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Aulas práticas ALUNA: ANA CAROLINA URBANO DE ALENCAR PROFESSORA: SAMYA MACÊDO DISCIPLINA; HEMATOLOGIA CLINICA CURSO: FARMÁCIA PERÍODO: 8º COLETA DE SANGUE Material para o procedimento Algodão Álcool Uso de EPI’S Garrote Material para coleta Agulha descartáveis Seringa descartáveis Tubo com ou sem anticoagulante PROCEDIMENTO 1.Coloque a agulha na seringa sem retirar a capa protetora, não toque na parte inferior da agulha; 2.Movimente o êmbolo e pressione-o para retirar o ar; 3.Ajuste o garrote e escolha a vela; 4.Faça a assepsia do local da coleta com algodão umedecido em álcool a 70% ou álcool iodado a 1 %. Não toque mais no local desinfetado; 5. Retire a capa da agulha e faça a punção; 6.Solte o garrote assim que o sangue começar a fluir na seringa; 7. Colete aproximadamente 10 ml de sangue. Em crianças, colete de 2 a 5 ml; 8.Separe a agulha da seringa com o auxílio de uma pinça, descarte a agulha em recipiente de boca larga, paredes rígidas e tampa, contendo hipoclorito de sódio a 2%; 9.Oriente o paciente a pressionar com algodão a parte puncionada, mantendo o braço estendido, sem dobrá-lo; 10.Transfira o sangue para um tubo de ensaio sem anticoagulante, escorra delicadamente o sangue pela parede do tubo. Este procedimento evita a hemólise da amostra. Descarte a seringa no mesmo recipiente de descarte da agulha. PREPARAÇÃO DE ESFREGAÇO SANGUÍNEO Material para o procedimento Uso de EPI’S Conta gotas Estante Material para o esfregaço Material biológico (sangue) Lâminas PROCEDIMENTO O método de preparação para demonstrar melhor os tipos celulares do sangue periférico é o esfregaço de sangue. 1.Uma gota de sangue é colocada diretamente sobre uma lâmina de vidro e espalhada em uma camada fina pela sua superfície. 2.Isso é obtido espalhando-se a gota de sangue com a borda de uma lâmina histológica ao longo de outra lâmina, com o objetivo de produzir uma monocamada de células. 3.Esperar a lâmina secar e analisar IDENTIFICAÇÃO DE LEUCÓCITOS Material utilizado Lâminas coradas e fixadas Microscópio ótico A contagem diferencial dos leucócitos estabelece a frequência relativa de cada tipo de leucócito encontrado na extensão sanguínea, ou seja, a fórmula leucocitária relativa, que comparada ao número global de leucócitos fornece a fórmula leucocitária absoluta. Antes de iniciar a contagem dos leucócitos, deve-se verificar se a extensão sanguínea está bem feita e se a colo ração é satisfatória. PROCEDIMENTO 1.Conferir a identificação da lâmina que deverá ter o nome ou nº do paciente. 2.Com a objetiva de pequeno aumento, selecionar a área da extensão sanguínea própria para a contagem. Obs.: Numa contagem diferencial, devemos desprezar as regiões da “cabeça” e da “cauda” da extensão, utilizando -se apenas a região intermediária (corpo) para a contagem. Nessa região, as células estão melhor distribuídas facilitando a sua identificação. 3.Com a objetiva de imersão contar 100 leucócitos fazendo a diferenciação entre os diversos tipos de leucócitos, anotando separadamente cada um dos tipos contados. Para a contagem deve-se usar o método em “ziguezague”: iniciar a contagem transversalmente em vários campos microscópicos sucessivos, a parti r da margem da extensão sanguínea. CONTAGEM DE LEUCÓCITOS EM CÂMARA DE NEUBAUER Material para o procedimento Uso de EPI’S Conta gotas Estante Material utilizado Amostra biológica (sangue) Pipetas Ácido acético – Lisa as hemácias Azul de Metileno ou Violeta de Genciana – Cora os núcleos dos leucócitos Microscópio ótico DILUIÇÃO A diluição recomendada é de 1/20. Vários livros e técnicas falam para diluir 20μL de sangue em 400μL de líquido, que na verdade dá uma diluição de 1/21 (volume final de 420μL). O fator da diluição será utilizado nos cálculos mais na frente. Para o fator da diluição ser 20, a diluição deveria ser 20μL de sangue em 380μL de líquido (volume final de 400μL). CONTAGEM 1.Com uma pipeta encher os retículos da câmara de Neubauer, evitando excesso de líquido e bolhas de ar sob a lamínula, aderida firmemente à câmara por compressão daquela sobre esta, cobrindo ambos os retículos. 2.Focalizar a preparação em pequeno aumento no microscópio para localizar o retículo e observar a distribuição uniforme dos leucócitos. Em seguida, observar com aumento de 100x e 400x conforme a necessidade. 3.Fazer a contagem de todos os leucócitos encontrados nos quatro quadrantes da câmara de Neubaue INDENTIFICAÇÃO DE HEMOGLOBINA S Matérias Lancetas Lamina Lamínula Esmalte tipo base Algodão Lamina pronta de anemia falciforme Material para o procedimento Uso de EPI’S Conta gotas Estante PROCEDIMENTO 1. Com uma lanceta, fura o dedo do pascente, em seguida colocar uma gota de sangue na lamina, colocar a lamínula e passa a base para colar, deixe em repouso e no outro dia faz a visualização no microscópio. 2. O segundo procedimento é fazer a visualização da lamina no microscópio, primeiramente focando na objetiva de 10, quando achar o foco vai aumentando a objetiva. Aos poucos vai analisando e percorrendo a lamina parando para observar os drepanócitos.
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