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Imunologia Clínica Prof. Esp. Sila Gouveia email: silas.gouveia@unirb.edu.br Reações de Precipitação e Aglutinação • Precipitação – Interações polivalentes entre anticorpos e antígenos; – Zona de equivalência – concentração correta de imunocomplexos (anticorpos-antígenos interagindo polivalentemente) • Os imunucomplexos formam uma extensiva rede de moléculas ligadas não covalentes de tal forma que a maioria das moléculas de anticorpos e antígenos estará sobre a forma de complexadas em grandes massas. Reações de Precipitação e Aglutinação • A reação de precipitação decorre da formação de imunocomplexos durante o desenvolvimento da resposta imune e, caso eles não sejam de alguma forma retirados de circulação, eles poderão se acumular em diferentes tecidos do hospedeiro, levando a injúria do tecido Reações de Precipitação e Aglutinação Reações de precipitação • As reações de precipitação envolvem a reação de antígenos solúveis com anticorpos IgG ou IgM para formar grandes agregados moleculares, as treliças • Ocorrem em dois estágios distintos: – Os antígenos e os anticorpos rapidamente formam pequenos complexos antígeno-anticorpo. Ocorre dentro de alguns segundos; – Os complexos antígeno-anticorpo formam treliças que se precipitam na solução. Pode levar minutos ou horas • O acúmulo de imunocomplexos nos diferentes tecidos poderá levar a doenças autoimunes como LES Reações de Precipitação e Aglutinação • Fundamento básico similar ao conceito de precipitação; • Baseada na capacidade do anticorpo ligar-se ao antígeno presente em uma superfície de uma grande partícula. – Alteração do estado físico do antígeno – interação secundária Reações de Precipitação e Aglutinação • A interação secundária pode ser identificada de diferentes maneiras: – Quando o antígeno está presente em uma superfície de uma partícula grande como uma bactéria, fungos, látex ou eritrócito, uma vez ligados, levam estas partículas se agruparem de modo visível – aglutinação – Identificação de grupos sanguíneos (ABO e Rh) - hemoaglutinação Reações de Precipitação e Aglutinação • Teste de Aglutinação Direta – detectam anticorpos contra quantidades relativamente grandes de antígenos celulares como hemácias, bactérias e fungos; • Teste de aglutinação indireta (passiva) – os anticorpos contra antígenos solúveis podem ser detectados por testes de aglutinação. Os antígenos são adsorvidos em partículas como latex. • Tipagem de anticorpos (aglutininas) Anti-A ou Anti-b e anti-D que se ligarão nos determinantes antigênicos A, B e D respectivamente presentes nas hemácias (aglutinogênicos) Reações de Precipitação e Aglutinação • Amostra de sangue na placa teste • Mistrura-se • Controle negativo • Mistura do reagente e leitura do resultado • A relação antígeno-anticorpo tem sido aplicada nas mais diversas metodologias para imunodiagnóstico das mais diferentes doenças existentes; Reações de Precipitação e Aglutinação Referências • Machado, S. L. Machado, R. D. Imunologia básica e aplicada às análises clínicas . UERJ