������ ��!
$�� �	�� ���� �(� (�
$�� �	�� $	�� ��� ((� ��� �
� �)
$�� �	�� ��-	� �
$��� ��$� �����	 	2�������� �
�
$���� ����� ���
$���� ��	 ���
�
0	� 	�����0���	������ 	.������ (�
��$� 	�	�$' +%� ��
��$� ���	����� <	�$�� ����	��� ��� (
� �)
��$�������$���� 
�� !
� ��(
0�4 ����	��� �
�� �
�������$����	 �(�
����$	�	��� �)�
$	� �)
���'���'���� 	 $	�� �!
����>����� ���	�-��$ �)
��� +�������	 1��	 �������� ��
� �(�
0&*+ ��
�'��� ����'�	�� 9.�� �����	 ���	���
���$��: ��(
�' ���'��� ��
�' �������� ��
����	��� �
� �
�
	
���$	 ����'��� 
�� 
����' �������	 !�
���$	 ��������$ 
��� �>��	 >��� �������$� %&� ����� �!�
��� �>�� >��� �(
���������	 (�
��������>	 �0 $�� �	��� (�� (�
���$	� �$	����� �)���)�� ���
������� -��	��� 	�	�$' ���	� ��)
���	����' 
���	���� �	�	�	��	 !�
�� ���	���� 	 
�
��� 	2����$	� (�
��� �	�������� ��
��� �����	 ���
���������� ���
%&� ����	� �
����� �(� �)
����'����	 �
� �
�
���	�	����� �������$ �(� ()
�	�����	� ��
����� �
��������	 �
������	
��+ �)!� �(�
�(+ �)!
%�����	��� 	 �������' ��$� 9%+"5: ��)
������	� �)!
�������� ���	� �(!� ��
?���	 �	�� ��
�
-	����� ��� �(
� �)�
������������� ���
��'���� �	��� 	� ���
-��	��� 	�	�$' ����������� ��!
�
���������' ����� !
���������' <��-���< �'��	� ��� !)� !
%�� ��
��� &"�� 
�
���$	 $	�� ��� �
)
���	�� �����	� !)
��	 �����
���	� ������	 ����� ���	����� ��
*+���,�� ���� ��
� �
�
���	�� ���$	 
���	�� 5�� ����'�	� ��!
���� ��
��� ��$ �������' (�
��< ����	�����	 ����	��� �)
��< 	�	�$' +%� ��
��< �����	��	��	 $���� �)�
��< ���	����� <	�$�� ����	��� �)� 
�'���	 ��!
�'��� ����	� ��� ��!
�"*�% ��(
�"*�% ������	� ���
���-	� ����	��� 
���� �������' �)!� ��!����� �(�� �(!
���� ��	�����	�	� ���
������������' �((
�������$ �((
���� ��	�����	��'� &�������	 �)!
�������$� ����� $	� !�� ���
������	� ��(
�����2 ��(
�����2 ������	 ���	� 	�������� ����������
9�"*�%: ��������	 ������(
�	����	�	��� �� �% ��
�	�����	 ����	��� �(
����� ��
�	��'� 	��	���������� �(
���	��	� �
����� ���'��� �)� �
�
���������	 ������������ ��(
���������� (�� 
(
���������� $	� ��
������� ���	����$ 
�
����	 ��	�#�$	� �
��2	 �	 ��� 	2����$	� �
�
�������' (!
������������ ����	� �(
���	����� <	�$��� 	�	��������� 
!
���	����� <	�$�� ���-	� ����	��� ���
���	����� <	�$��� �
������������ ���� �
!
��+ ������������ �	�- ���
�@4�� �(
��� ��(� ��!
�A &%5� ��
�������������	�� 	�	�����'>	�� �
����� ��	������� *+���,�� ��
�������	 $	� ���� 
�
�������	 $	��� �������$ �(
�������' ����$	 ���� ���
���������	�� �����	2	� ��!
�
��������' �
)
��������' ���������� ��
�����< �0 ���	�#��� (�
����#	 ��� ������ ��
/�&0�� �(
�	� ����$	 ���#	� �
�	����� ���� ���� ���� ��!
������	������	 ��(
�������� 	�	�$	�� �
������������� !�� ���
���	������ ��� �	��	� ��
����	�� ��� �� �����	 ��	�������� �!
�
���$��	�� �(
���$��������� 	 ����'��� �
)
��	 ��	� �������� ���
�#	��������$ �(
�#	���' �������� �)�
�#	���� ��$� ����	��� ��
�#	��<	����$ (�
�
���	� ��� $	 ��� ��$ ��
�������� ��� (
� �!)
�����	�	��� ���� 	�	����� !�
���	�� ��� ���� ���
&1�� �	�� <�����$ �!
&	���	� ������$ ��� 
�
�	��� 	 �������� 	�#	���	 �(�
�	��� 	 ���� ���$	������ �(���(�� �
�� ����������� ����������� �(�
�� �	.�	��	 ����������� �(�
������	 <��� �����������
����������� �(
������	 <��� ������� �	.�	��	
����������� �(!
�	��� 	 �	.�	��	 ��)� �()
�	��� 	�� �	�������� �� $	�� ��
�	��������� ���� �
�0 $�� �	�� �(� �
�����	� ������'�	� �
$����� ��
�	����	�	�� �(
������ ((
��������	 ����	�� ���
��������'������ ��!
�%� �	����	�	�� ��
���-��$ �	� !!
���� !
��������- ����� �
��
�����
��2	� �����2 !�
����� ����	��� ��
������ 	�������� ���
&�� �(�� �(
� ���
���'���'���� 	 ����	� ������ �(
�	��	���$	 �
���	 ��>	 �!
���� �����	 	��' 9&��: ��)� �()
������������������ �� ��������� !
� �(
�������������������' �� ���	 �	��� 	� �(
��<	� �����' ��
&&" ��
��	�������������� �� ����	��� �
��	���������� �)� �
 ����$ �����	 ����������� (!
�����	 ��	�������� �
��	������ ��� ������
� �()
��	������ ��� ���� ��
��	�������������� ���	�	����� �������$ ��
��	������#	 $	�� ��
����	�� ��� � 
�
��	�	�#������ %&� ������ �!
��	�	�#��$� $	�� �(
��� ��� ���� ���
��,�� ���
��,�� �	.�	��	 ��� �(�� ��(
���� �������
��	����� ���� �(�
����	��	 ���������� �
����	��	� (!
����	�� ����' ��� �
�
��	�#�$	 �)
	2��	����� ��!
������	� !)
� 	����������� �(�
��� (!� �
� 
�� �
)
����	��'��� �)�
��'���� �)(
����	��	 (
����'��� ���
����	����� <��-���< !�
&�� �(�� ��)� ��
� ���
��	����� �������� ���
���� ��
����	� ����������� 
�
�
.�� ����� ��	� ��)
�	��	����� �(���(�� ��)
.�� �����	 ��� ���� ���� ��!� ���
.�����'� ��	������ ��
.������������� ��� 
� !)� !�� �
�� ��
.����������� �� ����	�� 	2��	����� ��!
.���������#	 ����	����� ��!
.�	��	� !�
 ������	 !�
�
�� ������#	 ���	����$ 
�
<���	 �(
�� �����	����$ 
!
3�'�	�$� ����� ���
�	� '��� 	 $	��� ��� &"�� ��!
�	 ����$ �$	�� �
�	 ������� �
� �
�	 ������ �� ��-'������ �)�� ���
�	�	�	��	 $	� !�
����� !�� ���
�	��	����� ��!� ���� �()� �(�
���#	������� ���	�� ��	� �	��	����� ��)
�	����� ����	��� �!�� �!�
�	�' ������ (�� ��� ���
�� 	� #����$	 (!
�	�' ������ ����	��	 (�
�	�' ������ ��� ��$ (
� (!��)� �
�	�' ������ �������� (�� �
�
�	�' ������ ���	 �
!
�	������	 $	�� !�
�	��� ��������' ��� ��� ��� !�
�	�������� ��!����
�����	� �(!
��� $	�� �)
�	���#��$ $	� ��	�<	����$ �
�	�<	����$ ���' (�� �!
�	#	��	 ����	 ��������$����' �)
�	#	�����	 �������$ �(
3/"�	� �����	 ��	�������� �)
3& 0&*+ ��
�
���������'�	� �	�	#����	 ��
� ��!
����� �
)
�����	 	�������$ ��!
�����	 ��	�������� ��� ��(
�����	� 
� !�
�������$ �(!
��� ���
�&"�� �
���'���'���� 	 $	�� �!!
�����	�� �����	2 �
�����	 ����	� �
�
�����	 ��	�������� �(� �
(
�	�����#��' 
)
�	.�	��	 ����������� ���
�	���� ���� ��� 
�
��	�����	� �� $	�� ��
��	#��$ ����	��' ��
��� �����
���#	� �������$ 
)� 
�� �(�
��������� ��� ��(� �
)
���#	 ���� !�� ���
�� ��� �>� 	 ���
�� ��� � 	�'� �������	 �
����<��	� ���$	 ����'��� !)
���������' �
� (!
����������� �����	 ��	�������� �!
������� �	�������� ��
��	����	 ���	 �
���� ������$ !
 	�	����� 
!� !�� ���
���-��$ 
���-��$ ���� !�
��������� �)
��������� ��� ���� ������$ !)
�������$ !
�����	 ������	 ���	����$ 
�
����-��$ $	� �
�������$ ��
���� �� �>����� !�
�����	 ��	�������� �
����������� ����'��� !)
����������� ����� !�
��	����$ ��	 �	��	����� �(�
�����$	� ��� %&� ������ ��
�����$	 �������� ���$��$ 
�����$	 ��������'� �� $	�� ��
�����	$'� %�� ������$ ��� ������ ��
����� ��� 	�� ��� �!� �!)
�������������	 ���< ���	� ��
������	���� ��
������������ �(�� ���
���������'� ��	�'� ������ 	 �((
���	�������� �	�� ������	 �
�
������� ����	��	 �
�
��� 	� ���� ��	�����	��' ���� ���
�	��	�����	 
���	�	����� �������$ �)
�	�� �����	 ��� �
�
��	��	����� ���	�	����� ����� ��
��	���� ��� ����#��' ��
���#	����� ��
���� ���� �	��� ��(
������	� ��� �)� ��!
�����$���� �
���	 ��$ �������$ ��)
���	�������$�� ����'�	� ��
���	 	��' ��� 	2�������� ��)����� �(�
�����	 �!� �
�
����'��� ��
��������� (�
��������� ���#	 �
� (
5@�,5@� ���
����-��$ '	 
�
������������ �� 	 
������	 ��� 
�����	 .�� �����	 ����'�	� ���
5��� ���	 �
5��� ����	� ���
��'���� �����'��� �	�-� �
(
��'���� �	��� 	� ��
�<�� ��	������� 	�	��������	��� �
�
�� 	��������$ �(
��	� �
� 
�� ��!
�� ��� $	�� ��
A7 ���	�� ��(
�
#	������ ���� �������$ !�
#	������ �����	�� 
(
#	������ �'��	�� 
�
#�����	 '	� 
#����$	 ��
#����$	 ������$ ��
#������� ���	$���� �(
#�������� �(� �!(
�
<��	� .�����'� �	�� �(�
<��	� �����	 ��������� /0� 	��	� �	�$	��
�(�
<	� ���<�	�� ���$��$ !�
<	��	�� �������$ (�� 
�
<��-�������� ���� ��� ���$ !
�
B���' ����� 
!
�
'���� ��
'���� �	��	� ��
� �((� ��
'	��� �	�� �'���	 �
(
'	��� �<���'��� �	������$' ��
�
>��� ��� �>��� �	$���#	 �������$ 
�
�
���� ��
����	�
��
 �	��������
���������	 �
 ��������� 
 ���������� ��
��� �� �������� 
���	�	
������ ������	����
 ��	 
����
��������� � ���� ��������� ������ �	��
�� 
�! "�#�$�"�"#%�# &���'(����)* "�#�$�+��,$�# &-��(�����()
�
�. �� ��� (�	����� �/	�� ����	� ��' 	��� ����� ����	�� ����
���� '�(������'
 .� ���� �� 0�(� ��� 0�(� ���� ��� ����	�( ��1/��(�
��' ������� 0/�(���� (����� �� '���(��� (��������'2 �� � ������ (���
	��� �(�������� ��� ���0��	�' �� ��������2 ���� .� .��� �� ��/'� ���
����.��� �0 (��� 	��������	 ��' �'����0� �������� '�/� �������
 .�
���� �� ������� ��� �������� &�������� �� ���,33#)! ��� (�	�������� �0
��� �������� �4������' �� ��� ������ �0 �� �������	2
���� ������	�� ��� ���� (�	���4
 ���� ��� (�	����' �0 �������
���/���' ��������2 ��/'���� ��� ������	� �0 �� �������	 ��1/����
�� �������(�� �00��� �����' ��� (���(��� �0 � ����'��' ���������� �1/���
	���2 ��� 0��� �(1/������� �0 ��� �/	�� ����	� .�� ���� ��������
�� ��� �����(����� �0 �� ��'/������ ������(�2 -4�(��� ��� ��	� ����
���� ��. 0�� ������	� ��������! 	��� �0 ��� '��� .��� (�������� ��
'�������' �� 56�����	�(� 0�(������72
 �(�/�� �0 ��� (�	���4��� �0 ��� ��	���
 �.��'�	�������� �����
�(����	�'� ��� ���(����������� ��� ���� .�'��� /����8�' �� ��� �����
'��' ���������� ��' '������ 	����'2 ��� ������	� �� ��� � ������
	�4�/�� �0 ��������2 �� �� �	�������� �� '������ �� �� �/����� � ������
�.��'�	�������� ���(����������� ���2 9�/���� 	/������ ��	���� ���
���'/(�' �� '�00����� ������ �0 � ���	/������
 ���� '������� �� �����4�
��������
 �� '�/� �����	��� �4����	����
 ��' ��������' �� � �/	���
�0 ��: ���� &��� 0��/�� ,)2 ��	��� �����	��� ��' ��� ���������� �0 ���
�������� ��� /�/���� ���0��	�' ����'�� �� ����' ������� 	�'�0�(�����2
;�(� ��� �������� ��� �������' �� ��� ��� 	����4
 ��� ������ ��������
��� 	/(� 	��� ������ ��' (�� �� 0/����� �'����0��' ��' (����(����8�'
�� 	��� ���(���	����2
�
������������
�������� 	
� 
��
���� ���
����������� �� ��� ��� ������
��� ������� ��� ��� �� ���
!����� �� ������"� #$�
!�"�%�����"�&% '( )�� &���
�%������ *+ ,*--./ *0-01*0-2(
3���
�"�������� ��� ��� &���
�%������ 
��� ��& ���� %�4� �
4��� %��% ������&���� &%� ����
��� 4��� �55� ���& 5�� &��� ���� �
&��� 3%� ���&���� �� 6� �&���
�� &%� ���� ��&�� 5��&%�� ��������
��&%��& 
����
�&���(
* '�&��
� &���
 � '�0������� ����������	� �� ��� ��	/������/� �������� �0 (�	���4
������� 	�4�/��� ��<� (��� ������� ��' ����/� �4���(��
 �� ���< 0�� 1/���
�������� (������ �0 �4�������� ������2 ��� �(��� �0 �����(������
�4���'� 0��	 '�/� '��(�����
 �� '��������(�
 �������
 	�(���������
���(��	�����
 ��' ����� ������(�2 �� ��� ��� �/����������� 0�(�������'
�� ��� ���� '�(�'� ��(�/�� �0 '������	���� �� 	��� ���(���	����
��' ��� ������������ �0 ����	�( ��0��	�����2 :������	���� �� �������
	�(� ���� ���(��'�' �� ��������!
� ��� ��(������� 0�� ����������/���� ��������
	��
�� �����������
��	�	 ��� ���� (����'������ �	�����'
 .��(� 	�<�� ��� 	����
�' 	��� ��������
 ��' �����'/(����2 ��� �����/���� ��� ����
0/����� ��(�����' �� .���2 �	��� �������� ��0�.��� �0 �����
(�	���4 ���� �������� ��� ���� '�������' �� �/(� � '�����
���� ���� ����(�	�/��� �4����� (�� /�� �� ��' ��� ��������
���/���2
� 
���� ����8����� ��(���1/�� ��' '���(���� 0�� ��		 	�����������
���� ���� �������'
 .��(� ����. ��� �������� �0 �������� ��'
�����'�� .��� ���� �����������
 �((/��(� ��' ����/���/�2
;����� �����'� 0���	�������� ����.� 1/�(< �	��� �(�'
��1/��(� �������� �0 ��. �	�/��� �0 �����'�� �� ��. �/�����
(���2 =��� ��� �������� �0 ������������������ 	�'�0�(����� (��
�� �''�����' /���� ���� ��(�������2
� ��
����	� ����<� �� ��� '������	��� �0 ���� ����/���/�
:
= ��1/��(��� ����	�( '�������� �0 	��� '�00����� �����
���	� ���� ���� ����������' �� � ����� �����' �0 ��	�2 �����
	�( ��1/��(� '��� �� ���.��� .��� �		���� ����'2 9�0���/�
������ 0�� 	��� �����
 ��� 0/�(���� �� /�<��.�2 = ���� (�'�
�
nontreated 
Cell
IEF IEF IEF3 3 310 10 10
treated: stage 1 treated: stage 2
S
D
S
 P
A
G
E
S
D
S
 P
A
G
E
S
D
S
 P
A
G
E
d
d d
u
u uu u
u
d
���� �� ��������� 	�
	��������
� 
� �
��	��� 
� ��� ���� ��
���� �����	��� ����
��� 
� � 
	
��
��� �
 ��� �
��
	�������� ���� 
	
����� �	� ��	���
���� � ��� � 	��
���������
7�� "��� ��� �� ������
�����&���
����
��&(
��4����"��&� �� "��� ��� &���
"�&�� ���� � ��� 
�4����"��&
5�� ���&��"� ��������(
���&��"� �������� ����
 6�
�"�����6�� ��&%��& ����"�
��8��� � 
�&�6����(
* '�&��
� &���
0�� 	��� ���� ��� ���� ���'/(�
 ����������� ����(��� �0 ���
	�
= (�� ���/�� �� '�00����� ��������2 >/�����	��� 	��� ����
����� ��(�	� 	�'�0��' �� (�	���4 ���� ������(�����
 (���/���
������
 ��' �������	����� ��0�/��(�� ���� ���/�� �� �����������
�������� 	�'�0�(������2 ?��.��'�� �0 ��� :
= ��1/��(� �0
�������	� �� �� �������' �� ���� �	������� 0�� ������� �'����0��
(����� ��' (����(����8����� .��� 	��� ���(���	����2
� =(�������� �� ��� '��������� 0���' �0 ����
��������	 ���� ����
��������' �� '������ ����� 0�� (�	������ ��' �/�'���� ���
�/�� �	�/�� �0 '��� ���'/(�' �� ��. ���� ����/���/� ������
��� 	����'�2 ;��� �� ���� .�� �� .��� �� �������� �� '��. 	���
����0/� (��(�/����� 0��	 ��� �/�� �	�/�� �0 '��� ��������'2
=''���������� 0�. '������	���� �� ������' 0���'� ��� ���� ����0/�
0�� ������	�(� ��������!
� ��(��	����� ��' ���	�'�(�� ������(� ��' 0�(/��' �� ��/�
'���� ��� ���/(�/�� ��' 0/�(���� �0 �������� .��(� ���� ����
�������' �� <�� ��8�	�� �� ������' ����.���2 ��� ��(�������
0�� 	�(�� (����(����8����� �0 �������� ��� ���� (�����/�/���
��0���' .��� �����(� �� ����������� ��' �((/��(�2 �0 ������'���
.��� ���������
 �'����0�(����� �0 � ������� .�� �� ������	2
���� '� ���� ��1/��(��� �0 �������� �/��0��' �� �6@� �� ���(�
����������( 	����'� '�������� ���� ���� (�	����'2 �����
(�/�' �� /��' ���� 0�� (��������(��� ������� �'����0�(�����
/���� �	��� �(�' (�	�������� ��' ����� ��1/��(� ��0��	��
����2 /� ��� ��(���1/�� ������' ��� ���������� ���. ��' ����.
���� ��. ����/���/�2 �� 	��� (���� ��'��/� ��' �4������� '�
���� �	��� �(�' ��1/��(��� �� �� ������ ���'�'2 ���� ���
��������� ����	�( '�������� �� �� �/00�(���� �� �(1/��� �����
��1/��(� ��0��	����� 0�� � ������� �� 	��� ���(���	���� ��
�'����0� ��
 ��' �� �������� ��� (�	����� �	��� �(�' ��1/��(�
.��� ��� ���� �0 �������(� ����������� �0 ��� ���� ���'��� 0���
	��2
� �������
� ����
����	 /���� 0�/����(��� ���� ��' ������ ��������
���� ���� 	�'� ��������� 0�� '�00�������� �������� �0 ������'
��	����2 A/���������� (������ �� �4�������� ������ (�� ��/� ��
������ /�(�����'2
� �!������
�	 �� ��������
���� ����
������ >�� ��� �������� �0
�	����� ������� �/�����
 ��� '���(���� �0 �������� �� ���� ��.
�4�������� ������
 '����	������� ��' ����� �0 ������� 0/�(����
	��� ����� 	����'� ��� /�'�� '������	���2
��� ������ �����' ����� '��(���� �� ������(�
 .��(� �� �0��� ����
'�0���' �� �"#���		��
 ���������	� �� �$��		���� ���������	�2 ���� 	���
�0 ��� ��(���1/�� �	�����'
 ��� �������� ��(�	� '����/��'! �����
�
9����5��"�&� � ���� 6� �&���:�
�� ���& �5 &%� ��� �
���� 5��
�"���4�
 ��"��� &�� ��� &����
��
 ���
 ��6���&��� ��� &� �(
� %��% ��4�� �5 ������ �� ��8����
5�� &%�� &��� �5 ������ %� ���&� �
������ �� &%� ���� �5 ���&���
 %�"��&��(
3%� &� %������ 5�� 
� ��4�
��8��� ��� ��&% "��� ��� &���
"�&�� ��&����� &� 6� 5��&%��
�4�����
(
'��&��� ��6����� ��8����� "���
��� &��"�&�� ��������(
3%� "��& �"���&��& ��
 ���"�
����� "�&%�
� ���� 6� 
�� ��6�
��&�� �� &%� �4��4��� %��&��(
* '�&��
� &���
������'�	�������� ��' 1/�������� ���/(�/��� ��� '�������'
 ��0��	��
����� �� 0/�(����� ��' (�	���4��� �0 ��� �������� (����� �� '�����
	���'2 >�� ���� �/����� �%�
����
�� ���������	�	����'� ��� ������'
.��(� '� ��� '����/�� ��� �������� ��' <��� (�	���4�� ����(�! �2�2
�00����� (���	��������� ��' ���(�������� ����8�����	��� ���(���	����2
���
�����������
 �� ����	�
��
��� �������� �4��(������� 0��	 ������	�(� (�	� 0��	 ����	�(�/���
(�� ������(� 0�� 0����� ��. '�/� ������� ������� �'����0�(����� �� ������
0��	�' (��� ����� �� '������' ����/��2 =��� ��� ����'����� �0 ��� '���(�
��' �������
 �������� ��' ������� ��4�(����� ��/'���
 ��' (��(<� 0�� ��'�
�00�(�� (�� �� ���0��	�' .��� ���� ������(�2 �����(�� ������(����
.��� �� (�	���� ���	�� ����/� '������ ��	����
 '������ ����/� ������
�' ��	����
 0��' 	���(/��� 	��<��� �� ��'� 0�/�'� 0�� '��������
	������ '������� ��' ����� �����	����
 '����	��� ��' (����(����8�
������������������ 	�'�0�(������2 �� (����(�� (��	����� �� .�/�' ��
����������� �� �/����� ��'���'/��� �� ���'�(� �������� �� �������2
 ��������� ��/'� ����( (��� 0/�(����� ��' 	���(/��� ������8������2
=������ ��� 0���' �� 	�(��������� 0�� �����/� ������(� �����2 6������
	�(� �� ���� ������' 0�� ����� ������(� 0�� 	��� '�00����� �/������
0�� ������(� 0�� ����'��� ������ �0 ������ ��(������
 ����
 (��'
'��/���
 ��' ����� ��������(��
 ��(������� ��� ����' �0 (��� ��' 	���
	���2 >�� ��� ���� ������(� � (�	����' �������� .��� ����	�(� ��
�	�����'2
���
�	�������� �� ��	 ����	�� 
� ���	
=� �����'� 	�������' �����
 ����������/���� �.��'�	�������� ���(�
����������� �� ��� 	����� ������' ���������� ��(���1/�2 ��� �������
���� �((��'��� �� ��� �.� (�	������� ��'����'��� �����(��(��	�(��
����	����� �0 ��� ��������! ������(���( ����� ��' ��8� �00��� ��� ����
���� �����/����2 ������� ���/���' �������� (�� �� ��������'
 '���
�����' ��' �����' �� ��� ���2 ��� ������� �0 ���� ��(���1/� ���� ��(<
�� � ����� �� ���	�� ����/��� �� �����	��� &,3$�)
 (�	������ ����
���(���( 0�(/���� &�->) ��' �:� �����(����	�'� ��� ���(�����������2
��� �����/���� �0 ��: ���(����������� .�� (����'������ ��(�����' ��
��� �����'/(���� �0 '����/���� (��'������ '/���� ��	��� �����������
��' ������(���( 0�(/���� �� ;B>������ �� ��� ���� ,3$#2 ���� ���� 	�'��
0�(����� ��� 	����' �����' � .�'� �((�����(�2 /� ���� .��� ��� ���
���(����� �0 �		�����8�' �� ���'����� & C���1���� �� ��2 ,3D�) 0�� ���
!
!���4��� ���&��"� � "��&
������ 6� &%� %����&� ������ %(
� ;�"��� � ���< ���&��"� �
������ % 
��� ��& �=��&(
�&���"��� !( �����
%�" >7 ,*-?0/ +20(
@AB������ �!( � 9��� 
%�" 7.0
,*-?./ 200?1207*(
9����84��& 9� )� #� ���%�&&� ���
�����::� )� �C�� �� ���&���
"���� �� ���&�� �( � 9�� %�"
9���%�� ��&%�
� + ,*->7/
D*?1DD-(
*(2 '"��� ��������
0���� '�	������ ��� ��(���1/� ��(�	� �����'/(���� ���/�� 0�� ����
���	� ��������2
6������������� �0 (���� ���� ���������� �� (�����0/������ �� ���� /���
0/� �� ��'/(� ��� �/	��� �0 ��������
 ��' 0�� ��(���8����� �0 � �������
.����� ��� (���2 =��� ���0��(��������� �((��'��� �� �����(��(��	�(��
����	����� �0 �������� ��<� ������(���( ������ �� '�������� �� ������
���� ��	��� ���'� �� ��: ����
 ��' �� ������� ��������������� ������(�
�����2 �(�/�� �.��'�	�������� ���(����������� (����� ������ �� �/���
	���'
 ������������ ��<� 	/���'�	�������� (���	��������� ��' '���(�
	��� ���(���	���� 	����'� ��� �����' ��' 0/����� '�������' 0�� ���
���������� �0 ����� (�	���4 ������� 	�4�/���2
���
"	�	�����
�'����� ��� ������� �4������' �� � (��� ���/�' �� '���(�����2 ���� ���
(/����� ����� �0 ��(������� ���� �� (�	������� �	��������2 ���� ����
��'���(���� ��������� ��' �������� ��(���1/�� &0�/����(��(� �� ������
��������
 @;: (�2 , �� �������) '�.� �� ,�� �������� ��� (��� (�� ��
���/���8�' �� � ��: ���
 .��� ,� 	� ����� ������� E (��������'��� 0��
������(� ��,�D (��� �1/�������� �0 ��	���	� (���� E ��� ���'�' �� ���
������(���( 0�(/���� ��� &������ �� ��2 ����)2 F��� ���(���	���� 	����
�'� ��� ��������� 	��� ��������� ���� ����� �������� 	����'�
 ��.��
��� �� ���(��(� ,� �� �� �� �0 ������� �� � ���� �� ��1/���' 0�� ���'
������� �� 	��� ���(���	����2
���
�
��	 �����
�
��� ��: �������� ��� ���� (�	���4
 ���� .��� ��0��	���(� ����� �� ��
�������� �� 0��' �4������' (������ �� � ������ �0 ����! ��<� /� ��'
'�.� ���/����' ��������
 ������������������ 	�'�0�(������2 �	���
�������� ��� ����� ���� ��� ��������(< �� ��� ������	�(� ���(�'/��
��(�/�� ��� ���� '���(���� ����	����� ��' �� �� �'C/���' ��' ����	��
8�' 	��/����2 ;��� ���(� � ���� ����� ��	� ��. '�������' ��0�.���
(�� ���0��	 0/��� �/��	���' ��' ���'���00 ����/�����2 ��� �����������
�0 1/���������� '����	�������� �0 ������� �	�/��� �� ����� �� ��������
'����'��� �� ��� ������� '���(���� ��(���1/� ������'2 6������ �����
�0 �������� ��� ���� 0/����� �������'2
#
3���
�"�������� ��� &���%��
����� ���� ��"��� &%� "���� ����
���&��� &� %��8�� 5�� &%� ��=&
� �
�� 6� ���� �&� ������&���
��
 &%� �
4��&��� �5 �&�����
&%� �����&�
 ���&���� �� &%� ���
"�&��= ��&�� 5��&%�� �������� ��
����4����
 6� ��� �5 &%� ��&���
��&�4� &� %��8���(
!�4��� �� 	��%�� !� 4��
@��&��" �( )�� &���%������ 7*
,7000/ 7+*?17+7*(
'� ��� &� � 
��"����� 9�������&
9���� :�� ��"�
�:��� ��
 5������
� �� � �&����
 ���� ���
 ��&%
%��% &%����%��& "��� ��� &���
"�&�� ��������(
3%� ����&��� �5 � ���& �� &%�
7�� "�� �� ��& �����% ��5���
"�&��� 5�� �� �=� & �
��&�5� ��
&��� �5 � ���&���( '
��&�5� �&���
 �� ���� 6� � %��4�
 ��&%
 %�"� �� �� "��� ��� &��"�&��
�������� �5 &%� ���&��� ���&(
* '�&��
� &���
�����	����������� �� ����	��
�	����	 
�
 ����	��������� ��� ������� ��' 0������ .�� �� �'����0�
�������� �� ���.� �� 0��/�� �! �����'� 	��� 0������������� &6F>)
.��(� .�� �����'/(�' �� 0�/� ��'����'��� ���/��
 ��(�/'��� 6�����
�� ��2 &,33")2 ��� ��� ��/� (��������� ��� ������� �0 �������� �� (/� �/�
�0 ��� ��� ����
 ��� ������� �� '������' ����'� ��� ��� ��/� .��� � ����
�������( ��8�	�
 	����� �������2 ��� (������� ���'/(��
 ��� �����'��
��� ��/��' 0��	 ��� ��/� ��' �/�	����' �� 	��� ���(���	���� �����
����2 F����� F=@:� ��> �����/	���� ��� �	�����'
 ��(�/�� ���� ���
������ �� ���'�� ���� ���(�������� �����	�2 ��� 	��� ���(��/	 .���
��� �((/������ 	���/��' �����'� 	����� �� 	��(��' .��� ��������(��
�����'� ���(��� �� �����/� '�������� /���� �'�1/��� �����0��	���(�
�����2 ���� �� 	��(� �� 0�/�' �� �����'� ��' ������� '��������
����	�( '�������� (�� �� ����(��'2 ��� :
= ��1/��(� �� ��� ����
���'��� 0��	�� (�� �� ��������(���� ���������' ���� ��� �	��� �(�'
��1/��(� .� ���� �� ��	��� ���� ��(�/�� �� �� ��� ���� ���(��(�� ��
����(� :
= .��� F=@:� '���
 �� �� ��� ���(�0�( ���/��2 G�/ (�� '� ��
������ .��� F�HF� ���/��2 ���(� ��� (������� ����� �0 ������� ���
<��.�
 ��������(�� ������( �����'� 	����� (�� �� ��������' ��' (�	�
����' .��� ��� �4����	������� '����	���' 	�����2 �0 � �/00�(����
�/	��� �0 �4����	����� �����'� 	����� 	��(� .��� ��� ��������(��
�����'�� .����� � �������
 ���� ������� �'����0�(����� .��� ���� (��0��
'��(� (�� �� �(�����'2
���� ���(�'/�� .��<� ���� .��� 0�� ������� �'����0�(�����2 ��.����
��� 	����' (�� �� (�	���	���' 0�� � �/	��� �0 �������2 �� �����
(��(/	����(��
 	��� ���(�0�( ��0��	����� �� ���'�' 0�� /��	���/�/�
������� �'����0�(�����
 ���(�0�(���� �����'� ��1/��(� ��0��	�����2
�
��� ���� 
	$�	��	 �����
�
 =	��� �(�' ��1/��(� �� ������ '��(��	��
������ ��0��	����� 0�� /��	���/�/� ������� �'����0�(�����2 :/����
	��� ���(���	���� �������� � �����'� (�� �� ����(��' 0��	 ��� ���(�
��/	 ��' 0���	����' ����'� ��� �����/	���
 ���	�' ���'�	 	���
���(���	����2 ��� ���/����� 0���	��� ��� 	����� ��� ��'�(����� �0
�	��� �(�' ��1/��(� ��' (�� �� /��' �� �������� � ��1/��(� ��''��2
=	��� �(�' ��1/��(� '�����' 0��	 	��� ���(���	���� (�� �� /��' ��
����(� ��� ���� ��� ������� '��������
 �/� ���� ��� -�� '�������� ��'
/��' 0�� �� 
�!� ��1/��(��� .��� ��(������2
%
������ ��� !����� ��
9����6� ��( 
��� 6��� D ,*--D/
D7?1DD7(
3%� &� %��8��� ��
 �&� 6� ��
�����
 ���� 6� 
�� ��6�
 ��
�&��� �� &%� "�&%�
 %��&���(
)4�� 5�� �������"� ��&%��& �
����"� 
�&�6���� �� ���5��
�
��&�5� �&���� ��� 5����6��
� ���� ��� ���� �%�� &%��� ��
�����% ��8��� � %�"����� ��
� �����4�
 ���� �5 &%� �����
���&�
�(
*(? B�� &����� ���&��"� �
��!
&������	��'����� �� ����	��
 ���'�� �	��� �(�' ��1/��(� ��0��	����� ���� ����� ���/(�/��� '���
�0 � ������� (�� �� '����	���' .��� 	��� ���(���	����! '��/�0�'�
���'�
 ������������������ 	�'�0�(������ ��<� ���������������
 ��/�(��
����
 �(������� ��' ���(���������2 ��� �'����0�(����� �0 ����� �0 '��/��
0�'� ���'�
 ��������������� ��' ���(��������� (�� ��� �� '����	���'
/���� ���'�	 	��� ���(���	����
 ���/�� 1/���������� �0 ����� 	�'��
0�(������ �� (����'������ 	��� '�00�(/��2
��#
���������� ����	�
��
��� 0����.��� �������� �� �/��/�'! =� 0���� ������ �������� ��� �'�����
0��'
 (����(����8�' ��' (��������' .��� 5������� 0�	�����72 ;�(� ��	�
���/(�/��� ��0��	������ ��� <��.�
 �	����� �/����� �0 �������� ���
�������' .��� 	��'�� ���������� ��' 	���/���� ��(���1/��! 0��
(
Theoretical gene product:
amino acid sequence
Theoretical
tryptic peptides
Match ? !
“ ” translationIn silico
“ ” digestionIn silico
DIPGHGQEVLIRLFKGHPETLEKFDKFKHLK
SEDEMKASEDLKKHGATVLTALGGILKKKGH
HEAEIKPLAQSHATKHKIPVKYLEFISECII
VLQS
“ ” digestion
elution of peptides
with trypsin
In vitro
Peptide
mass spectrum
2-D gel
spot cutting
Practical Experiment Genomic Database Search
DIPGHGQEVLIR
LFKGHPETLEK
KIHGQEVPLR
FDKFKHLK
TEGFHVPR
SEDEMK
ASEDLK
m/z
m/z
Genomic database:
DNA Sequence
���� �� �	
���� ������������
� ���� 
�
���� ���� �����	�
	������� ��� 
�
���� ������ 
� ��� �������� 
	
���� �	�
������� ���� � ���� 
� ���
	������ ������ 
� 
�
������
����� �	� �������������� ��	���� �	
� ��� 
�� 	������
�	���� 
� ��� ���
�� �������� 
� � ��	���� 
	�������
!���4��� &%����
�"��������
5��
���� �"���=�� ��
 5�� �
&����� ��5��"�&���� �5 &%�
���&���� ��� �� ����
 6� &%�
 �""���� ���
 ������&��� ��
"��� ��� &��"�&�� "�&%�
� ��
�&�� &���� ���&��"� � ,���
�6�4�/(
* '�&��
� &���
������(�
 ��	� �������� ��� 0����' �/� �0 � (��� ������ .��� �00�����
(���	��������� ��' ���� �������� .��� ����(� �������� ���/(�/��
 ��
��������������� (�	���4�� ��� �������' �0��� ���(�������� ����8�����
&��� �����.� �� @�	��' ��' F���
 ,33$
 ��' 6��'�� ��' F���
����)2
�)
$�"��
 �'� ���� �( 3���
�
��� 9��� ? ,*--?/ *D-1*27(
���
�� �� ���� �( E�&���
20. ,7000/ >D?1>2+(
��
���
�����	
��
	���� ������������
	
���� �����	
���
���� ��� 
�
��	����	
���� ���� ���� ���
������ 	
�
��
	 �
���
	��� ����������� �� 
�
� �� �	��
������ �����
 ��� �
���
	������ �� ��� ���� � ��� 	��
 �� �	��
��
 
��	
����� ��������� ��
���� �� �� �
��	��
 ��� ������� ��� �
�
 �	��
��� �	
�
��� ����	�
���
�
�� ��� 
�
��	����	
��� ������ �
� ��� �����
��
� �����
�
��� ����
�
�
���	� �
����!
� �	
 ��
� �
�
���	� �� ���� ��
 ������� �	��
����
���������
� ���� ����	
� �
�
����� �� ��
 ���
 �� �	������ ��� ��� �
���
����� ����
 �
��
� "#�### ��� "$#�### �
�
 �	��
��� �	
��
��
� �� �
 �	
�
�� �� � �
��� %
��
�
 �� ����
	
�� ������	����
�������� ������������� ��
 	
�� �
��
	 ������ �
 �	
����
�
�	�� ��
 �
����� ����	������� &� �	�
	 �� ������� ��
�
 �	��
�
���� ��
 ��'
 �� ��
 �
��� ��
 �
��������� ��� ��
 �������
	���
 �� ��
 �
�
����� �
���� ���
 �� �
 ��
!
��
�
� �
�	�	��
�� �����
 
�	��
��� (���	���� �� ������
� �	������
� ��
�
	
����� �	��
� �	�� �
�
	�� �	������� ��
 ��
��	
� �� 
��
��
�
� ���
�
��	�� ������ 	
���
� �� �
�
	�� �	�� �) * �� "*� &� ��
��
��
� ���� ��
 ���
	������ �� �&� ��
�
� �� ������	�����������
������������� ���� ��� ��
�
 �&� �
����
 �� ���� 	���
� &� �	���
���
 � �) �	���
�� * �� "* ��
� ��� 
����� &� �� �
��������� �	���
�
����� �� �
��	��
 ��� ������� �	��
��� ���� �& ����
 �)
""�$�
� ���	����
 �	����
 
���	� +���� �
����
� ��� �
 ������
� ��
��������� ��
 �
� ��� ��
 �
��
	 �� ��
 +�+ ,(-. �
�����
)��� ���
�
��	 �
���� �	��
��� ���� ��'
� ����
 �$# /�� ��
��� �� ��	�
�� ��
 ��� 
�
��	����	
��� �	��
���
�
�����
	�� ������
	�
�
��	����
 �� �
�����	� � ����
���
� ������ �� �
��	��	 �����
�
0
��
	 1
��
	�
�
	� ��� ���
�
 ���	���� 2 �##� 1��
��3 ) 3
	��� -��)
&+%��4 *�$�5�*#*$6�$ 7)�	����
	89 *�$�5�:##"5�$ 7.�
��	����8
�� �� ��������	
 �� ����	�
 �		
����
��� �� ��
 ����	
 �
	�
�
�
��	 �
	� ��
 ���� ������	
�
����
� ��� ��
 ����	
�
� ������	
 �������� ���	� �
 �
�
������������ �� ��
 �
�
 �����
����
�� ���������
���� ��	
��	�� �
���� ����
���
��
 ���	��
� ��
� ��
 ����	
�� ���
��	
 ���	�
� �� � ��� �
	�
�� ��� 
	
��������
��� ����	
��� �
 ��� �� � 	��
 �� ��
 ���
�� ��
 ��� �
���������
� !��
����� ����
�����
� ���
������� �
��	��
� +��
 �
	� ���	������� �	��
��� �� ���
�� �� ���
����� ���
	� �	
 ���� �
	��� �����
 �	
��	����� ���
&.;�
� �	�
������� �� �	�	������ +��
 �� ��
 �	��
��� �	
 
��	
��
� ��
�
	� ��� ���� �
��
	�� 1�
� ��
 ���� �
������
 �
���� <
	�������
����� < ������ �
 �����
�� ��	
 �	��
�� �
�� �
 ����
�
��
� ������� ��������� ;�	 ��
 �
�
����� �� ����	 ������
�����
�	��
�� ���� �
�� �
 ���	
��
�� ( ���
 ������� 	���
 �� ��
+�+ �
� �� 	
!
�	
� �� �	
�
�� �
	���� �� ������ ��
�����
�	��������
� ��������������� %
��
�
 �	��
����� �� � �
���� �� !
���������
�����	������ �� �	��
��� ���
�� �
� ���� �
	��� �����
 �	
���
	����� ��� ��
 �������� �	��
��� ��
 �
�
����� �
���� �
��
���
 	
�����
 !
���������
 ����	�������
� 	�
������������ &� �� �� ����
�� ����	����
 ���� ��
 	
�
��� �	
	
�	��
����
� ���
	���
 �� �� ���������
 �� ���� ��	������� ��
�	��
��� �
��
� ����
	
�� �����
��
� ����
� ����������	� 
��� �
����	 � 
���
� 
	� 
��
�
���� � �
 	�� 
 ��
�
	��� ��� 
 ������������ ������
�����
�����
������	�� �� ��� ��� 
����������
&� ��
 �	������ �	��
�
	
 ��
 ��	�� ���
������ ���
�
��	�� ���
����� ��
	
� �� ���� ������	������
 �
� 	��� �� ����� �	 ������� �
�
�� ��
 �
�
	��� ������� 
	
�� �
�
	�
��� 	
�
����� ��� ��		�
	 ��������
� ��
��	� ��
 �) �	���
�� �� ��
 
�
��	�� ��
��� ��
���� ��
 �����
 �� ����
�
� ���� ��
 �������� ���
 �� ��
 �
� 	��� ����� �
���
� ��
 �����
�� �� ��
 �	���
�� �� ��
 
�
��	�� ��
���
���� =�>;�		
��? �
����!
 ��� �
� 
�
� ��	 ���
� ��� �
���
�
�����
� ��@�	 �������������� ��
 ���
����� �� ��
 �
���� ��	 � ����
�
����� ���	���� �� �	
��
 � �	��
�� �������
 ��� �
� 	
�����'
�
�
	� ����� (��
	��� ��� (��
	��� 7"A5B8 ���
 �
����
� ����	
�
���
��� ��
	����� �	��
�
	
� �� �	
��	
 ��� 	
� �
�����
 ��� �
�� 
��
	
��
 ���� 	
�	��
����
 ����������� �� �	�
	 �� �
�
��� � =)
��� �	��
�
�� ���
�? 7(��
	��� ��� (��
	���� "AB�8�
��� 
	��
 -
�� ���� ���
� �# C �# �� ���
 �
���
 ������	� ��	 ��
��
!
��
 ������� 	
���
����� &� ��
 ���
�
�� ���� 
� �� "## ����� ���
�
 	
����
� �� � �# �� ���� ��
����
������� �
�� � ��
�	
����� �
��	��
���� ����
 �� "#�### �	��
��� ��
�� �
 	
���
� �� �
�� � �
�� &� �	���
��
"��
 ��
����	� �
�
	���
���
��
 �
����
��
��	�
� �������� �� ���		 ��
 ����
�
������
 �
����# ��		��
� �
�	���
��
��
 	��
	��� ��� �����
�����
$�
 	������ �������
 �� ��
 � %
��
� ��� �
 ����
��
� ����
���
� ���� ��
 �������
 �� ��
�
���� ���
������
��	�
� ��������# ��� �������
#
��
� ��� ���
 �
	���	
 ���������
���
 �����
���
����&'# ���
����&(�
���	 )����
� *+ ,�-.*/
00�10+2�
���
����&'# ���
����&(�
3	�� 3�
� �* ,�-*�/
.0-1.2*�
4	��
 5# 4���	6 7� 	
��������
�
��� �8 ,�--+/ �9021�9+-�
��� $������
������	 	
��������
���
���
 �
�
	�� ���
����� �� �	��
��� ��� �
 �
�
��
�� 3
	� �
� �	�
��
���� �����
 �� �����
 ����� �
� ��'
� ��/
 6# C *# �� 7D���
 ���
D����'� "AA$8�
������	�� 
�����
 ��
 ����
�� �
��������� �� 	
���
� ���� 	���������
���� E ��
�	��	���� �
�
������ ���� �� ���� �������
 ���� ������ �
���� &�
���� ���
� ��
 �	��
��� �	
 �����
� ���
	 ��
 �
��	����� �� ��
 �
�� (
�
��
	 �� ����
	
�� �
����� �	
 �����
�� ���� ��� ����
	
��
� �� �
��
��������� ���
�	���� ��� ������� 	���
� (���	���� �� ����
������� ��
)����� 	� ��� 7�###8 ���� �� "## ����
� �
	 �
�� ��� �
 �
�
��
� ����
�
������
 ����
	 �������� �� � �
��
 ��!��
 �	�� ��� �	�
� �	
��
	�� �	�������� ��
 �) �	���
��� ��	 ����
�
��	�� ���
���� ��	 ��� 
�
��	����	
��� �
	
 �	
��
� �� ��
�	
��������	
� ����
 �	
 ����
	
� �� � �
� �
��	
� ����
	
�� �����
���
� �� ������
	�� �
��
	�� ����� �	
 �����
��'
� ���
��
	 �� ��
	
������ ����/� ��
 ����
	
� ������� �
��
	� ���� ���
�
��	�� ������
�
��� ����	��
�
� ��
	 � ���
 ��
��	
� �	�� �) * �� "#� ��
�	 ��
�
���� �	��
	�� �� � ���� �
��
	��� ���
	 �� ��
�	 ���
�
��	�� ������ (�
��
 �
������� ��� ��		�
	 ��������
� �	
 ���	�
�� �
��
�
 ��
� 
����
�� � ����
	
� 1�
� �� 
�
��	�� ��
�� �� �����
�� ��
� ���	� �� ���	��
����	���� �� ��
�	 ���	�
� ����	�� ��
 ����
 �	 ��
 ������
 	
��
����
�
��� ��� ��	� �
����������� �����
 �) �	���
��� �
��
� ��
 
�
��
�	��
�� 1�
� ��
� 	
��� ��
�	 �&� ��
� ���
 ��
�	 ���	�
� ��� �
��
	
��
 �) ���
 �� ��
�	 �&� ���� ��	/� �
	� �
�� ��	 �����
 �
��	�������
%
�� �
��
�
 �
���
	��� ���������� �	
 �����
� ��	 ��
 �����	
���
�
���� ��� �
����!
� ���� ���	����� ���
� �	
 �
�
�� ����� �
�� �� �
�
�������'����� �� ��
 �	���
���
(� ���� �� ��
 �) �	���
�� ��	 ��
 ��	�� ���
����� ��
� ��� �
�
	��
�
� ���� ��		�
	 ��������
�� ��
 �������� �� ��
 �
����!
 ��� 	���
	
�
��
	���
� ��� ��
 ����
	�� �
	
 ��� 	
�	��
����
 
��
��� %����
�� ����� ��	������� �� ��
 ��		�
	 ��������
 ����
	
� �
	
 ��
 	
�����
��	 ����
	
��
� �� ��
 �	����
� �� ��
 �) �	���
���� -	���
�� �	��� ����
�	�����
� ���
�
��	�� ���
���� ���
 �
�� �� ����
� �� ������ ��� �����
��� ���
 �� ��
 ������ �	��
����
"�
	� �����	�
 ( 	
�
�� ��� ���� �
� ��
�� ��	 ��
 ������� ��
����� �	��
���4 �>;�		
�� 	� ��� 7"A558 ���
 ���	��
�
� � ������������
�� ��
 ��	�� ���
����� 	
�4 �.,)-. 7����
!
����	�
� �) �	���
��
�
��	����	
���8� )
	
 ��
 �����
 �� ����
� ���� ��
 ������ 
�� �� ��
�
� ��� ��
 �	��
��� �	
 �
��	��
� ����
 ��
 �	���
�� �	���� ����	��
��
 ������
� ��
 	
� �� �����
� ���
	 � �
���
� ���
 �
	���� )��
�
	�
�
 �� ��
 ���
 �����	 �� �� ��	� �� ����
�
 � ���� 	
�	��
��������� ��
�	��
��� �	
 ��� ���
�
� ��/
 �� &.;9 ��
 	
���
���� �� �����
� �� ��
�
��
	 �� ����
	
�� ��		�
	 ��������
 �������
��
�#
������ �# :����	�# ���
;������ 5� 	
��������
��� ��
,�999/ �8�.1�8���
$�
 ����# ����# ��� 	��� �
	 ����
�
���� ��
�� 
!�
���
���	
�<�		� )
��
� �� 8�. ��� .
��
�
 �� �
�
 ���
� � 	��< ��
����
���� ���
�# 	
����� ��
�
�������	 �������	��
 �� ��
���� �
	 ����# ��� �� 
���
��
� �� ��
 ���� ����
���
��� 
	
��������
��� ���
���
���
� �
� �
� �� � �
���
����
# ����� ������
�
��
������
�
�
��
�� �
��	��� )
����
 ��
�
������	 	����������# ����	
������ ����
��� ���	� �
 �����
�
�� ��
 �����
;=%���
		 >?# '�������"#
;=%���
		 >�� 3
		 �� ,�-../
��001��2��
$�
 ����
��� ��
 ��� �����
�#
��� ����<
� �
��
� ��
 ����
�
�
�� �����
� �����	
�
 �����
	���
��
� !��
����� ����
�����
$
�!	�	��� �% ����	���
 �� ��
	���
 ��
�
 �	���
��� ��������'
�
�) �	���
��� ��� �
� �
�
���
� �� �� ���
	�����
 �� ��		�
	 ������
���
� �� %@
��!���� 	� ��! 7"AB�8� ��
 �) �	���
��� �� ��
�
 �
�� �	
 �	
�
��	
� �� ��������
	�'��� ��	������
 �����
	� ���� ��	������
 �
�
	������
� ���������� ��	������� ��� �
	���	� ����� �	�
��� %
��
�
��
 �
��
	��� �	�
��� ��	���� ��
 �) �	���
��� �	
 ���
�� ��
 �	���
��
������ �	��� ��� �� ��� ����
��
� �� ��
 �����
 ������������
 ���	
�
����
 ����	������� �� ��������'
� �) �	���
��� ��� �
�
����
� 
����������� �� ��
 �	������
 �	
 ��
�� �� ��
 ���/ �� 0���
���
7"AA#8�
&� �	�����
� ��
�
 ��������'
� �) �	���
�� �
�� �	
 ���� �� � �����
��	 ��� ��/
 ��	����� �	���
�� �
��� ���� ����� �	
 ��������
	�'
� ����
� ���� �
���	�� ����
 �
	���
 ��� �
� �	
��
� �� �����
���� ���� ��
�
��� (���	���� �� ��
 �	��
�
	
 ���	��
�
� �� (��
��/� -F	�� ��
�����
 �	��
��� �	
 �
��	��
� �� �������
�� ��	���� ����� ���
 �
�
�
� �	�� ��
�
 ������
���	�
� �
� ����� 7+�	���
	 	� ��! "AB5� ���
-F	� 	� ��� "ABB� �###8�
��
 
�
 �� ��������'
� �) �	���
��� �� ��
 ��	�� ���
����� ���
�����
� ���� �
�������� ����������� ��	 ��� 
�
��	����	
���� �����
���� �
 �
��	��
� ���
	� +���
 �
� �
�	�� �	
����
����
	
� �
� ��	���
��� �
�����
� ����	
�
��� �	
 ��������
 �� ����

Outros materiais