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Microscopia Óptica Wagner M. Manoel Rgm : 7405 Eurides Felix P. Filho rgm :68337 Universidade de Mogi das Cruzes - umc PÓS-GRADUAÇÃO ENG. De MATERIAIS Microscopia Óptica 2 Engenharia de Materiais Microscópio de 1751 Inventado em 1590 por Hans Jansse, mas Leeuwenhoek por volta de 1650 a 1700 fez as primeiras observações microscópicas de materiais na área biológica. Microscopia óptica Microscópios ópticos: que ampliam a imagem por meio de um feixe de luz. Microscópios eletrônicos: que usam um feixe de elétrons para alcançarem ótimas ampliações, usados mais em pesquisas científicas. Instrumento de óptica destinado à ampliação e observação de pequenos objetos. A ampliação consiste no aumento em grande proporção dos diâmetros aparentes dos objetos a observar. 3 4 A dois tipos básicos de microscópios: os simples e os compostos. Simples, também conhecidos como lupas, ampliadores ou lentes de ampliação. Microscópio composto, consta em essência, de um sistema óptico formado por dois conjuntos de lentes. Esses conjuntos são os da objetiva, voltada para o objeto e que forma no interior do aparelho a imagem do mesmo, e a ocular, que permite ao observador ver essa mesma imagem. Microscopia óptica 4 5 Modalidades de observação em microscópios ópticos: Campo claro, Campo escuro. Contraste interferencial. Polarização. Contraste de fase. Fluorescência. Microscópio invertido. Laser e Microscópio estereoscópico. Microscopia óptica 5 Microscopia óptica 6 OCULAR OBJETIVAS E REVÓLVER PLATINA CHARRIOT MACROMÉTRICO MICROMÉTRICO DIAFRAGMA E CONDENSADOR ESPELHO BRAÇO BASE 6 MICROSCOPIA 7 muitos outros modelos foram aperfeiçoados para as mais variadas aplicações, que vão desde a biologia até, mais recentemente, a microeletrônica e a astronomia. 7 8 Estrura Do Instrumento Base e Platina Coluna Tubo 9 Estrutura do Instrumento Revólver. Ocular Diafragma e Condensador Objetivas Microscopia óptica 10 Esquema do microscopio óptico muitos outros modelos foram aperfeiçoados para as mais variadas aplicações, que vão desde a biologia até, mais recentemente, a microeletrônica e a astronomia. 10 Microscopia óptica = microscopia de luz técnica de observação de objetos e sistemas com ampliações que vão tipicamente de10X a1500 vezes Microscópio optico mais simples: - Lente de aumento Microscópios compostos - Dois conjuntos de lentes convergentes - Objetiva - Ocular Microscopia Óptica 11 11 A utilização da luz como única fonte de energia luminosa para as observações já se tornou ultrapassada, com o advento da microscopia eletrônica o estudo detalhado das estruturas celulares. A ampliação dos microscópios eletrônicos supera 100000 vezes o objeto e isso só é possível devido à utilização de um feixe de elétrons acelerado para iluminar o objeto ao invés de um feixe de luz. 12 Microscopia Óptica 13 Microscopia Óptica Aspectos importantes A intensidade luminosa é regulavel: aumenta a intensidade luminosa subindo o condensador e abrindo o diafragma ou diminuindo a intensidade luminosa descendo o condensador e baixando o diafragma. A ampliação consiste no grau de aumento da imagem em relação ao objeto. A ampliação total obtida com o microscópio óptico consiste no produto da ampliação da objetiva pela ampliação da ocular. Esta, sem distorção, não ultrapassa as 1200x. 14 14 O fator mais significativo para a obtenção de uma boa imagem é, contudo, o poder de resolução, que corresponde à distância mínima que é necessário existir entre dois pontos para que possam ser distinguidos ao microscópio. Para o microscópio óptico essa distância é de 0,2 µm devido ao comprimento de onda das radiações visíveis. Com efeito, a propriedade da ampliação só tem interesse prático se for acompanhada de um aumento do poder de resolução. 15 Aspectos importantes Sistema de iluminação 16 fonte de luz condensador de iluminação diafragma de campo espelho ajustável condensador de foco diafragma de abertura - responsável pelo controle da abertura angular do cone de luz para a iluminação da amostra 16 Sistema de iluminação 17 Luz refletida A luz não atravessa a amostra. 17
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